衍生化法測定蚯蚓、山藥中巰基化合物的研究.pdf

1、巰基化合物廣泛存在于生物體內(nèi)，在生物體內(nèi)扮演者重要的角色。巰基化合物具有抗氧化﹑延緩衰老﹑重金屬解毒﹑清除自由基等活性功能。巰基化合物的巰基會在提取過程中受胞外環(huán)境的影響，容易使巰基氧化，而導(dǎo)致巰基化合物的測定結(jié)果不準(zhǔn)確，甚至漏檢。近年來，生物樣品中巰基化合物提取液的測定，大部分經(jīng)過細(xì)胞破壁、衍生化、除蛋白等前處理過程。本研究以三種不同前處理方法對巰基化合物的測定進(jìn)行了探討，其細(xì)胞破壁與衍生化為一體的同步衍生化法提取得到的樣品提取液的靈

2、敏度最高。采用細(xì)胞破壁與衍生化為同步提取方法，得到準(zhǔn)確的巰基化合物的含量信息。利用UV-Vis紫外分光光度法和高效液相色譜法測定蚯蚓中GSH﹑Cys和總巰基的含量，此外光譜法測定山藥中總巰基和GSH含量。
　　第一章緒論簡單介紹巰基化合物研究概況與巰基化合物的分析方法，提出本論文的選題思想和本課題的主要研究內(nèi)容。
　　第二章5,5`-二硫硝基苯甲酸衍生化法測定蚯蚓中巰基化合物的含量
　　利用衍生化試劑5,5`-二硫硝基

3、苯甲酸（DTNB），采用UV-Vis紫外分光光度法測定蚯蚓中的總巰基含量以及高效液相色譜法選擇性的測定GSH﹑Cys。GSH、Cys和總巰基含量分別為0.6268μmol/g、0.8511μmol/g和4.5087μmol/g。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)，蚯蚓中含有相對較高的Cys含量，說明蚯蚓具有很高的同化代謝土壤中硫的能力并使其轉(zhuǎn)換成Cys,為GSH和MTs生物合成提供充足的含巰基氨基酸源。
　　第三章光譜法測定蚯蚓中總巰基和GSH的含量<

4、br>　　本研究利用4,4`-二硫代聯(lián)吡啶(4-DPS)和鄰苯二甲醛(OPA)衍生化試劑，光譜法測定蚯蚓中總巰基和GSH含量。從實驗結(jié)果，蚯蚓中富含GSH和巰基化合物，可知蚯蚓體內(nèi)的含巰基化合物對重金屬具有強(qiáng)的配位作用，這為利用蚯蚓生物修復(fù)重金屬污染提供了重要的化學(xué)依據(jù)。
　　第四章衍生化法測定山藥中的谷胱甘肽和總巰基的含量
　　利用4,4`-二硫代聯(lián)吡啶(4-DPS)和鄰苯二甲醛(OPA)為衍生化試劑，采用三種不同前處理方