變異鏈球菌htrA和clpP基因?qū)ζ溲趸瘧さ挠绊?pdf

1、目的: 建立變異鏈球菌標準株、htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株的生長模型，觀察比較幾種菌株在氧化應激條件下的生長情況的差異，研究變異鏈球菌htrA、clpP基因缺失對其氧化應激耐受性的影響。
　　 方法: 利用變異鏈球菌標準株及前期實驗成功構(gòu)建并保存的htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株，測定4種菌株在普通TPY液體培養(yǎng)基中不同時段的吸光度(A值），并將

2、4種菌株分別培養(yǎng)在含H2O2終濃度為0.0005％的TPY液體培養(yǎng)基中37℃微需氧條件下培養(yǎng)，從接種入培養(yǎng)基開始以2h間隔采用酶聯(lián)免疫檢測儀在600nm下測定各菌株在各時間點的吸光度值，分別確定各菌株在不同培養(yǎng)條件下的生長情況并繪制細菌生長曲線比較其生長情況的差異，并進行統(tǒng)計學分析。
　　 結(jié)果: 1.在普通TPY液體培養(yǎng)基中，htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株生長周期均發(fā)生改變，對數(shù)期峰

3、值提前且此階段生長速度較標準快(P＜0.05)，而標準株的對數(shù)期峰值及穩(wěn)定期A值均明顯高于缺陷株(P＜0.05)，24h測得缺陷株A值比標準株A值明顯降低;2.在含H2O2終濃度為0.0005％的TPY液體培養(yǎng)基中，與標準株相比，htrA單基因缺陷株、clpP單基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株對H2O2敏感性增強，此時標準株在各生長時期的生長速度均高于缺陷株的生長速度(P＜0.05)，標準株和各缺陷株生長能力較無H2O2條件下