新型溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統的構建及BMSCs膜片培養(yǎng)與分離的研究.pdf

1、目的：
　　通過生物仿生的方式制備溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統，探索BMSCs膜片培養(yǎng)與分離的最佳條件，為生物組織工程的構建提供實驗基礎。
　　方法：
　　1）將2g/L多巴胺（dopamine,DA）溶液加入聚苯乙烯培養(yǎng)皿（tissue culture polystyrene,TCPS）中，在60℃下，使DA自聚合生成聚多巴胺（polydopamine,PDA）薄膜覆蓋于培養(yǎng)皿表面，堿溶液氧化后，將末端氨基化的聚異丙基丙烯酰

2、胺（PNIPAM-NH2）接枝到聚多巴胺表面，形成溫敏性培養(yǎng)系統。采用傅里葉轉換紅外光譜分析儀（FTIR）、掃描電子顯微鏡（SEM）及接觸角測試儀對化學鍵、表面形貌及潤濕性進行表征。
　　2）在水凝膠溫敏培養(yǎng)系統中接種兔骨髓間充質干細胞（BMSCs）,置于37℃，5％CO2孵箱培養(yǎng)構建BMSCs膜片，并于20℃下分離，獲得BMSCs膜片。通過倒置相差顯微鏡，MTT（噻唑藍）法研究BMSCs膜片的生長條件及特性，以及細胞膜片分離的條

3、件和結構。
　　結果與結論：
　　1）FTIR結果顯示聚苯乙烯表面出現聚多巴胺及PNIPAM的特征吸收峰；SEM可見顆粒狀PNIPAM凝膠接枝于聚苯乙烯上；接觸角測試結果顯示，當溫度為37℃時，呈現相對疏水性，當溫度為20℃時，呈現相對親水性。因此成功地構建了接枝有PNIPAM水凝膠的培養(yǎng)系統。
　　2）MTT結果顯示，溫敏性水凝膠培養(yǎng)系統中細胞存活率均大于對照組（普通TCPS培養(yǎng)皿）細胞存活率（100%），材料毒性分