門(mén)靜脈耐受中cd,439;cd,2539;foxp,339;調(diào)節(jié)性t細(xì)胞及th17細(xì)胞的作用及機(jī)制研究

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文門(mén)靜脈耐受中CDCDFoxp調(diào)節(jié)性T細(xì)胞及Th17細(xì)胞的作用及機(jī)制研究姓名：何凡申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)（器官移植）指導(dǎo)教師：陳知水20090501華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 華 中 科 技 大 學(xué) 博 士 學(xué) 位 論 文 3 測(cè)證實(shí)，過(guò)繼輸注 PVI 小鼠 CD4 +T 后，術(shù)后第 7d，移植物中淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減輕，心肌結(jié)構(gòu)基本正常。 結(jié)論： 結(jié)論：門(mén)靜脈輸注同種抗原可以誘導(dǎo)抗原特異

2、性的免疫耐受，過(guò)繼輸注耐受小鼠的CD4 +T 細(xì)胞可以轉(zhuǎn)移耐受，而過(guò)繼輸注耐受小鼠 CD8 +T 細(xì)胞無(wú)此效應(yīng)。 關(guān)鍵詞 關(guān)鍵詞：T 細(xì)胞，門(mén)靜脈輸注，免疫耐受 第二部分 第二部分 CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞在門(mén)靜脈耐受中的作用 細(xì)胞在門(mén)靜脈耐受中的作用 目的： 目的： 探討門(mén)靜脈耐受模型中 CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例，及其在誘導(dǎo)耐受中的作用及機(jī)制。 方法： 方法： 于

3、門(mén)靜脈輸注同種抗原后第 7，14 及 21 天，取小鼠血、肝及脾臟，流式細(xì)胞儀檢測(cè) CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例。流式細(xì)胞儀分選 PVI 小鼠 CD4 +CD25 +T 細(xì)胞，以不同的濃度加入 C57 所刺激的 Balb/c 小鼠淋巴細(xì)胞混培體系中，觀察對(duì)細(xì)胞增殖的影響。分別于門(mén)靜脈輸注后第 1，3，5 天給予 CD25 單抗腹腔注射，第 7 天檢測(cè)CD4 +CD25 +Foxp3 +調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的比例

4、；并于第 7 天行 C57 小鼠的心臟移植，觀察移植物存活。門(mén)靜脈輸注后，給予 CD25 單抗（或同型對(duì)照抗體）腹腔注射，ELISPOT 檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞分泌 IL-2，IL-4，IL-10 及 IFN-γ 的能力；TUNEL 染色檢測(cè)肝內(nèi) CD4 + T細(xì)胞 CD8 + T 細(xì)胞的凋亡比例。 結(jié)果： 結(jié)果：門(mén)靜脈輸注同種抗原后，CD4 +CD25 + T 細(xì)胞的比例明顯升高，術(shù)后第 7 天達(dá)到高峰，之后逐漸下降，至第 21 天仍然維

5、持在高于正常小鼠的水平。CD4 +CD25 +Foxp3 +T 占CD3 +T 比例表現(xiàn)出同樣的趨勢(shì)。CD4 +CD25 +T 在體外可以明顯抑制 C57 細(xì)胞所刺激的Balb/c 小鼠淋巴細(xì)胞增殖， 并呈現(xiàn)出濃度依賴(lài)性。 CD25 單抗腹腔注射可以清除體內(nèi) 70% CD4 +CD25 +T 細(xì)胞，門(mén)靜脈輸注小鼠給予 CD25 單抗腹腔注射后，后續(xù)的心臟移植物存活時(shí)間明顯縮短，伴隨著 CD4 +CD25 +Foxp3 +T 占 CD3