鄰苯二甲酸二異丁酯的熒光免疫分析研究.pdf

1、鄰苯二甲酸二異丁酯屬于塑化劑(PES)鄰苯二甲酸酯類，作為工業(yè)材料加工助劑。于1950后大量應(yīng)用于塑料制品的加工，主要用于增強(qiáng)材料的延展性、耐久性等加工性能。在缺乏相對(duì)完善的毒理學(xué)研究的情況下，添加了塑化劑的塑料制品大量地應(yīng)用到食品包裝行業(yè)、玩具業(yè)、醫(yī)療器械和家庭常用用品方面。近年來(lái)，大量的毒理學(xué)研究表明:塑化劑鄰苯二甲酸二異丁酯是一類環(huán)境雌性激素，這類物質(zhì)進(jìn)入人體后，可以影響人體正常分泌物的合成，釋放，轉(zhuǎn)運(yùn)，結(jié)合等過(guò)程，進(jìn)而阻礙人體的

2、正常發(fā)育。因此，建立其免疫分析方法來(lái)實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)食品中的二異丁酯污染具有十分重要的意義。
　　目前鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測(cè)手段主要有高效液相色譜、氣相色譜，往往這些色譜分析方法和質(zhì)譜聯(lián)用。這類分析方法雖然可以很準(zhǔn)確地測(cè)量出水或食品中鄰苯二甲酸二異丁酯含量且檢測(cè)限較低，但這類分析方法分析時(shí)間長(zhǎng)、所需儀器昂貴、需要專業(yè)的人員進(jìn)行分析操作且無(wú)法實(shí)現(xiàn)大批樣品的快速檢測(cè)。因此，很有必要開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單、快速、可靠、靈敏、廉價(jià)的檢測(cè)鄰苯二甲酸二異

3、丁酯的方法。免疫分析具有方便、成本低、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)可以滿足簡(jiǎn)單、快速檢測(cè)鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測(cè)要求。
　　本文通過(guò)鄰苯二甲酸結(jié)構(gòu)類似物4-硝基鄰苯二甲酸作為中間體，經(jīng)過(guò)羧基酯化和硝基還原來(lái)獲得具有鄰苯二甲酸二異丁酯結(jié)構(gòu)特征、同時(shí)得到可修飾氨基。再將得到的目標(biāo)分子結(jié)構(gòu)衍生物采用氨基重氮化與載體蛋白牛血清白蛋白(BSA)、雞血清白蛋白(OVA)偶聯(lián)分別制得免疫原和包被原。免疫抗原注射免疫新西蘭兔，制備多克隆抗體，利用高靈敏度抗體建

4、立塑化劑鄰苯二甲酸二異丁酯的免疫分析方法。
　　利用鄰苯二甲酸二異丁酯多克隆抗體建立間接競(jìng)爭(zhēng)熒光免疫分析方法，經(jīng)過(guò)分析條件的優(yōu)化，分析方法的線性范圍為10.47～357.06 ng/mL(R2=0.991)，檢測(cè)限為5.82ng/mL。將建立的分析方法應(yīng)用到植物油樣品中鄰苯二甲酸二異丁酯的檢測(cè)，一方面該方法的樣品加標(biāo)回收率為79～102％，另一方面利用該方法測(cè)得的油樣鄰苯二甲酸二異丁酯含量與傳統(tǒng)GC-MS結(jié)果相關(guān)度較高，表明該方法