巰基物種熒光探針合成及性質(zhì)研究.pdf

1、熒光探針由于其選擇性好、靈敏度高、響應(yīng)時間短、可運(yùn)用于細(xì)胞和生物體內(nèi)以及操作簡便、合成簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，在生物化學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥物學(xué)、生命科學(xué)、環(huán)境化學(xué)等方面有著較為廣泛的應(yīng)用。脂肪族硫醇在人體的生理活動中發(fā)揮著非常重要的作用，通常情況下脂肪族硫醇例如谷胱甘肽(GSH)、同型半胱氨酸(Hcy)、半胱氨酸(Cys)的含量變化與許多疾病有關(guān)，例如白細(xì)胞減少，牛皮癬，肝損傷，癌癥和艾滋病(AIDS)等。芳香族硫醇是一類高污染性和高毒性的小分子有

2、機(jī)化合物。據(jù)報(bào)道，長期暴露于苯硫酚的蒸汽或其液體中會造成一系列嚴(yán)重的健康問題，例如呼吸道疾病會造成呼吸困難，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，四肢麻木，肌肉無力，嚴(yán)重時甚至?xí)?dǎo)致昏迷或者死亡。
　　由于巰基氨基酸具有相似的結(jié)構(gòu)和反應(yīng)活性，使得要高選擇性的檢測某一種巰基氨基酸而不受其他的巰基氨基酸的影響較為困難。因此設(shè)計(jì)一種能準(zhǔn)確和專一性的檢測其中某一種巰基氨基酸的熒光探針具有較大的挑戰(zhàn)。同時由于苯硫酚和氨基苯硫酚具有較為相似的結(jié)構(gòu)和反應(yīng)活性，因此

3、需要一種有效的方法實(shí)現(xiàn)有選擇性的檢測其中一種苯硫酚。
　　具體的工作如下:
　　1.設(shè)計(jì)和合成了以花菁染料(IR-780)為熒光團(tuán)，以4-氨基苯硫酚為識別基團(tuán)的近紅外的檢測GSH的熒光探針。當(dāng)在探針中加入GSH之后，探針的熒光強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，除此之外熒光探針還能夠應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)檢測GSH。
　　2.研究發(fā)現(xiàn)，商業(yè)化的IR-780具有顯著的測定氨基取代的苯硫酚的能力。特別的，與3-和4-氨基苯硫酚相比，2-氨基苯硫酚與菁染料

4、反應(yīng)具有最大強(qiáng)度的熒光變化，這意味著菁染料IR-780可以從位置異構(gòu)體區(qū)分2-氨基苯硫酚。盡管2-氨基苯硫酚淬滅花菁染料的熒光，它們的復(fù)雜系統(tǒng)進(jìn)一步檢測GSH而不受半胱氨酸和同型半胱氨酸的影響。值得一提的是，在活細(xì)胞中也可以觀察到類似的選擇性。
　　3.設(shè)計(jì)和合成了以4-氯-7-硝基苯并-2-氧雜-1，3-二唑(NBD-Cl)為熒光團(tuán)的熒光探針。該熒光探針經(jīng)由一步合成得到，能夠?qū)崿F(xiàn)在不同的pH條件下選擇性的識別同型半胱氨酸(Hcy