低濃度毒死蜱對小鼠胚胎側(cè)腦室神經(jīng)前體細胞周期時程的影響及Par3蛋白的表達.pdf

1、毒死蜱（Chlorpyrifos，CPF）是一種廣譜有機磷殺蟲劑，研究顯示亞中毒閾劑量毒死蜱在動物胚胎與新生期的暴露能引起神經(jīng)發(fā)育毒性。業(yè)已報道，毒死蜱引起神經(jīng)前體細胞形態(tài)發(fā)生改變，進而影響腦皮層厚度，損傷動物認知和行為機能并將這種損傷持續(xù)至成年期。本文中，我們關注于毒死蜱暴露后神經(jīng)前體細胞的發(fā)育命運。探討了期間胚胎側(cè)腦室神經(jīng)前體細胞周期時程以及極性蛋白Par3表達的變化。
　　本文第二章使用了經(jīng)典的Brdu標記S期細胞方法檢測細

2、胞周期時程。每個Brdu注射點采用了1.5h作為間隔，總的過程包括10次Brdu注射，在末次注射后0.5h處死動物。考慮到神經(jīng)前體細胞發(fā)育階段的多樣性，本章中只研究了靠近腦室腔VZ與SVZ區(qū)的PVE神經(jīng)前體細胞。將PVE分為10個Bin分層，分別統(tǒng)計不同時間點中各個Bin的標記指數(shù)(LI)，分析計算得到對照組與CPF組PVE神經(jīng)前體細胞的細胞周期時程。
　　第三章主要研究亞中毒閾劑量毒死蜱暴露對VZ區(qū)頂端面極性蛋白Par3表達量的

3、影響。毒死蜱暴露劑量設計為0，1，5 mg/kg三個組別，在E7.5-11.5進行注射，在神經(jīng)發(fā)生的高峰期E14收集胚胎樣本，以免疫熒光染色方法檢測低劑量毒死蜱暴露對極性蛋白Par3表達量的影響。
　　研究結(jié)果表明，對照組與CPF組在不同的時間點，在各個Bin的LI值具有差異。早期，CPF暴露后降低VZ區(qū)頂端面及臨近區(qū)域(Bin1-3)的LI值，隨著累積標記的時間延長，CPF暴露逐漸改變VZ區(qū)基底側(cè)以及靠近SVZ區(qū)位置(Bin10

4、)的LI。統(tǒng)計分析顯示，在對照組E14小鼠中，PVE前體細胞的細胞周期總時程為16.89±0.22h，而CPF組為20.56±0.28h;對照組的S期時程為5.91±0.08 h，而CPF組為6.58±0.09 h;對照組的G2+M期時程為2.09±0.08 h，而CPF組為2.92±0.09 h;對照組的G1期時程為8.89±0.06 h，而CPF組為11.06±0.28 h。
　　對VZ區(qū)頂端面Par3表達量的研究發(fā)現(xiàn)，胚胎7