新型衍生試劑的合成與開發(fā)及高效液相色譜的分析應(yīng)用.pdf

1、反相高效液相色譜（HPLC）因其高效的分離分析能力，已被廣泛的應(yīng)用在生物化學(xué)、分析化學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、有機(jī)化學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)和食品衛(wèi)生的諸多領(lǐng)域，已經(jīng)成為分析分析復(fù)雜化合物的最強(qiáng)手段之一。高效液相色譜雖然與傳統(tǒng)液相色譜沒有本質(zhì)上的區(qū)別，但是其靈敏度和分離度都要高于傳統(tǒng)液相色譜。高效液相色譜配備熒光檢測(cè)器，用光衍生化的手段來實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)物的分析因其超高的靈敏度，也成為了高效液相色譜比較流行的手段。本論文主要設(shè)計(jì)合成了三種新型熒光衍生試劑，以及一種質(zhì)

2、譜增敏試劑。并運(yùn)用實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的衍生試劑實(shí)現(xiàn)了對(duì)酚類和三帖酸類的分析，具體工作如下：
　　第一章：簡(jiǎn)單敘述了高效液相色譜的基本理論和國內(nèi)外研究進(jìn)展；介紹了熒光產(chǎn)生的原理及其熒光衍生化；列舉了已經(jīng)被廣泛應(yīng)用的熒光衍生試劑。
　　第二章：三種熒光探針：10-(3-氰硫基丙基)-4,10-二氫-9-吖啶-9-酮、9-(3-氰硫基丙基)-9,9-二氫-4-咔唑、4-{(二氟硼烷基)[2-(吡啶-2-肼基)]甲基}苯胺的合成及其表征；一

3、種質(zhì)譜增敏試劑：4-苯基-1-(3-氰硫基丙基)-1H-[1,2,3]三唑的合成及其表征。
　　第三章：以咔唑-9-乙基氯甲酸酯(CEOC)為柱前衍生試劑，采用高效液相色譜熒光法測(cè)定水產(chǎn)品中的五氯苯酚。采用反萃取的手段對(duì)樣品進(jìn)行純化，目標(biāo)產(chǎn)物的回收率高于92.7％，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于8.9%。實(shí)驗(yàn)對(duì)溫度、PH值及其衍生試劑的用量進(jìn)行了優(yōu)化，比普通的液相法檢測(cè)靈敏度要高。
　　第四章：以10-苯基-吖啶酮-2-磺酰氯（

4、PASC）為柱前衍生試劑，采用柱前衍生高效液相色譜熒光法測(cè)定熱敏紙中的烷基酚。樣品采用C18固相萃取柱凈化，三個(gè)目標(biāo)化合物的平均回收率均高于80.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于8.0%。對(duì)衍生反應(yīng)溫度、pH值、衍生試劑用量和固相萃取條件進(jìn)行了優(yōu)化，方法靈敏度為1.3–1.6 ng/mL，較普通的液相色譜法有顯著提高。這是國內(nèi)首次對(duì)于熱敏紙中的烷基酚含量進(jìn)行的系統(tǒng)分析，結(jié)果表明購物小票等熱敏紙普遍含有雙酚A，極易對(duì)人類造成危害。

5、　　第五章：以2-(5-苯并吖啶)對(duì)甲苯磺酸乙酯（BAETS）為柱前衍生試劑，采用高效液相色譜熒光法（HPLC-FLD）對(duì)寬葉羌活莖、根和葉中的三萜酸含量進(jìn)行分析。對(duì)衍生的條件包括反應(yīng)溫度、緩沖溶液的選擇、衍生化時(shí)間的長(zhǎng)短和衍生試劑用量等進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明K2CO3用量為10 mg，衍生溫度為90℃，衍生時(shí)間為30 min時(shí)，熒光衍生效率最大。以乙腈和水為流動(dòng)相，在C18反相柱上實(shí)現(xiàn)了對(duì)5種三萜酸衍生物的快速分離。方法線性相關(guān)系數(shù)均大