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1、7 O現(xiàn)代 檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 2 0 0 5 年 l 1 月第 2 O 卷第 6 期 JMo dL a bMe d , N o v e m b e r2 0 0 5 , V o 1 . 2 0 , N o . 6的作用是雙重的 , L P S過(guò)度激 活機(jī)體免疫系統(tǒng), 釋 放大量 的炎性介質(zhì)會(huì)導(dǎo)致毒性作用 , 包括發(fā)熱、 白細(xì)胞數(shù) 目改變、 多器 官功能障礙綜合征 ( m u l t i p l eo r g a nd y s f u n c
2、 t i o ns y n d r o me , MOD S ) , 甚 至 引起死 亡 , 至今 臨床上 尚無(wú) 真正 的抗 內(nèi)毒 素 的藥 物 。另 一 方 面 , 脂 多 糖結(jié) 合 蛋 白 ( 1 i p o p o l y s a c c h a r i d eb i n d i n gp r o t e i n , L B P) 及 磷 脂 轉(zhuǎn) 運(yùn) 蛋 白 ( p h o s p h o l i p i dt r a n s f
3、 e rp r o t e i n , P L T P ) 轉(zhuǎn)運(yùn) L P S至血漿脂蛋白,尤其是 H D L , 從而 中和 L P S的毒性作用 , 減弱宿 主的炎癥 反應(yīng) [ 2 ] 。肝 細(xì)胞 選擇 性 地?cái)z取 與 HDL結(jié) 合 的 L P S, 在 逆 向轉(zhuǎn) 運(yùn) 膽 固醇 的 同 時(shí)將 L P S運(yùn)送 到肝臟進(jìn)行降解清除 , 故而使 H D L分解增加 , 濃 度下降。表 1細(xì)菌感染患者 白細(xì)胞及血脂水平 比較 注 t分 別 表
4、 不 與對(duì) 照 組 比較 P< O · 0 5 、 P< O . 0 0 1 ; 凸 ’ ‘分 別 表示兩感染組比較 P <0 . 0 2 、 P <0 . 0 1 。·張 寰等[ 3研究表 明 : HDL能與 L P S穩(wěn) 固結(jié)合 ,保護(hù)小鼠免受 L P S的損傷。廖雪玲等L 4通過(guò)實(shí)驗(yàn) 證 明 : HDL 與 L P S結(jié) 合 時(shí) , 大 約 1 O的 HD L —a p o A被 一 種
5、相 對(duì) 分 子 質(zhì) 量 約 為 1 3 0 0 0的 蛋 白置 換 出來(lái) , HD L 中的 a p o A的含 量 隨 著 L P S誘 導(dǎo) 的 急性相反應(yīng) ( A P R ) 的發(fā)展而降低 , 且 H D L — C的含 量顯著降低, 同時(shí) T G含量顯著升高。這與我們的 觀 察 結(jié) 果 一 致 : 革 蘭 陰 性 細(xì) 菌 感 染 患 者 HD L — C、a p o A 1 及 a p o A 1 / a p o B均明顯降低 ,
6、 T G升高。 故臨 床上嘗試用人工重建的高密度脂蛋白( r H D L ) 治療 細(xì) 菌 內(nèi)毒 素 血 癥 。而 Hu b s c hA P等 嘲研 究 表 明 :r H D L對(duì)革蘭 陽(yáng)性細(xì)菌引起 的敗血癥無(wú)此保護(hù)作 用。 我們的觀察也證明革蘭陽(yáng)性細(xì)菌感染患者無(wú)血 脂 水平 的改變 , 且 與革 蘭陰性 細(xì) 菌感染 患者 有一定 的差 異 。綜上所述 , 感染時(shí) WB C會(huì)升高, 但 WB C數(shù) 目的 改變 并 不 能分 出感 染是
7、 革 蘭 陰 性菌 引起 還 是革 蘭 陽(yáng)性菌引起 , 而 H D L — C及 a p o A明顯降低 , 則 有 理 由推 斷 為革 蘭 陰性 菌感 染 引起 , 從 而早 期合 理 地使用抗生素 , 特別是老年患者 , 免疫力減弱, 我們 觀察發(fā)現(xiàn)本 院細(xì)菌感染患者 以老年病人占絕大多 數(shù) , 尤其應(yīng) 引起注意, 以免至 內(nèi)毒素血癥中晚期抗 生 素的效 果不 明顯 , 甚 至加重 炎癥 反應(yīng) 。而革 蘭 陰 性 菌感 染 患 者
