焦核龍眼(dimocarpuslonganlour.)種子敗育cdnaaflp分析

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文焦核龍眼（Dimocarpus Longan Lour.）種子敗育cDNA-AFLP分析姓名：唐晰申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：陳偉20090401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文A b s t r a c tI n l o n g a n ( D i m o c a r p u sL o n g a n L o u t ．) p r o d u c t i o n , t h e s i z e

2、 o ff r u i t s i s a l li m p o r t a n tf a c t o ri n f l u e n c i n gq u a l i t y ．H o w e v e r ’m o s t l ya l l o f e x i s t i n gc u l t i v a r s a l eb i gs e e d s ，t h i n p u l p a n d l o w e d i b l e r

3、 a t e t h a t c a n ' t m e e t t h e r a w - e a t e n o r i e n t e dd e v e l o p m e n tt r e n d o fl o n g a n ．S ot h e r e s e a r c ho nt h em e c h a n i s mo fl o n g a n s e e d sa b o r t i o n , n o t

4、o n l y o f f e r t h e o r ys u p p o r t f o r c u l t i v a t i n g n e w i m p r o v e dv a r i e t i e s ，b u t a l s oh a ss i g n i f i c a n tv a l u ei np r o d u c t i o n ．e D N A - A F L P ( e D N A a m p l i

5、 f i e df r a g m e n tl e n g t hp o l y m o r p h i s m ) a n a l y s i s w a s u s e di nt h i s r e s e a r c h t of i n dt h e d i f f e r e n t i a l l ye x p r e s s e df r a g m e n t s ，c l o s e l yr e l a t i

6、n gt ol o n g a ns e e d sa b o r t i o n ，a n dl a y t h em o l e c u l a r f o u n d a t i o nf o r t h ef u t u r er e s e a r c h O l l l o n g a n s e e d s a b o r t i o n ．L o n g a nn o r m a ls e e d sa n d a b

7、o r t i o ns e e d sw e r es e l e c t e d a st h er e s e a r c hm a t e r i a l s ．T o t a lR N A w e r ee x t r a c t e d r e s p e c t i v e l y , t h e nr e v e r s e —t r a n s c r i b ．e d a n da n a l y z e db ye

8、 D N A ·A F L P ．I nt h i ss t u d y , d o u b l e - s t r a i n e de D N A w a s d i g e s t e db y E c o R Ia n d M s e I ，t h e n l i g a t e d b y c o r r e s p o n d i n g a d a p t o r s ．P r e - a m p l i f i

9、 c a t i o n 、析t h p r e ·a m p l i f y i n gp r i m e r s ，t h e nd i l u t e d 10 0f o l da sa t e m p l a t eu s e df o rs e l e c t i v ea m p l i f i c a t i o nw i t h6 4p r i m e r s c o m b i n a t i o n ．S

10、e l e c t i v e a m p l i f i c a t i o n p r o d u c t s w e r e s e p a r a t e d o n ap o l y a c r y l a m i d e g e lf o r f i n g e r p r i n t a n a l y s i s ．A f t e ra n a l y s i s ，1 1 d i f f e r e n t i a l

11、 l y e x p r e s s e df r a g m e n t sw e r eo b t a i n e d ．H o m o l o g ys e a r c h i n go f N u c l e o t i d es e q u e n c e s a n d t r a n s l a t e ds e q u e n c e s w e r ep e r f o r m e dw i t h t h eB L

12、A S Ts e q u e n c e a l i g n m e n tp r o g r a m a t t h ew e bs e r v e r so fN C B I ．5s e q u e n c e ss h o w e d a h i g h h o m o l o g y ，w h i l e o t h e r 6 s e q u e n c e s s h o w e da l o w h o m o l o g

13、 y ．3 o f t h e s e5h i g h h o m o l o g ys e q u e n c e sw e r e s p e c u l a t i v e l y r e l a t e d t o l o n g a n s e e d sa b o r t i o n ，n a m e dT D F 2 ( C a l c i u m A T P a s eg e n e ) ，T D F 5 ( c e l

14、 l u l o s eg e n e ) ，a n dT D F 7 ( p l a s t i d i cA T P ／A D Pt r a n s p o r t e r ) ．T h ee x p r e s s i o no fT D F 2a n dT D F 7 w e r ed o w n —r e g u l a t e di nt h ea b o r t i o ns e e d s ，w h i l eT D F

15、 5 W a su p —r e g u l a t e d ．T h ed o w n - r e g u l a t e de x p r e s s i o no fC a l c i u mA T P a s ed i r e c t l y l e d t oa n a c c u m u l a t i o no fC a p i n c y t o p l a s mw h i c hm a yd i s r u p tt

16、 h ee n e r g ym e t a b o l i s ma n dm a n yp h y s i o l o g yf u n c t i o n s ，a n de v e nc a u s et h ep r o d u c eo fo x y g e n f r e er a d i c a l ，e v e n r e s u l t i nt h ec e l l d e a t h ．T h e u p - r