構(gòu)建pcdna3.1bmp2重組載體及轉(zhuǎn)染兔bmscs的研究

1、廣西醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文構(gòu)建pcDNA3.1-BMP-2重組載體及轉(zhuǎn)染兔BMSCs的研究姓名：李承靖申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：周諾20100601廣西醫(yī)科大學(xué)碩士論文 構(gòu)建p c D N A 3 ．1 一B M P ．2 重組載體并轉(zhuǎn)染兔B M S C s 的實(shí)驗(yàn)研究E x p e r i m e n t a lS t u d y o nc o n s t r u c t i n gp c D N A 3 ．1 一B

2、 M P 一2 r e c o m b i n a n t a n dt r a n s f e c t i n gb o n e m a r r o w s t r o m a lc e l l sA b s t r a c tO b j e c t i v e ：T oc o n s t r u c tb o n em o r p h o g e n e t i c p r o t e i n - 2 ( B M P 一2 ) e

3、u k a r y o t i ce x p r e s s i o n p l a s m i d p c D N A 3 ．1 - B M P - 2 a n d t r a n s f e c t r a b b i t ／；b o n e m a r r o ws t r o m a lc e l l s ( B M S C s ) ．T o d e c t e c t t h ee x p r e s s i o n o f

4、B M P 一2 i nr a b b i t ’S B M S C s ．M e t h o d s ：( 1 ) B M P 一2g e n ew a sc o m p o u n d e db yP C R m e t h o df r o mh u m a ng e n o m i c D N Aa n d r e c o m b i n e d w i t h p c D N A 3 ．1 v e c t o r a n d

5、c o n s t r u c t e de u k a r y o t i ce x p r e s s i o np l a s m i dp c D N A 3 ．1 一B M P 一2 ．T h er e c o m b i n a n t ，p c D N A3 ．1 一B M P 一2 ，w a s i d e n t i f i e d b y P C Ra n d D N As e q u e n c i n g ．(

6、2 ) T o u s ep c D N A 3 ．1 - B M P 一2 t r a n s f e c t i o n o fr a b b i t §B M S C s a n dt h e e x p r e s s i o n o fB M P - 2g e n ew a sc o n f i r m e db yR T —P C R 、i m m u n o h i s t o c h e m i c a la

7、n a l y s i sa n dW e s t e r n b l o t a f t e rt r a n s f e c t i o no f r a b b i t ’s B M S C s ．R e s u l t ：( 1 ) T h e c l o n e d D N Aw a sc o n f i r m e d t o b e B M P 一2 g e n e b yP C Ra m p l i f c a t i

8、o na n dD N As e q u e n c i n g ．( 2 ) T h ee x p r e s s i o no fB M P 一2g e n e w a sc o n f i r m e d b yR T —P C R 、i m r n u n o h i s t o c h e m i c a la n a l y s i sa n dW e s t e r nb l o ta f t e rt r a n s f

9、 e c t i o no f r a b b i t ’SB M S C s ．P o s i t i v e f i n d i n g sw e r en o t f o u n di nt h o s ec e l l st h a t w e r e n o t t r a n s f e c t e d ．C o n c l u s i o n ：( 1 ) I nt h i s s t u d y ，B M P 一2 g