8、消除 感 染過(guò) 程 中血脂 水 平是 否 進(jìn)一 步改變是我們下一步要觀察探討的問(wèn)題。參 考文獻(xiàn) :[ 1 ] Va n — Am e r s f o o r tE S , Va n — B e r k e lTJ , Ku i p e rJ . R e c e —p t o r s , me d i a t o r s, a n dme c h a n i s msi n v o l v e di nb a c t e r i —a l
9、s e p s i sa n ds e p t i cs h o c k[ J ] . C l i nMi c r o b i o lR e v ,2 0 0 3 , 1 6 ( 3 ) : 3 7 9 — 4 1 4 .[ 2 ] L e v e l sJ H, Ma r q u a r tJ A, Ab r a h a m P R, e ta 1 . L i p o —p o l y s a c c h a r i d ei st
10、 r a n s f e r r e df r o m h i g h — d e n s i t yt ol o w- d e n s i t yl i p o p r o t e i n sb yl i p 0 p 0 l y s a c c h a r i d e — b i n d —i n gp r o t e i na n dp h o s p h o l i p i dt r a n s f e rp r o t e i
11、n [ J ] . I n -f e c tI mmu n , 2 0 0 5 , 7 3 ( 4 ) : 2 3 2 1 - 2 3 2 6 .[ 3 ] 張 寰 , 吳滿平 , 樓 濱 , 等 .高密度脂蛋 白的抗 內(nèi)毒 素作用 [ J ] .復(fù)旦 學(xué)報(bào) ( 醫(yī)學(xué)版 ) , 2 0 0 3 , 3 0 ( 5 ) : 4 7 4 — 4 7 6 .[ 4 ] 廖雪玲 , 馬 娟 , 樓 濱 , 等 .血漿高密度脂蛋 白的組 成成分在
12、 L P S誘導(dǎo)的急性相反應(yīng) 中的改變口] .復(fù)旦 學(xué) 報(bào) ( 醫(yī) 學(xué) 版 ) , 2 0 0 4 , 3 1 ( 5 ) : 4 6 9 — 4 7 2 .[ 5 ] H u b s c hAP . C a s a sA T. D o r a nJ E . P r o t e c t i v ee f f e c t so fr e c o n s t i t u t e dh i g h — d e n s i t yl i p o
13、 p r o t e i ni nr a b b i tG r a m— n e g a t i v eb a c t e r e mi amo d e l s [ J ] . JL a bC l i nM e d, 1 9 9 5, 1 2 6( 6 ) : 5 4 8 .收 藕 日期 2 0 0 5 — 0 6 — 0 1K X 一 2 1 N血細(xì)胞分析儀常見(jiàn)故障及錯(cuò)誤信息處理 何愛(ài)湘( 湖南省汝城縣人民醫(yī)院, 湖南汝城 4 2
14、4 1 0 0 )中圖分 類號(hào) : R4 4 6 文獻(xiàn) 標(biāo)識(shí) 碼 : B 文章編 號(hào) : 1 6 7 1 — 7 4 1 4 ( 2 0 0 5 ) 0 6 — 0 7 0 — 0 2K N 一 2 1 N 全 自動(dòng)血細(xì)胞分析儀是 日 本 東亞公司生產(chǎn)的可靠性變低 。處理 : 儀器應(yīng)放在有空調(diào) 的房子 , 把環(huán)境 溫度 產(chǎn) 品, 我 院使用該儀器 已有 2 年 多 , 在 臨床試驗(yàn) 中檢測(cè) 了 4調(diào)為 1 5 ~3 0℃后再測(cè)標(biāo)本 萬(wàn)余
