實(shí)驗(yàn)三果蠅的性狀、生活史觀察及飼養(yǎng)

1、,實(shí)驗(yàn)三 果蠅的性狀、生活史觀察及飼養(yǎng),一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 了解果蠅生活史中各個(gè)不同階段的形態(tài)特點(diǎn)； 2. 區(qū)別雌雄果蠅以及幾種常見(jiàn)突變類型的主要性狀特征； 3. 掌握實(shí)驗(yàn)果蠅的飼養(yǎng)、管理及實(shí)驗(yàn)處理方法和技術(shù)。,,二、實(shí)驗(yàn)原理 果蠅的優(yōu)點(diǎn)： 1. 生活史短，20-25℃條件下完成一個(gè)世代需12-15天。 2. 繁殖率高，一對(duì)果蠅可產(chǎn)卵400-500只。 3. 個(gè)體小，飼養(yǎng)方便

2、，培養(yǎng)費(fèi)用低廉。 4. 突變率高。 5. 形態(tài)容易辨認(rèn)。 6. 染色體數(shù)目少，只有4對(duì)，且具有較大的唾腺染色體。 因此，果蠅是遺傳學(xué)、細(xì)胞學(xué)、發(fā)育生物學(xué)等研究中最好的模式動(dòng)物。,三、實(shí)驗(yàn)材料、用具及試劑 果蠅種類：野生型(18#)、殘翅(2#)、白眼(22#)、黑檀體(e#)、三隱性(6#)。 雙目解剖鏡、放大鏡、小鑷子、麻醉瓶、白瓷板或 白紙、毛筆、乙醚、酒精。,四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 1

3、.果蠅的生活史 果蠅（Drosophila melanogaster 2n=8） 中文名：黑腹果蠅 果蠅屬于節(jié)肢動(dòng)物門、昆蟲(chóng)綱、雙翅目、果蠅科、果蠅屬，與家蠅是不同的種。,果蠅的生活周期長(zhǎng)短與溫度關(guān)系很密切。30℃以上的溫度能使果蠅不育和死亡，15 ℃以下則使它的生活周期延長(zhǎng)，同時(shí)生活力也降低，果蠅培養(yǎng)的最適溫度為20-25℃。,從表中可以看出，25℃時(shí)，從卵到成蟲(chóng)約10天；在25℃時(shí)成蟲(chóng)約活2

4、0~30天。,生活史：屬于完全變態(tài)。最適溫度：20-25℃生活史周期： 12-15 day (20-25℃) 10 day (26℃) 57 day (10℃)羽化后： 8-12h 后交配 兩天后產(chǎn)卵成蟲(chóng)存活：20-30 day (25℃),,卵：羽化后的雌蠅一般在12小時(shí)后開(kāi)始交配，兩天后才能產(chǎn)卵。卵長(zhǎng)0.5mm，為橢圓形，腹面稍扁平，被絨毛膜，在背面的前端伸出一對(duì)觸絲（filament）

5、，它能使卵附著在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。,三齡幼蟲(chóng)4.5mm，在培養(yǎng)基上作溝穿孔。,幼蟲(chóng)：從卵孵化出來(lái)后，經(jīng)過(guò)兩次蛻皮，發(fā)育成三齡幼蟲(chóng)，此時(shí)體長(zhǎng)可達(dá)4-5mm。肉眼可見(jiàn)其前端稍尖部分為頭部，上有一黑色斑點(diǎn)即為口器。口器后面有一對(duì)透明的唾液腺，透過(guò)體壁可見(jiàn)到一對(duì)生殖腺位于軀體后半部上方的兩側(cè)，精巢較大，外觀上是一明顯的黑點(diǎn)，而卵巢則較小，可以此作為鑒別。幼蟲(chóng)活動(dòng)力強(qiáng)而貪食，它們?cè)谂囵B(yǎng)基上爬行時(shí)，留下很多條溝，溝多而且寬時(shí)，表

6、明幼蟲(chóng)生長(zhǎng)良好。,蛹：幼蟲(chóng)生活7-8天準(zhǔn)備化蛹，化蛹前從培養(yǎng)基上爬出，附著在瓶壁上，逐漸形成一梭形的蛹。在蛹前部有兩個(gè)呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹?xì)ゎ伾S而柔軟，以后逐漸硬化，變?yōu)樯詈稚?，表明即將羽化了?成蟲(chóng)：幼蟲(chóng)在蛹?xì)?nèi)完成成蟲(chóng)體型和器官的分化，最后從蛹?xì)で岸伺莱?。剛從蛹?xì)だ镉鸹鰜?lái)的果蠅蟲(chóng)體比較長(zhǎng)，翅膀尚未展開(kāi)，體表尚未完全幾丁質(zhì)化，故呈半透明的乳白色。透過(guò)腹部體壁，可以看到黑色的消化系統(tǒng)。不久，變?yōu)槎檀謭A形，雙翅展開(kāi)

