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1、1選修 選修 1《生物技術(shù)實(shí)踐》知識(shí)梳理 《生物技術(shù)實(shí)踐》知識(shí)梳理專題一 專題一 課題 課題 1 果酒和果醋的制作 果酒和果醋的制作【補(bǔ)充知識(shí)】發(fā)酵 【補(bǔ)充知識(shí)】發(fā)酵1、概念:利用微生物在有氧或無(wú)氧條件下 有氧或無(wú)氧條件下的生命活動(dòng)來(lái)制備微生物菌體及各種不同代謝產(chǎn)物 制備微生物菌體及各種不同代謝產(chǎn)物的過(guò)程.2、類型:(1)根據(jù)是否需要氧氣分為:需氧發(fā)酵 需氧發(fā)酵和厭氧發(fā)酵 厭氧發(fā)酵。(2)根據(jù)產(chǎn)生的產(chǎn)物可分為:酒精發(fā)酵 酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)
2、酵 乳酸發(fā)酵、醋酸發(fā)酵 醋酸發(fā)酵等。一、基礎(chǔ)知識(shí) 一、基礎(chǔ)知識(shí)(一)果酒制作的原理 (一)果酒制作的原理1.菌種是酵母菌 酵母菌,屬于真核 真核生物,新陳代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧型 異養(yǎng)兼性厭氧型,有氧時(shí),進(jìn)行有氧呼 有氧呼吸,大量繁殖(以出芽 出芽生殖為主) ,反應(yīng)式為:C6H12O6+6H2O+6O2 → 6CO2+12H2O+能量;無(wú)氧時(shí),能進(jìn)行酒精發(fā)酵 酒精發(fā)酵,反應(yīng)式為:C6H12O6 → 2C2H5OH+2CO2+能量。2
3、.酵母菌繁殖的最適溫度 20℃左右,酒精發(fā)酵一般控制在 18~25℃。3.自然發(fā)酵過(guò)程中,起作用的主要是附著于葡萄皮上 附著于葡萄皮上的野生型酵母菌。(二)果醋制作的原理 (二)果醋制作的原理1.菌種是醋酸菌 醋酸菌,屬于原核 原核生物,新陳代謝類型為異養(yǎng)需氧型 異養(yǎng)需氧型。只有在氧氣充足時(shí),才能進(jìn)行旺盛的生命活動(dòng)。變酸的酒表面 表面觀察到的菌膜就是醋酸菌 醋酸菌在液面大量繁殖形成的,其繁殖方式為分裂生殖 分裂生殖。2.當(dāng)氧氣、糖源都充
4、足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸 醋酸,當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇 乙醇變?yōu)橐胰?乙醛,再將乙醛變?yōu)榇姿?醋酸,反應(yīng)簡(jiǎn)式為 C2H5OH+O2 → CH3COOH+H2O。3.醋酸菌的最適生長(zhǎng)溫度為 30~35℃。4.菌種來(lái)源:到生產(chǎn)食醋的工廠 生產(chǎn)食醋的工廠或菌種保藏中心 菌種保藏中心購(gòu)買,或從食醋 食醋中分離醋酸菌。二、實(shí)驗(yàn)流程圖 二、實(shí)驗(yàn)流程圖挑選 挑選葡萄 沖洗 沖洗 榨汁 榨汁 酒精 酒精發(fā)酵 果酒(→醋酸 醋酸發(fā)酵→果
5、醋) ? ? ? ?三、操作提示 三、操作提示(一)材料的選擇與處理 (一)材料的選擇與處理選擇新鮮 新鮮的葡萄,榨汁前先將葡萄進(jìn)行沖洗 沖洗(沖洗的目是洗去灰塵 洗去灰塵,且不要太干凈,以防止洗去野生型酵母菌) ,然后再除去枝梗 枝梗。(二)防止發(fā)酵液被污染 (二)防止發(fā)酵液被污染1、榨汁機(jī)要清洗干凈 干凈,并晾干 晾干。2、發(fā)酵瓶要清洗干凈 干凈,用體積分?jǐn)?shù) 70%的酒精消毒。3、裝入葡萄汁后,封閉 封閉充氣口。(三)控制好發(fā)酵條件
6、 (三)控制好發(fā)酵條件1、葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約 1/3 的空間(目的是先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁 酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖,耗盡 O2 后再進(jìn)行酒精發(fā)酵 酒精發(fā)酵;同時(shí)可防止發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的 CO2 造成發(fā)酵液溢出 發(fā)酵液溢出) 。酶酶酶3專題二 專題二 課題一 課題一 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)1、培養(yǎng)基 培養(yǎng)基:人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖 生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。⑴培養(yǎng)基按
7、照物理性質(zhì) 物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)基(主要用于工業(yè)生產(chǎn)) 、半固體培養(yǎng)基(觀察細(xì)菌運(yùn)動(dòng)、鑒別菌種)和固體培養(yǎng)基 固體培養(yǎng)基(主要用于菌種的分離、計(jì)數(shù)、鑒別) 。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂 瓊脂后,制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng),可以形成肉眼可見(jiàn)的菌落 菌落。菌落是菌種鑒定的重要依據(jù) 菌種鑒定的重要依據(jù)。⑵按照培養(yǎng)基的用途 用途,可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基 選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基 鑒別培養(yǎng)基。⑶培養(yǎng)基的化學(xué)成分
8、包括:水 、無(wú)機(jī)鹽 無(wú)機(jī)鹽、碳源 碳源、氮源 氮源、 (生長(zhǎng)因子) 生長(zhǎng)因子)等。?無(wú)機(jī)碳源不能為微生物提供能量;?含碳有機(jī)物是異養(yǎng)型微生物的碳源和能源;?無(wú)機(jī)氮源 NH3 既是硝化細(xì)菌的氮源,也是其能源;N2 是固氮菌(如根瘤菌)的氮源。2、無(wú)菌技術(shù) 、無(wú)菌技術(shù):獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的入侵 防止外來(lái)雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)方面:①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒 清潔和消毒。②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、
9、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌 滅菌。③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近 酒精燈火焰附近進(jìn)行。④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸 相接觸。3、消毒與滅菌的區(qū)別 、消毒與滅菌的區(qū)別⑴消毒: ⑴消毒:指使用較為溫和 較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物 一部分微生物(不包括芽孢和孢子) 。消毒常用煮沸消毒法 煮沸消毒法、巴氏消毒法 巴氏消毒法(對(duì)于一些不耐高溫的液體) 、化學(xué)
10、藥劑消毒 化學(xué)藥劑消毒、紫外線消 紫外線消毒。⑵滅菌: ⑵滅菌:則是指使用強(qiáng)烈 強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物 所有的微生物,包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌 灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。⑶滅菌方法: ⑶滅菌方法:①接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法 灼燒滅菌法;②玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法 干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱 干熱滅菌箱;③培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用高壓蒸汽滅菌法 高壓蒸汽滅
11、菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 高壓蒸汽滅菌鍋。(4)消毒與滅菌的共同點(diǎn): )消毒與滅菌的共同點(diǎn):①都需借助理化性質(zhì)營(yíng)造微生物難以生存的不良環(huán)境; ②其作用原理都是通過(guò)使蛋白質(zhì)變性 使蛋白質(zhì)變性來(lái)抑制微生物的生命活動(dòng)或殺死微生物。4、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 、制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基⑴方法步驟:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。①稱量:牛肉膏黏稠,用稱量紙 稱量紙稱??;牛肉膏、蛋白胨易吸潮,稱取要快、加蓋。②溶化:牛肉膏、稱量紙
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