15、例 , 提示該儀 器具有 自動(dòng)化程度 高、 操作簡(jiǎn) 單 、 重復(fù)性 2儀器報(bào) 警顯示 空白錯(cuò)誤原 因 : ① 檢測(cè)器洗孔 污垢 ; ② 好 、 準(zhǔn)確率 高, 無(wú) 氰化物試 劑、 故 障低 等優(yōu) 點(diǎn)。 但隨著使用時(shí) H GB孑 L 污垢 ; ③混 入氣泡 ; ④不 良試 劑。處 理 : ① 在 H e L p間 的延長(zhǎng) , 儀器會(huì) 出現(xiàn)一些 問(wèn)題 。 現(xiàn)就該儀器在臨床操作 中畫面下 , 按 1 鍵 , 進(jìn) 行 自動(dòng)清洗。 ②清洗檢測(cè)器
16、: 執(zhí)行菜單畫出現(xiàn)的幾種 常見(jiàn) 故 障及錯(cuò)誤 信息處 理作一分析 , 以供 同行面 的[ 7 : 保養(yǎng)] 一保 養(yǎng)菜單 畫面的 [ 2 : 清洗 檢測(cè) 器] , 進(jìn)行 檢參考和實(shí)際操作 。測(cè)器清洗。如還 不能排除故障 , 再 用刷子進(jìn)行清洗 。 ③清洗 1 儀器報(bào) 警顯示 溫度太高或太 低 原 因是檢測(cè)部 的溫度 旋轉(zhuǎn) 閥( S RV) : 在定期保養(yǎng) 的畫面下 , 清洗 S R V, 按 1 鍵將 偏 離檢測(cè) 范圍為 1 O ~4
17、O℃, 如果溫度異常使測(cè)量的數(shù)據(jù)的 S RV 的動(dòng)作 次 數(shù)復(fù)位 , 關(guān) 閉電源 , 拆 下旋 轉(zhuǎn)閥用 蒸餾水 或 維普資訊 http://www.cqvip.com 現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志 2 0 0 5 年 l 1 月第 2 o 卷第 6 期 JMo dL a bMe d , N o v e m b e r2 0 0 5 , V o 1 . 2 0 , N o . 67 1用 1。 1 0左右稀 釋的清洗液清洗 。 ④更換試劑 : 若溶
18、血?jiǎng)┎?合適 , 會(huì) 影響 WB C或 H GB的空 白值 , 此外稀 釋液不 合適 時(shí) , 會(huì)影響全部項(xiàng) 目, 特別是影響 P L T 的空 白值 。3 儀器 報(bào)警提 示 WB C或 HGB堵塞 原因是檢測(cè)器 的堵 塞 。 處理 : ①排 除檢測(cè)細(xì)孔的堵塞 , 在 H e L p畫面下按 1鍵 ,執(zhí)行 自動(dòng)清洗排除堵塞 。 ② 檢測(cè)部清洗程序 : 將清洗液放入 檢測(cè)部 , 用 自動(dòng)程序清洗 , 請(qǐng) 參照第 4章 5 . 2檢測(cè)部 清洗
19、。③用刷子清洗檢測(cè)器 : 直接用刷子清洗檢測(cè)器細(xì)孔 , 請(qǐng)參照 第 4章 7 . 3 WB C / HG B檢測(cè)器的清洗 。4 儀器報(bào)警提 示更換稀釋液 原 因: ① 稀釋液不 足; ②稀 釋液 吸引管路 異常 ; ③負(fù)壓線 路上漏 氣 ; ④ 浮 動(dòng)開(kāi)關(guān) 誤動(dòng) 作 ; ⑤ 電 磁 閥: 主 閥 的動(dòng) 作 不 良。處 理 : ① 更 換 稀 釋 液 ( C E L L P AC K) ; ② 檢查稀 釋液用 管的受折 , 螺絲接 頭 的
20、松 懈等情況 。若有異 常, 請(qǐng)重新連接或進(jìn)行 更換 ; ③檢查壓力 線路及負(fù)壓的螺紋接頭 的松懈及受折 等狀況 , 若有異常 , 請(qǐng) 重新連接或進(jìn)行更換 , 調(diào)整點(diǎn)檢后 , 按 1鍵恢復(fù) 。儀器隨著使用的時(shí) 間的延長(zhǎng) , 出現(xiàn)的問(wèn)題也相繼增多 ,經(jīng)常會(huì)影響工作的正常進(jìn)行 , 不能單純的依靠?jī)x器的報(bào)警 ,就認(rèn) 為儀器本身沒(méi)有 問(wèn)題 , 為 了能 在最佳 的狀 態(tài)下使用儀 器 , 需要 對(duì)儀器 進(jìn)行定期 的保養(yǎng) , 而且 還要 掌握 儀
