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1、論文題目:Q :3 豎透明廈酸勉盟皇純巫堇因塞王腿叢! 鼠預(yù)隨獨漁痘佳旦答辯委員會主席: 揚基寶塾拯答辯委員會成員: 僉5 亙復(fù)熬援王銦 教援溫州醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文0 .3 %透明質(zhì)酸鈉對單純環(huán)境因素千眼小鼠的預(yù)防和治療作用中文摘要目的:比較0 .1 %透明質(zhì)酸鈉滴眼液和o .3 %透明質(zhì)酸鈉滴眼液對于單純環(huán)境因素誘導(dǎo)的干眼模型小鼠的治療和預(yù)防作用及其安全性,探討高濃度透明質(zhì)酸鈉滴眼液對于干眼治療的效果。方法:本研究通過智能環(huán)境控制系
2、統(tǒng)( I n t e l l i g e n t C o n t r o l l e d E n v i r o n m e n t a l S y s t e m ,I C E S ) 調(diào)控實驗動物飼養(yǎng)環(huán)境的濕度、溫度以及氣流,誘導(dǎo)C 5 7 B L /6 d 、鼠產(chǎn)生類似人類單純環(huán)境因素干眼的眼表改變。實驗設(shè)有兩個治療組以及三個對照組,分別為:0 .1 %透明質(zhì)酸鈉治療組( A 組) ;0 .3 %透明質(zhì)酸鈉治療組( B 組) :磷
3、酸鹽緩沖液( P B S 組) :未接受任何治療飼養(yǎng)于I C E S 飼養(yǎng)箱( I C E S 組) ;未接受任何治療飼養(yǎng)于正常環(huán)境( N T ) 。兩種方案均采用雙眼給藥,一天4 次。研究選用兩種方案:實驗組小鼠放入I C E S 飼養(yǎng)箱即開始雙眼給藥,直至第1 4 天( 方案1 ,S 1 ) ,評估不同濃度透明質(zhì)酸鈉對于干眼的預(yù)防作用;實驗組小鼠放入I C E S 飼養(yǎng)箱造模1 4 天后開始雙眼給藥,持續(xù)至第2 8 天( 方案2 ,
4、S 2 ) ,評估不同濃度透明質(zhì)酸鈉對于干眼的治療作用。通過熒光素鈉染色裂隙燈觀察角膜上皮完整性、過碘酸雪夫染色( P e r i o d i c a c i d .s c h i f f s t a i n ,P A S ) 觀察結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)密度并計數(shù)結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)目、免疫熒光染色方法( T U N E L o rC a s p a s e .3 ) 檢測角膜上皮細(xì)胞凋亡并計數(shù)、q R T - P C R 檢測結(jié)膜炎癥因子白介素一
5、1 1 3 ( I n t e r l e u k i n .1 ,I L .1 1 3 ) ,白介素一6 ,( I n t e r l e u k i n .6 ,I L .6 ) ,白介素一1 7 ( I n t e r l e u k i n .1 7 ,I L —1 7 ) ,白介素一2 3( I n t e r l e u k i n .2 3 ,I L 一2 3 ) 及腫瘤壞死因子( T u m o r N e c r o
6、s i sF a c t o r s .a(chǎn) ,T N F .a(chǎn) )的表達(dá)情況。結(jié)果:方案1 與方案2 中A 組和B 組( 8 .0 + 1 .3 ,9 .0 ±1 .7 ;6 .0 ±1 .4 ,8 .0 + 2 .2 )角膜熒光素鈉染色評分明顯低于P B S 組和I C E S 組( 1 1 .0 + 2 .6 ,1 5 .0 ±2 .6 :1 3 .2 + 2 .2 6 ,1 5 .O ±2
7、.8 ;P < 0 .0 0 1 ) 。P A S 試驗結(jié)果顯示,A 組和B 組結(jié)膜杯狀細(xì)胞形態(tài)以及數(shù)目更接近正常組( N T ) ,而P B S 組和I C E S 組結(jié)膜杯狀體積明顯縮小,結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)量減少,與治療組之間存在統(tǒng)計學(xué)差異( P < O .0 0 1 ) 。方案l 與方案2 中A 組結(jié)膜杯狀細(xì)胞數(shù)目下降更加明顯,與B 組結(jié)膜杯狀細(xì)胞計數(shù)之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義( 1 1 2 + 3 ,8 5 _ + 3 ;1
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