單光子和雙光子激發(fā)的均二苯乙烯型金屬離子熒光探針.pdf

1、最近雙光子顯微鏡成為生物活體樣品成像的重要工具，為了充分利用雙光子顯微鏡，關(guān)鍵是設(shè)計合成具有雙光子吸收的熒光探針。均二苯乙烯型熒光團(tuán)由于具有較大的雙光子吸收截面積，被廣泛應(yīng)用于雙光子激發(fā)熒光探針的合成中。 本文合成了受體4-N1-N-二(乙酰氧乙基)氨基苯甲醛(Receptor-1)，受體4-N1-N-二(乙氧羰甲基)氨基苯甲醛(Receptor-2)、3-乙氧羰甲氧基-4-N1-N-二(乙氧羰甲基)氨基苯甲醛(Receptor

2、-3)，通過Vilsmeier反應(yīng)和Wittig-Homer反應(yīng)合成了四個D-π-A型二苯乙烯探針NSB、CSB，四個D-π-A-π-D對稱型均二苯乙烯熒光探針DSBI-DSB4和一個D-π-A-π-D不對稱型均二苯乙烯熒光探針DSB5。 比較D-π-A型二苯乙烯探針NSB、CSB的光譜性質(zhì)，測試了其對金屬離子的選擇性，pH滴定發(fā)現(xiàn)NSB型探針表現(xiàn)出不同的耐酸性：NSBl對酸敏感，NSB2具有很強(qiáng)的耐酸性，通過比較NSBl與NS

3、B2的核磁數(shù)據(jù)驗證這種差距與羰基的位置有關(guān)。 為了研究探針分子對金屬離子選擇性，分別合成了DSBl、DSB2、DSB4三個探針分子，測試了其對金屬離子的選擇性，由受體Receptor-2合成了DSB3熒光探針，并測試了其對金屬離子的響應(yīng)，比較了受體Receptor-l與Reeptor-2選擇性的差異，這種差異和羰基的位置有關(guān)；由于以均二苯乙烯為母體的熒光探針具有較大的共軛體系，存在分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移，對溶劑極性比較敏感即溶劑化作用，

4、隨溶劑極性的增大會出現(xiàn)發(fā)射波長紅移的現(xiàn)象；DSB2分子的設(shè)計是為了增加均二苯乙烯型分子的醇溶性，并測試了其對pH的響應(yīng)情況。DSB型探針分子在不同溶劑中的熒光量子效率相差較大，在強(qiáng)極性溶劑中熒光較弱。當(dāng)采用800 nm激發(fā)時，發(fā)射光譜與單光子激發(fā)相似，強(qiáng)度要弱于單光子激發(fā)強(qiáng)度?？偨Y(jié)上述實驗，合成了D-π-A-D不對稱型熒光探針DSB5，并測試了其對金屬離子的選擇性、溶劑效應(yīng)以及雙光子激發(fā)光譜，發(fā)現(xiàn)當(dāng)加入Ag+或Hg2+后熒光增強(qiáng)。