21、器的運(yùn) 行 , 計(jì)數(shù)原理及主要結(jié)構(gòu) , 一旦 出現(xiàn) 問(wèn)題能及時(shí) 解決 。收 稿 日期 : 2 0 0 5 — 0 3 — 2 8影響 I F MA效果的常見(jiàn)問(wèn)題與對(duì)策 李祥安 , 楊 煥 濤 ( 山東省金 鄉(xiāng)縣人 民醫(yī)院 , 山東金 鄉(xiāng)2 7 2 2 0 0 )中圖分 類號(hào) : R4 4 6文獻(xiàn)標(biāo) 識(shí)碼 : B文章編 號(hào) : 1 6 7 1 — 7 4 1 4 ( 2 0 0 5 ) 0 6 - 0 7 1 — 0 2I F MA是 時(shí)
22、間分辨免疫熒 光分析測(cè)定 法 的簡(jiǎn)稱 , 是繼 測(cè) 時(shí), 可采血待標(biāo)本凝固后 以 30 0 0r / mi n離心 1 5mi n , 分 免疫 吸附試驗(yàn)和放射免疫技術(shù)之后 發(fā)展起來(lái)的一種免 疫酶 離血 清放 置 4℃冰箱 中保 存 , 檢測(cè)時(shí)應(yīng)把標(biāo)本 放置室溫 預(yù) 技術(shù) 。 它以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ), 將抗原與抗體的特異性 反應(yīng) 溫 1 5 ~3 0m i n 后再檢測(cè) 。如標(biāo)本需稀釋 時(shí), 用潔凈無(wú)菌 的與金屬銪標(biāo)記抗體作用 相結(jié)
23、合 , 再加入增 強(qiáng)液將復(fù)合物 標(biāo) 生理鹽水稀釋 。②加樣時(shí), 應(yīng)先把操作臺(tái)擦拭干凈 , 然后 戴 記抗體上 的 E u s + 解離到溶液中 , 并與增強(qiáng)液 中有 效成 分形 上干凈手套加樣 , 不可觸摸杯 低。吸取增強(qiáng)液 和銪標(biāo)記 物 成 高熒光強(qiáng)度 的螯合物 , 其熒 光強(qiáng)度與溶 液 中的待測(cè)物 質(zhì) 時(shí) , 選用本試劑盒提供 的一次性容器配制銪標(biāo)記物 , 應(yīng)避免 的濃度成正 比。相 比之下 它比 E L I S A具有高度
24、的靈敏度 ,銪標(biāo)記物稀釋液進(jìn)入銪標(biāo)記 物原液中。加 標(biāo)本 或工作液時(shí) 且特異性較好 , 更 能準(zhǔn)確地檢測(cè)標(biāo)本 中的微量物質(zhì) , 特別 是 應(yīng)加在 I F MA 板孔 的底部 , 避免 加在孔 壁上 部, 并 注意 不 檢測(cè) A F P 、 C E A等腫瘤標(biāo)志物與人體激素具有高度的優(yōu)越可濺出 , 不可產(chǎn)生氣泡 。吸取標(biāo)本與質(zhì)控血清 的量應(yīng)準(zhǔn)確 ,性。 但其操作步驟較復(fù)雜 , 多個(gè)環(huán)節(jié)都可能對(duì)其檢測(cè)結(jié)果產(chǎn) 吸管尖插入液面 下的深度應(yīng)一
25、致 。加增 強(qiáng)液 時(shí), 吸頭應(yīng) 懸 生影 響, 甚至?xí)?出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果 。 所 以有必要對(duì)于臨床操作 空 , 避 免因吸頭碰到小孔邊緣 或者孔 中的試 劑而造 成增 強(qiáng) 中可能 出現(xiàn)的 問(wèn)題及其解決辦法加 以探討 。液污染。③從冰箱 中取 出的試劑應(yīng)于室溫平衡 后使用。1 試劑的選擇 優(yōu)良的檢測(cè)試劑對(duì) 于結(jié)果 的準(zhǔn)確性 、 重現(xiàn) 3 . 2孵育 I F MA有 二種方法 : 一步法 和二步法 。一般采 性不容質(zhì)疑 。要選用取得認(rèn)證
26、的試劑 , 不要 用無(wú)批號(hào) 的試 用二步法。不論哪種方法 , 溫育 的時(shí) 間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確 。劑 , 不可頻繁更換 試劑廠家 , 不要 混用不 同批 號(hào)的試劑 , 更 如果溫育 時(shí)間過(guò) 短使結(jié)果偏低 , 過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo) 致非特異 性結(jié)合 不可使用過(guò)期 的試劑 。物吸附于反應(yīng) 杯周 圍, 難 以徹底 清洗 。振蕩時(shí)應(yīng)緩慢 振搖 ,2 環(huán)境要求 應(yīng) 盡量建立潔凈防塵的實(shí) 驗(yàn)室環(huán)境 , 對(duì)于試 不能使試劑 溢出杯外或粘于封 片上 , 一定
