基于轉(zhuǎn)錄組技術(shù)發(fā)掘紅肉軟棗獼猴桃果實花色苷合成關(guān)鍵結(jié)構(gòu)基因.pdf

1、本研究以紅肉軟棗獼猴桃‘天源紅’為試材，綠肉軟棗獼猴桃‘永豐一號’為對照品種，測定盛花后8個時期果肉樣品的色差指標(biāo)值a、b;采用高效液相色譜法，對盛花后8個時期果肉樣品的花色苷含量進(jìn)行半定量分析，以探究不同發(fā)育時期果實中花色苷含量的差異;通過轉(zhuǎn)錄組測序，篩選果肉花色苷生物合成途徑中起關(guān)鍵作用的結(jié)構(gòu)基因。依據(jù)以上結(jié)果，綜合分析獼猴桃果肉紅色性狀形成的分子機(jī)制，以期為獼猴桃果肉色澤性狀遺傳改良奠定基礎(chǔ)。同時，對‘天源紅’果實進(jìn)行套袋處理，探

2、討套袋對其果實著色的影響，為解析光照對花色苷合成分子機(jī)制的影響提供依據(jù)。本研究的主要結(jié)果如下:
　　隨著果實生長發(fā)育，綠色逐漸變淺，紅色逐漸加深，至盛花后120d紅色最深;盛花后90d初次檢測到花色苷，之后花色苷含量逐漸增加，至盛花后120d達(dá)到最大。套袋顯著降低‘天源紅’果實外果皮的色度角，對果肉（中果皮和內(nèi)果皮）和果心無顯著影響。一直套袋阻礙花色苷在外果皮、果肉、果心中的積累。套袋果實解袋之后，外果皮、果肉、果心花色苷的積累量

3、明顯升高，在花后110d達(dá)到最大。
　　通過轉(zhuǎn)錄組測序，獲得329，189條轉(zhuǎn)錄本，總長度為252，165，247，其中N50和N90長度分別為1，223和306;對初始轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行拼接組裝，得到202，742條Unigenes，總長度為122，182，370，其中N50和N90長度分別為873和255;通過基因功能注釋，共有72，508條Unigenes被成功注釋到7個蛋白數(shù)據(jù)庫，覆蓋率為35.76％;572條unigenes被富

4、集到次生代謝物質(zhì)的13條生物合成途徑當(dāng)中，其中，104條Unigenes參與了類黃酮生物合成（途徑ID: ko00941）和花色苷生物合成（途徑ID.ko00942）;對差異基因在不同樣品中的表達(dá)情況進(jìn)行富集分析以及差異倍數(shù)和P值比較，最終篩選出12個與花色苷合成途徑相關(guān)的差異表達(dá)結(jié)構(gòu)基因，分別為:PAL、 C4H、4CL、CH、F3H、LDOX、FLS、F3'H、HCT、C3'H、CCOMT、 F3GT。
　　對12個差異結(jié)構(gòu)基