抗疏健骨方提取工藝及制劑前評(píng)價(jià)研究.pdf

1、目的:通過對(duì)抗疏健骨方中各藥味的提取工藝進(jìn)行研究，確定最佳工藝條件，并對(duì)其主要指標(biāo)成分的理化性質(zhì)及體內(nèi)外腸吸收情況進(jìn)行考察，為抗疏健骨方的劑型選擇奠定基礎(chǔ)。
　　方法:1、根據(jù)《中國藥典》2010年版（一部）各飲片項(xiàng)下的有關(guān)規(guī)定，對(duì)抗疏健骨方中各藥味進(jìn)行鑒別、檢查及含量測(cè)定;2、以β-蛻皮甾酮含量及浸膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過單因素設(shè)計(jì)試驗(yàn)及L9(34)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)篩選抗疏健骨方最佳水提取工藝;在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用星點(diǎn)設(shè)計(jì)-效應(yīng)

2、面法優(yōu)化醇提取工藝條件:以乙醇濃度、溶劑用量、提取時(shí)間為自變量，以淫羊藿苷、總黃酮含量及浸膏得率的加和為因變量，對(duì)自變量各水平進(jìn)行多元線性回歸及二項(xiàng)式擬合，用效應(yīng)面法優(yōu)選最佳工藝條件，并進(jìn)行預(yù)測(cè)分析;以β-蛻皮甾酮、淫羊藿苷、丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量轉(zhuǎn)移率為工藝評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用高效液相色譜法對(duì)常壓干燥和減壓干燥工藝條件進(jìn)行篩選和比較。3、采用高效液相色譜法對(duì)抗疏健骨方主要指標(biāo)成分的表觀溶解度、油水分配系數(shù)進(jìn)行研究。4、建立大鼠離體外翻腸囊

3、模型和大鼠在體腸灌流模型，通過離體法和在體法相結(jié)合，研究抗疏健骨方主要指標(biāo)成分的腸吸收特性。
　　結(jié)果:1、實(shí)驗(yàn)所用各飲片均符合《中國藥典》2010年版（一部）各項(xiàng)下的質(zhì)量要求;2、影響水提取工藝各因素的作用主次為:C提取次數(shù)＞B提取時(shí)間＞A溶劑用量，最佳提取工藝條件是A2B2C3D1:用10倍量水，提取3次，每次90min;醇提取工藝最佳條件為:8倍量70％乙醇（首劑量10倍），回流提取3次，每次120min;通過比較減壓干燥樣

4、品中的β-蛻皮甾酮、淫羊藿苷、丹參酮ⅡA和丹酚酸B含量轉(zhuǎn)移率均明顯高于常壓干燥，且損失少、含量穩(wěn)定，轉(zhuǎn)移率分別為80.5％、77.7％、74.09％和76.36％。3、37℃下淫羊藿苷在水中24h的平衡溶解度為83.25mg/L，表觀油水分配系數(shù)為2.32(logPapp=0.36);37℃下β-蛻皮甾酮在水中24h的平衡溶解度為16.87mg/L，表觀油水分配系數(shù)為0.37(logPapp=-0.41);37℃下丹酚酸B在水中24h的

5、平衡溶解度為3035.18mg/L，表觀油水分配系數(shù)為0.038(logPapp=-1.410)。4、在離體腸吸收試驗(yàn)中淫羊藿苷的吸收率最高，丹酚酸B的吸收率最差，在十二指腸段和空腸段對(duì)淫羊藿苷、β-蛻皮甾酮和丹酚酸B的吸收均高于回腸段;在體腸吸收實(shí)驗(yàn)顯示:淫羊藿苷以空腸部位的吸收最高，且與回腸的Ka和P(o)ff有顯著性差異（P＜0.05），十二指腸次之，回腸部位吸收最慢。對(duì)β-蛻皮甾酮而言，吸收同樣以空腸段最高，但各腸段間(P＞0.

6、05)均無顯著性差異。丹酚酸B的吸收以十二指腸段最高，空腸次之，回腸吸收較差，各腸段間（P＞0.05)均無顯著性差異。因此初步判斷十二指腸與空腸是抗疏健骨方中淫羊藿苷、β-蛻皮甾酮和丹酚酸B的主要吸收部位，三種成分間以淫羊藿苷吸收最好，丹酚酸B吸收最差。
　　結(jié)論:抗疏健骨方分別采用水提?。ò仔g(shù)、牛膝）、70％乙醇提取（淫羊藿、杜仲）、丹參單獨(dú)乙醇回流-水提取的方案提取主要的有效部位，驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明該法合理可行，為抗疏健骨方的提