p.acnes促dc前體細(xì)胞體內(nèi)動員及dc治療胃癌的實(shí)驗(yàn)研究

1、P a c n e s 促D C 前體細(xì)胞的 體內(nèi) 動員 及D C 治 療胃 癌的 實(shí)驗(yàn) 研究 中文摘要P . a c n e s 促D C 前體細(xì)胞的 體內(nèi) 動員及D C 治療胃 癌的實(shí)驗(yàn)研究中 文 摘 要目 的 利用 P a c n e :引起的炎 癥反應(yīng)促進(jìn)小鼠 外周血中 樹突狀細(xì)胞 ( D e n d r i t i cc e l l , D C ) 的動員， 并探討其間 可能存在的 機(jī)制， 在此基礎(chǔ)上， 檢驗(yàn)P a c

2、n e : 動員的D C 在胃 癌治療中的作用。方法 ( 1 ) C 5 7 B L / 6 J ( 1 3 6 ) 純 種小鼠 隨 機(jī)分為 兩組， 實(shí)驗(yàn)組 通過 尾靜脈 注射痊瘡丙酸桿菌 ( R a c n e s ) ， 對照組尾靜脈注射P B S 。 在不同時間 抽取外周血， 分離單核細(xì)胞， 流式細(xì)胞儀分選出 F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D 1 1 c 十 細(xì)胞，比 較兩組小鼠 外周血中F 4 / 8

3、0 - B 2 2 0 - C D l 1 c + 細(xì) 胞 數(shù)量 的 差 異。( 2 ) 通 過形 態(tài) 學(xué) 觀察 、 表型 分析 和混 合 淋巴細(xì) 胞反 應(yīng)， 檢 測 新 鮮分 離的F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l l c + 細(xì) 胞， 再 將 這 些細(xì) 胞 在體 外加 入 細(xì)胞因 子G M - C S F、 I L - 4 和T N F a 共同 培養(yǎng) 后， 用上述 三種方法鑒定它們是否能 夠 分化為 成熟D

4、C . ( 3 ) ’ 將R a c n e s 動員的D C與胃 癌細(xì) 胞裂 解液共同 培 養(yǎng)， 使之負(fù) 載胃 癌抗原， 隨后用這些D C 致敏T 細(xì)胞， 觀察活化的T 細(xì)胞在體外對胃 癌細(xì)胞的殺傷作用。結(jié) 果 B 6 小鼠 注射R a c n e s 1 小 時 后 外周血 F 4 / 8 0 - 1 3 2 2 0 - M l l e 細(xì) 胞含量即 開始升高， 2 4 小時 后逐 漸達(dá)到高 峰. 新 鮮分離的F 4 / 8 0

5、B2 2 0 - C D 1 1 c + 細(xì)胞不具有 成熟D C 的 特征， 表達(dá)的 趨化因 子 受體主 要 為C C R I 和C C R 5 ， 不 表達(dá)C C R 7 。 在與 細(xì)胞因 子共同培養(yǎng)后， 它們即 具有典型的D C形態(tài)和表型， 在混合淋巴 細(xì)胞反應(yīng)中具有極強(qiáng)的 刺激T 細(xì)胞增殖的能力， 受體C C R I 和 C C R 5 的表達(dá)明顯下調(diào)， 而主要表達(dá)C C R 7 . R a c n e : 動員的D C ，

6、 負(fù) 載胃 癌抗原 后在體 外致敏T 細(xì)胞， 這些致敏T 細(xì)胞對胃 癌細(xì)胞的殺傷率明顯高于未致敏 T 細(xì)胞。F a c n e s 促D C 前體細(xì) 胞的體內(nèi) 動員 及D C 治 療胃 癌的實(shí) 驗(yàn)研究 英文摘要M o b i l i z a t i o n o f De n d r i t i c Ce l l P r e c u r s o r s i n vi vob y A d m i n i s t r a t i

7、o n o f P a c n e s a n d t h e S t u d yo n D C - b a s e d S t o m a c h C a n c e r T h e r a p yAb s t r a c tO b j e c t i v e : T o m o b i l i z e D C p r e c u r s o r s i n t o c i r c u l a t i o

8、 n 勿 R a c n e s i n j e c t i o n w h i c hr e s u l t e d i n i n f l a m m a t o r y r e a c t i o n i n m i c e a n d t o v i s i t t h e p o s s i b l e m e c h a n i s m . T h e ns t u d y t h e r o

9、 l e o f t h o s e D C s i n G a s t r i c C a r c i n o m a T h e r a p y .M e t h o d s : ( 1 ) C 5 7 B L / 6 J ( B 6 ) p u r e b r e e d m o u s e w e r e r a n d o m l y a s s i g n e d t o t w og r

10、 o u p s . T h e e x p e r i m e n t g r o u p w e r e i n j e c t e d w i t h R a c n e s v i a t h e t a i l v e i n , w h i l e t h ec o n t r o l g r o u p w e r e i n j e c t e d w i t h P B S . P

11、 e r i p h e r a l b l o o d w a s o b t a i n e d a t t h e i n d i c a t e dt i m e i n t e r v a l s a f t e r R a c n e s o r P B S i n j e c t i o n . P e r i p h e r a l b l o o d m o n o n u c l e a

12、 r c e l l s( P B M N C ) w e r e p r e p a r e d f r o m p e r i p h e r a l b l o o d . F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l l c + c e l l s w e r e t h e ns o r t e d f r o m P B M N C b y F A C S . T h e n c o

13、 m p a r e t h e q u a n t i t i v e d i f e r e n c e o fF 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l 1 c + c e l l s b e t w e e n t w o g r o u p s . ( 2 ) F r e s h l y i s o l a t e d F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l l c +c e

14、 l l s w e r e a n a l y s e d b y m o r p h o l o g i c a l o b s e r v a t i o n , p h e n o t y p e a n a l y s i s a n d m i x e dl y m p h o c y t e r e a c t i o n ( M L R ) . A f t e r c u l t u r e d

15、 w i t h c y t o k i n e s , t h e s a m e a n a l y s i s w e r e t a k e nt o c o n f i r m w h e t h e r t h e s e c e l l s c o u l d d i f e r e n t i a t e i n t o m a t u r e D C s . ( 3 ) D C s

16、m o b i l i z e d b yR a c n e s i n j e c t i o n w e r e l o a d e d w i t h g a s t r i c c a r c i n o m a a n t i g e n b y c o - c u l t u r e d w i t hs t o m a c h c a n c e r c e l l l y s a t e s

17、. T h e n t h e k i l l e f e c t o f T c e l l s s t i m u l a t e d w i t h t h o s e D C s t os t o m a c h c a n c e r c e l l w a s e v a l u a t e dR e s u l t s : F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D 1 1 c +

18、 c e l l s i n c r e a s e d i n c i r c u l a t i o n 1 h o u r a f t e r R a c n e si n j e c t i o n a n d g r a d u a l l y r e a c h e d a p e a k l e v e l 2 4 h o u r a f t e r i n j e c t i o n

19、. F r e s h l y i s o l a t e dF 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l l c + c e l l sc h e m o k i n e r e c e p t o r s t h e yd i d n o t e x h i b i t t h e c h a r a c t e r o f ma t u r eD C s . T h e m a j o re x

20、 p r e s s e d a r e C C R I a n d C C R 5 b u t d i d n o t e x p r e s s C C R 7 .A f t e r c u l t u r e d w i t h c y t o k i n e s G M - C S F、 I L - 4 a n d T N F a , F 4 / 8 0 - B 2 2 0 - C D l l c