胃癌hpot1、htertsnp及蛋白表達(dá)與h.pylori感染和微衛(wèi)星不穩(wěn)的關(guān)系

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文胃癌hPOT1、hTERTSNP及蛋白表達(dá)與H.pylori感染和微衛(wèi)星不穩(wěn)的關(guān)系姓名：萬順梅申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（消化系?。┲笇?dǎo)教師：房殿春20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文方法1 6 8 例胃癌患者來自于甘肅西部三家醫(yī)院外科手術(shù)切除胃的患者，所有病例均經(jīng)組織病理學(xué)確診，術(shù)前未行放療和化療。取癌組織及手術(shù)切緣的正常組織( 距癌5 c m 以上) ，立即置于一7 0 ℃的冰箱凍存?zhèn)溆谩? 5 6

2、例正常對照為同期在三家醫(yī)院查體并行胃鏡檢查，在胃鏡下均排除慢性胃炎、腸化、增生、潰瘍和癌變。年齡性別與胃癌組匹配。兩組均征得患者的同意，并簽署知情同意書。胃癌臨床分期按2 0 0 3 年國際抗癌聯(lián)盟( u I C C ) T N M 標(biāo)準(zhǔn)分期，組織病理按2 0 0 0 年w H O 胃癌新的分類標(biāo)準(zhǔn)。全部檢查對象均抽靜脈血5 m l ，分離淋巴細(xì)胞，一7 0 ℃冰箱凍存?zhèn)溆?。然后采用常?guī)酚／氯仿／異戊醇抽取法提取D N A 。采用聚合酶

3、鏈反應(yīng)和限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)( P C R —R F L P )進(jìn)行s N P 基因型分析，采用聚合酶鏈反應(yīng)和單鏈構(gòu)象多態(tài)性技術(shù)( P c R —S s C P ) 檢測微衛(wèi)星不穩(wěn)。取部分組織固定、石蠟包埋、組織切片H E 染色病理證實，免疫組化檢測蛋白表達(dá)，P c R 檢測尿素酶基因結(jié)合W a r t h i n —s t a r r v 銀染確診幽門螺桿菌的感染。結(jié)果研究顯示，胃癌組h P o T l I V S l 3 —9

4、8T ／G 位點T T 、 G G 、G T 基因型的頻率分別為3 6 ．9 0 ％、4 1 ．6 7 ％、2 1 ．4 3 ％， T 、G 等位基因頻率分別為5 7 ．7 4 ％、4 2 ．2 6 ％；對照組T T 、G T 、G G 基因型的頻率分別為2 4 ．3 6 ％、5 1 ．9 2 ％、2 3 ．7 2 ％，T 、G 等位基因頻率分別為4 9 ．6 8 ％、5 0 ．3 2 ％。兩組T 、G 等位基因型頻率比較無顯著性差異∞

5、2 = 3 ．5 8 5 3 ，P = O ．0 5 8 3 ) 。以T ／T 基因型作為參照基因型，G ／T 和G ／G 兩種基因型0 R 值分別為O ．4 3 9 ( 9 5 ％C I ：O ．2 5 l 一0 ．7 6 7 ，P = O ．0 0 4 ) 、O ．5 1 4 ( 9 5 ％C I ：O ．2 6 4 一O ．9 9 9 ，P = O ．0 5 0 ) 。胃癌組h T E R T E x 2 —6 5 9 ～G 位點

6、G G 、A G 、A A 型的頻率分別為4 1 ．8 8 ％、 4 7 ．5 ％、1 0 ．6 3 ％，G 、A 等位基因頻率分別為6 5 ．6 2 ％、3 4 ．3 8 ％，對照組G G 、A G 、A A 基因型的頻率分別為2 8 ．2 9 ％、5 6 ．5 8 ％、1 5 ．1 3 ％，G 、A 等位基因的頻率為5 6 ．5 8 ％、4 3 ．4 2 ％，兩組G 、A 等位基因型頻率比較有顯著性差異( 礦= 5 ．3 7 3 4

7、 ，P = o ．0 2 0 4 ) 。以G ／G 基因型相比，～G 和～A 兩種基因型O R 值分別為O ．5 1 9 ( 9 5 ％C I ：O ．3 l O 一0 ．8 7 0 ，P = O ．0 1 3 ) 、0 ．5 5 0 ( 9 5 ％C I ：0 ．2 5 5 ．1 ．1 8 8 ，P = 0 ．1 2 8 ) 。h P O T l 蛋白表達(dá)的陽性率在胃癌、異型增生、腸化生、正常胃粘膜分別為：9 1 ．3 3 ％、8 0