高活性酪蛋白磷酸肽螯合鋅的制備及表征.pdf

1、鋅對(duì)人體健康非常重要，鋅缺乏導(dǎo)致多種疾病，而酪蛋白磷酸肽是一種具有促進(jìn)鋅離子吸收的活性多肽，可以螯合成酪蛋白磷酸肽螯合鋅，開(kāi)發(fā)作為一種補(bǔ)鋅劑。目前市場(chǎng)多見(jiàn)的補(bǔ)鋅制劑如硫酸鋅等老一代無(wú)機(jī)鋅鹽，相比酪蛋白磷酸肽螯合鋅等新一代多肽螯合補(bǔ)鋅劑，雖然成本低，來(lái)源易獲得，但刺激度高，毒性大，生物利用度低，酪蛋白磷酸肽螯合鋅在活性和安全性均優(yōu)于前一代鋅補(bǔ)劑。因此本研究以具有鋅螯合活性的酪蛋白磷酸肽(CPPs)為研究對(duì)象，可開(kāi)發(fā)作為新一代有機(jī)鋅補(bǔ)劑的材

2、料。
　　以堿性蛋白酶酶解得到的酪蛋白磷酸肽為原料，經(jīng)Q Sepharose FF陰離子交換色譜與RP-HPLC（反相高效色譜）色譜法兩步分離后得到的高鋅螯合活性的CPPs，在pH7.0，CPPs與鋅源物料比4∶1，60℃，80min反應(yīng)條件下進(jìn)行螯合。經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測(cè)，該肽段分子量10kDa，螯合活性達(dá)88.68μg/mg，與純化前粗肽相比，多肽含量提高3.6倍，鋅結(jié)合量提高了10倍。
　　以上述兩部純化后得到的

3、高鋅螯合活性的酪蛋白磷酸肽為原料，對(duì)比螯合前后，經(jīng)氨基酸組成分析、紫外光譜、紅外光譜以及固體核磁共振13C譜、1H譜、31P譜解析，結(jié)果表明，螯合前后CPPs的結(jié)構(gòu)及氨基酸組成發(fā)生了明顯變化，其中的磷酸基團(tuán)參與了螯合，其主要結(jié)合位點(diǎn)是-COOH、-NH2及P-OH中的-OH。
　　在體外模擬胃腸道消化環(huán)境，考察酪蛋白磷酸肽螯合鋅的生物利用度（溶解度以及透析度），對(duì)比葡萄糖酸鋅和ZnSO4的生物利用度，酪蛋白磷酸肽螯合鋅則高于其兩者