氨茶堿對(duì)支氣管哮喘患者外周血cd439;t淋巴細(xì)胞和cd439;cd2539;t調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬的影響

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文氨茶堿對(duì)支氣管哮喘患者外周血CD4T淋巴細(xì)胞和CD4CD25T調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬的影響姓名：梁瑞韻申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：伍衛(wèi)20080515氨茶堿對(duì)支氣管哮喘患者外周血C D 4 + T 淋巴細(xì)胞和c D 4 + C D 2 5 ’T 調(diào)節(jié)細(xì)胞自噬的影響中山大學(xué)博士學(xué)位論文研究目的本實(shí)驗(yàn)擬首先觀察不同濃度氨茶堿對(duì)健康人外周血T 淋巴細(xì)胞及C D 4 + T 、C D 8 + T 亞群和C D 4 + C

2、D 2 5 + T r e g 自噬和凋亡的影響，得到可調(diào)節(jié)其自噬的最低濃度，接著通過(guò)觀察小劑量氨茶堿和地塞米松對(duì)哮喘患者外周血C D 4 + T 淋巴細(xì)胞和C D 4 + C D 2 5 + T r e g 細(xì)胞的自噬和凋亡的調(diào)節(jié)作用，以及對(duì)C D 4 + C D 2 5 + T r e g 表達(dá)F o X p 3 的影響。進(jìn)一步了解小劑量氨茶堿對(duì)哮喘患者C D 4 + T 淋巴細(xì)胞和C D 4 + C D 2 5 + T r e g

3、 的免疫調(diào)節(jié)作用。為小劑量氨茶堿的臨床應(yīng)用提供了新的理論指導(dǎo)依據(jù)。第一章氨茶堿對(duì)健康人外周血T 淋巴細(xì)胞及其亞群自噬的免疫調(diào)節(jié)作用茶堿類藥物是目前治療哮喘的常用藥物，近年的研究表明在其血漿濃度尚未影響氣道平滑肌張力時(shí)就發(fā)揮著免疫調(diào)節(jié)和抗炎的作用。而T 淋巴細(xì)胞及其亞群通過(guò)自噬來(lái)達(dá)到免疫穩(wěn)態(tài)。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)觀察不同濃度氨茶堿作用于體外培養(yǎng)的健康人T 淋巴細(xì)胞及C D 4 + 、C D 8 + T 亞群和C D 4 + C D 2 5 + T

4、 r e g 自噬和凋亡的情況，分析小劑量氨茶堿對(duì)上述免疫細(xì)胞自噬的免疫調(diào)節(jié)作用。并得出可影響其自噬的最低氨茶堿濃度，為后續(xù)的實(shí)驗(yàn)提供小劑量氨茶堿的劑量依據(jù)。l 方法經(jīng)密度梯度離心法、尼龍棉柱法和磁分離法分離所得的健康人T 淋巴細(xì)胞及C D 4 + 、C D 8 + T 淋巴細(xì)胞和C D 4 + C D 2 5 + T 調(diào)節(jié)細(xì)胞，分氨茶堿( 不同濃度) 、地塞米松( D Ⅺ訂) 及空白( b l a n k ) 組培養(yǎng)后觀察細(xì)胞光鏡及電

5、鏡形態(tài)學(xué)、M D C 熒光染色，并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)自噬和凋亡細(xì)胞比例和C D 4 + C D 2 5 + T 調(diào)節(jié)細(xì)胞的F o X p 3 表達(dá)情況。2 結(jié)果2 ．1 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)健康人外周血T 淋巴細(xì)胞及其亞群( C D 4 + 、C D 8 + 、C D 4 十C D 2 5 + T 細(xì)胞) 的純度T 淋巴細(xì)胞的純度為8 1 ．3 ％～9 4 。5 ％；C D 4 + T 淋巴細(xì)胞的純度為8 4 。l ％～9 0 ．4 ％；C D