27、在杯上加 上干凈 驗(yàn)的成功起到?jīng)Q定性作用。 因?yàn)閴m土 中含有許 多金屬離 子 ,的封 片 , 且 封片不 可重復(fù)使 用 , 否 則 易引起 標(biāo)本 的交叉 反 金屬離子會(huì)產(chǎn)生熒光 , 影響試驗(yàn)結(jié)果。應(yīng) 。3 操作 中存在問(wèn)題及處理 辦法 3 . 3洗板 洗板 在 I F MA過(guò)程 中雖 不是 一個(gè)重要 的反應(yīng) 3 . 1 加樣 步驟 , 但也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗 采 用手工洗板 時(shí) , 孔與孔之 3 . 1 . 1 可能出現(xiàn)的問(wèn)題 : ①
28、 血清或血漿分離不好即進(jìn)行加 問(wèn)液體不能有交叉 ; 采用半 自動(dòng)洗板 機(jī)時(shí) , 洗液不足可能導(dǎo) 樣或者待測(cè)標(biāo)本污染或溶血 。 如果血清或血漿分離不好 , 標(biāo) 致洗板 不徹底 ; 洗板針堵 塞 , 可 導(dǎo)致 抽吸不 完全 , 洗 板不暢 本 中含有一定 量的纖維蛋 白絲就會(huì)沉淀 于反應(yīng)杯底 , 干擾 使效果變差 。 以上情況均可造成結(jié)果偏差。 解決 的方 法是洗 抗原、 抗體的反應(yīng) , 使結(jié)果偏低。標(biāo)本溶血或者污染會(huì)使紅 板機(jī)在
29、每天使用時(shí)應(yīng)進(jìn)行 注液量和殘液 量的校正 , 注意管 細(xì)胞 中過(guò)氧化物酶 釋放 出來(lái) , 影 響反應(yīng) 。 另外細(xì)菌蛋 白也會(huì) 道是否通暢 ; 洗滌時(shí) , 確認(rèn)洗液注滿每個(gè)反應(yīng)孔 ; 洗滌后 , 每 干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果 。②手工操作 中, 應(yīng)避免試劑與標(biāo)本的污染 ,個(gè)孔 必須是干的 , 如果仍有水可倒 扣在干凈無(wú) 塵的吸水紙 特別是在加樣過(guò)程 中要戴上一次性手套 , 不要觸摸杯底 。 加 上拍干 。樣 吸嘴一定要專用 , 否則易引起標(biāo)本結(jié)果
30、 的偏高 。3 . 4 測(cè) 量 測(cè) 量熒 光值時(shí) , 板 底不清潔會(huì) 造成讀數(shù) 不準(zhǔn) 。3 . 1 . 2 解 決方 法 : ① 可用于 I F MA測(cè) 定 的標(biāo)本 十分廣泛 ,熒 光儀不應(yīng)放置在 陽(yáng)光或強(qiáng)光照射 下, 使用前 先預(yù)熱儀 器 體液 ( 如血清) 、 分泌物 ( 如唾液) 和排泄 物( 如尿液 ) 等均 可 1 5 ~3 0m i n 。 儀器定期要 除塵保養(yǎng) , 反應(yīng)杯加入增 強(qiáng)液后封 作為 標(biāo)本測(cè)定其中某種 抗原或抗
31、體成分。 有些標(biāo)本可 直接板輕 搖 5m i n 并在半小時(shí)內(nèi) 完成測(cè)量, 在測(cè)定時(shí), 不可使增測(cè) 定 ( 如血清、 尿液) , 有些則需經(jīng)過(guò) 預(yù)處理 ( 如糞便和某 些 強(qiáng)液溢 出杯外 , 避免污染儀器 。試劑使用完畢后 , 不可在室 分泌物) , 但大部分 I F MA檢測(cè)均 以血清為標(biāo)本 。最好將血 溫下放 置過(guò)久 , 禁止陽(yáng)光 照射 , 應(yīng)立即放入 冰箱 中保存 。如 液先放置于室溫 1 ~2h后 , 再用 30 0 0r
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