kir3.1基因沉默對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠竇性心動(dòng)過緩的作用及機(jī)制探討

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我校或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)

2、使用授權(quán)書本人完全了解中國(guó)醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即：研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容( 保密內(nèi)容除外) ，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名：指導(dǎo)教師

3、簽名：日 期：·中文論著摘要·Ⅺr 3 ．1 基因沉默對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠竇性心動(dòng)過緩的作用及機(jī)制探討刖 吾嚴(yán)重竇性心動(dòng)過緩是由心臟竇房結(jié)血供不足及其鄰近組織病變所致的心動(dòng)過緩并引起相關(guān)性心腦‘腎供血不足癥狀。使用迷走神經(jīng)阻斷劑治療竇性心動(dòng)過緩可明顯提高患者心率，改善癥狀。但迷走神經(jīng)阻斷劑阿托品等存在使用麻煩、日干、前列腺增生者不能使用等多種副作用。盡管現(xiàn)代起搏技術(shù)己發(fā)展到較高的程度，但仍存在并發(fā)癥等諸多問題，因此，探索新的

4、治療方法具有很大的臨床應(yīng)用價(jià)值與前景。正常竇房結(jié)起搏頻率的快慢是由交感神經(jīng)與迷走神經(jīng)共同支配的。通過抑制迷走神經(jīng)，可以減弱其負(fù)性變時(shí)作用而達(dá)到提高心率的作用。乙酰膽堿作為迷走神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)調(diào)節(jié)心臟負(fù)性變時(shí)功能起很重要的作用。心臟迷走神經(jīng)通過釋放的乙酰膽堿( a c e t y l c h o l i n e ，A c h ) ，作用于心房肌細(xì)胞毒蕈樣2 受體( m u s e a r i n i c 2a c e t y l c h o l

5、 i n e r e c e p t o r ，M 2 A ．C h R ) 一G 蛋白一I K A C h 通路，激活K A c h ( m u s c a r i n i ca c e t y l c h o l i n e ．s e n s i t i v eK + c h a n n e l ) ，從而發(fā)揮其負(fù)性變時(shí)的作用。K A c h 存在于心臟的竇房結(jié)、房室結(jié)、心房肌細(xì)胞，少量存在于心室肌，乙酰膽堿引主要通過其發(fā)揮負(fù)性變時(shí)

6、作用。K A C h 是x 亞基K i r3 ．1 ／G I R K l ( p o t a s s i u m i n w a r d l y - r e c t i f y i n gc h a n n e l ) 矛HK i r 3 ．4 ／G I R K 4 的四聚物，K A C h 通道的特性主要與K i r3 ．1 有關(guān)，K i r3 ．1可增加K A c h 通道的活性。本實(shí)驗(yàn)通過檢測(cè)轉(zhuǎn)染s i R N A ( S m a

7、 l li n t e r f e r e n c e R N A ) 前后體外培養(yǎng)大鼠心房肌細(xì)胞K i r 3 ．1 及飚r 2 ．1 基因m R N A 含量的變化情況，并通過蛋白質(zhì)印跡雜交( W e s t e r n ．b l o t ) 檢測(cè)其蛋白質(zhì)表達(dá)變化，利用膜片鉗技術(shù)記錄I K A c h 的變化，最終確定抑制K i r 3 ．1 基因效率最高的s i R N A 序列，繼而合成帶綠色熒光蛋白的重組慢病毒載體( L e