小麥黑麥1bl.1rs易位系葉片衰老相關(guān)est序列染色體定位及該易位染色體在不同遺傳背景中的傳遞頻率研究

1、S ic h u a n A g r i c u l t u r eU n i v e r s i t yP h ．M ．D i s s e r t a t i o nS i l i c o nc l o n i n ga n d C h r o m o s o m a l l o c a t i n go f E S T s e q u e n c e s r e l a t e dw i t hl e a f s e n e s c

2、 e n c e i n 1B L ．1 R S w h e a t —r y e t r a n s l o c a t i o na n d t h e 仔e q u e n c y o f1B L ．1R Sc h r o m o s o m e t r a n s l o c a t e di nd i f f e r e n tb a c k g r o u n dB yG u o J i n g w e iD i r e c

3、 t e dB yP r o ．L u oP e i g a oB i o c h e m i s t r y a n d M o l e c u l a r B i o l o g y( P l a n t M o l e c u l a r B i o l o g y )M a y 2 0 1 5四川I 農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士畢業(yè)論文摘 要小麥?zhǔn)鞘澜缟献钪匾募Z食作物之一，小麥1 B 染色體短臂被黑麥1 R 染色體短臂取代形成了小麥一黑麥1

4、B L ．1 R S 易位系。小麥一黑麥1 B L ．1 R S 易位系攜帶有許多與疾病抗性和產(chǎn)量形成有關(guān)的有益基因，在全世界小麥遺傳改良中被廣泛的運(yùn)用。本研究選用含有1 B L ．1 R S 易位系的功能持綠小麥品種C N l 7 、C N l 2 、C N l 8以及普通小麥M Y l l 、中國春和黑麥作為研究材料。同時(shí)以C N l 7 和M Y l l 為親本分別構(gòu)建了雜交組合C N l 7 ／M Y l 1 和M Y l 1

5、／C N l 7 的遺傳群體F l 、F 2 、F 3 和F 4 。通過D N A 分子標(biāo)記與細(xì)胞學(xué)技術(shù)相結(jié)合，對與葉片衰老相關(guān)的E S T 序列進(jìn)行了染色體定位，并且分析了母本效應(yīng)對易位染色體傳遞頻率的影響，主要結(jié)果如下：1 ．通過抑制性差減雜交，從C N l 7 中得到3 2 條與葉片衰老相關(guān)的E S T 序列，利用電子克隆將其中3 1 條定位于不同的染色體之上。對得到的3 2 條E S T 序列設(shè)計(jì)引物，總共設(shè)計(jì)得到1 9 對E

6、S T o S T S 引物。運(yùn)用這些引物對中國春、C N l 2 、C N l 7 、C N l 8 和黑麥的基因組總D N A 進(jìn)行P C R 擴(kuò)增。發(fā)現(xiàn)有5 對引物有多態(tài)性，分別為J K 7 3 8 9 9 1 ，J K 7 3 8 9 8 3 ，J K 7 3 8 9 8 9 ，J K 7 3 8 9 9 4 和J K 7 3 9 0 0 3 。2 ．用中國春缺四體對5 對多態(tài)性E S T —S T S 引物進(jìn)行染色體定位。其中

7、3 對E S T - S T S 引物能被定位在特定的染色體上：J K 7 3 8 9 9 1 定位于3 B ( 電子克隆定位在1 A ) ；J K 7 3 8 9 8 3 定位于5 D ( 電子克隆定位在6 A 、6 B 和6 D ) ；J K 7 3 8 9 8 9 有3個(gè)多態(tài)性條帶( J K 7 3 8 9 8 9 ．A ，J K 7 3 8 9 8 9 ．B ，J K 7 3 8 9 8 9 ．C ) 分別定位于2 A ，4 A

8、 和3 D ( 電子克隆定位于2 B ) 。J K 7 3 8 9 9 4 和J K 7 3 9 0 0 3 用中國春缺四體無法定位。用由M Y l 1 ／C N l 7 為親本構(gòu)建的F 2 群體對J K 7 3 8 9 9 4 ，J K 7 3 9 0 0 3 與1 B L ．1 R S 進(jìn)行連鎖分析。發(fā)現(xiàn)上述標(biāo)記與易位染色體均不連鎖3 ．選用6 對已報(bào)道的能穩(wěn)定擴(kuò)增的特異性引物對遺傳群體進(jìn)行基因型鑒定。絕大部分能夠穩(wěn)定擴(kuò)增，但是個(gè)別