農(nóng)用黃赭色鏈霉菌菌劑的制備工藝及應(yīng)用效果研究.pdf

1、鏈霉菌（Streptomyces）是一類具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值的微生物類群，它在不同的自然生態(tài)環(huán)境中分布廣泛，種類繁多，具有不同的代謝功能。微生物菌劑能夠緩解使用化學(xué)農(nóng)藥所引起的農(nóng)田土壤惡化、土壤板結(jié)、肥力下降等環(huán)境污染問題，并且能夠促進(jìn)作物生長(zhǎng)，改善產(chǎn)品品質(zhì)，因此中國(guó)微生物菌劑的生產(chǎn)及應(yīng)用呈不斷上升的趨勢(shì)。新劑型的不斷研制、工藝設(shè)備的不斷革新及應(yīng)用推廣面積的增大，使中國(guó)微生物菌劑的生產(chǎn)又進(jìn)入了一個(gè)新的發(fā)展時(shí)代。
　　本實(shí)驗(yàn)

2、室自主篩選得到一株菌株 SN16，經(jīng)前期試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，菌株 SN16對(duì)層出鐮刀菌（Fusarium proliferatum）、串珠鐮刀菌（Fusarium moniliforme）等有較好的拮抗作用。通過形態(tài)學(xué)、生理生化鑒定以及16S rDNA序列分析，將其鑒定為黃赭色鏈霉菌（Streptomyces silaceus）。
　　本研究首先對(duì)鏈霉菌 SN16發(fā)酵條件進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化，篩選出利于鏈霉菌SN16發(fā)酵的氮源、碳源和適宜其發(fā)

3、酵的pH。再利用響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)（response surface methodology，RSM），以發(fā)酵后鏈霉菌 SN16干重為響應(yīng)值，對(duì)鏈霉菌的搖床發(fā)酵培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。確定最優(yōu)的液體發(fā)酵條件為酵母浸粉1.05g，可溶性淀粉19.83g，pH為6.96。菌株 SN16在此液體發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵后，其干重的實(shí)測(cè)值為0.704±0.022g，與預(yù)測(cè)值間差距小。
　　為了制備鏈霉菌SN16菌劑，確定了鏈霉菌SN16最佳的固態(tài)

4、發(fā)酵工藝。其中，固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基為80％的小米粉和20%的麥麩，發(fā)酵條件為初始含水量50%，接種量10%， pH自然，培養(yǎng)7d。固態(tài)發(fā)酵條件優(yōu)化后，菌株 SN16原粉的活菌數(shù)達(dá)到9.43×108cfu/g。
　　為了提高黃赭色鏈霉菌菌劑的生物穩(wěn)定性，通過對(duì)載體、保護(hù)劑和分散劑等助劑進(jìn)行優(yōu)化，確定黃赭色鏈霉菌SN16菌劑的最佳配方，利用小麥、小白菜和煙草等幼苗的盆栽試驗(yàn)驗(yàn)證黃赭色鏈霉菌 SN16菌劑的應(yīng)用效果。結(jié)果表明，黃赭色鏈霉菌

5、SN16最佳配方為：黃赭色鏈霉菌SN16原粉20%，1mg/mL海藻酸鈉溶液24%，10mg/mL羧甲基纖維素鈉（CMC）溶液24%，硅藻土32%。在這種配方下，4℃保存60d后，該菌劑的生物量是2.45×108cfu/g；常溫保存下60d，后其生物量能達(dá)到0.94×108 cfu/g。
　　用黃赭色鏈霉菌 SN16發(fā)酵液處理小麥種子，對(duì)小麥種子的萌發(fā)具有促進(jìn)作用。經(jīng)稀釋1000倍的發(fā)酵液處理后的小麥種子，與對(duì)照相比，其發(fā)芽率、發(fā)

6、芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)分別提高2.76%、8.67%和14.83%。同樣，用該稀釋倍數(shù)的發(fā)酵液對(duì)青梗小白菜進(jìn)行處理，與對(duì)照相比，其發(fā)芽率、發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽指數(shù)分別提高1.00%、1.66%和4.94%。
　　盆栽實(shí)驗(yàn)表明，2%的黃赭色鏈霉菌SN16菌劑對(duì)小麥幼苗的根長(zhǎng)、鮮重、干重起到顯著的促進(jìn)作用，分別比對(duì)照組提高了15.77%、68.42%、101.90%。在0.5%的菌劑處理下的小白菜幼苗的長(zhǎng)勢(shì)均比其它處理和對(duì)照的效果明顯，小白菜幼苗的株