7、，體色加深。如野生型初為淺灰色，然后呈灰褐色。,2. 形態(tài)構(gòu)造 頭部：有一對(duì)復(fù)眼，三個(gè)單眼和一對(duì)觸角。 胸部：有三對(duì)足，一對(duì)翅和一對(duì)平衡棒。 腹部：背面有黑色環(huán)紋，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有許多體毛和剛毛。,3.成蟲(chóng)雌雄的鑒別,果蠅♀♂識(shí)別,果蠅♀♂識(shí)別,果蠅♀♂識(shí)別,雄果蠅,雌果蠅,果蠅♀♂識(shí)別,果蠅♀♂識(shí)別,雄果蠅,雌果蠅,4.果蠅常見(jiàn)的幾種突變類型,身 體 顏 色,野生型：灰色，符號(hào)為 +,突變

8、型：黑檀體色，符號(hào)為 e,眼 睛 顏 色,野生型：磚紅色，符號(hào)為 +,突變型：白色，符號(hào)為 w,翅 膀 形 狀,野生型：圓卵型，長(zhǎng)度約為腹部的2倍，符號(hào) +,殘翅型：翅膀退化殘缺不全，符號(hào) vg,白眼w， 小翅 m, X染色體,剛 毛 形 狀,野生型：剛毛長(zhǎng)粗、黑硬、平直，先端略彎，符號(hào) +,焦剛毛：剛毛先端分叉彎曲，符號(hào)sn3,白眼 w、小翅 m、焦剛毛 sn (剛毛卷曲如燒焦?fàn)? （全在X染色體）,性狀、染色

9、體和基因型,紅眼（+）白眼（w）,第一連鎖群,長(zhǎng)翅（+）殘翅（vg）,第二連鎖群,灰身（+）黑檀體（e）,第二連鎖群,第三連鎖群,長(zhǎng)翅（+）小翅（m）,第一連鎖群,直剛毛（+）卷剛毛（sn）,第一連鎖群,灰身（+）黑體（b）,第二連鎖群,5.果蠅的飼養(yǎng)1）培養(yǎng)基的配制 果蠅以酵母菌為食，常采用發(fā)酵的培養(yǎng)基繁殖酵母菌來(lái)飼養(yǎng)果蠅。培養(yǎng)基常用玉米粉、米粉或香蕉配制，本實(shí)驗(yàn)采用玉米粉紅糖培養(yǎng)基，其配方如下：,果蠅

10、培養(yǎng)基成分,配制方法,配制時(shí)先將水分成兩份：一份用于加熱溶解瓊脂和糖，另一份煮玉米粉，玉米粉要先用冷水?dāng)嚢?，再加到煮沸瓊脂紅糖溶液中，邊倒邊攪拌。繼續(xù)煮15-20分鐘，關(guān)掉火后再加入苯甲酸(用少量酒精促溶) ，要充分?jǐn)嚢韬笤俜盅b培養(yǎng)瓶。每瓶培養(yǎng)基厚度在2-3cm，置121℃高壓蒸汽滅菌15分鐘。 待培養(yǎng)基冷卻后，在培養(yǎng)基的表面滴加新鮮酵母液，插上一塊經(jīng)滅菌后的濾紙片做為幼蟲(chóng)化蛹的干燥場(chǎng)所。,2）果蠅繼代培養(yǎng),將果蠅轉(zhuǎn)移到新配制的

11、培養(yǎng)基中繁殖。轉(zhuǎn)移時(shí)要注意轉(zhuǎn)移的手法，不要使果蠅從兩個(gè)瓶口的接縫處飛出。一般用黑紙包住帶有親本果蠅的培養(yǎng)瓶，使其飛入帶有新培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶,準(zhǔn)備轉(zhuǎn)移果蠅的親本及培養(yǎng)基,,果蠅的轉(zhuǎn)移,,幼蟲(chóng)化蛹時(shí)爬到瓶璧或?yàn)V紙上。,6 果蠅性狀的觀察1）果蠅的麻醉處理 在果蠅的性狀觀察、性別鑒定以及雜交親本接種等操作中，應(yīng)先將果蠅麻醉，使其保持安靜狀態(tài)。麻醉方法如下：（1）準(zhǔn)備一只與培養(yǎng)瓶口徑相同的空瓶作為麻醉瓶，并配以脫脂棉塞。（2

12、）去掉培養(yǎng)瓶棉塞，立即與麻醉瓶口相對(duì)，培養(yǎng)瓶在上，一手穩(wěn)住兩瓶，另一手輕輕震拍培養(yǎng)瓶，使果蠅落入麻醉瓶中。,（3）滴數(shù)滴乙醚于麻醉瓶棉塞內(nèi)，迅速將兩瓶塞住，約30s，麻醉瓶?jī)?nèi)的果蠅即處于麻醉狀態(tài)。 注意：不能麻醉過(guò)度。若蠅翅與蠅體呈45º角翹起，表明麻醉過(guò)度，不能復(fù)蘇而死亡。 2）觀察 選取一張10x10cm白紙，在白紙中央畫(huà)一個(gè)半徑為0.5cm小圓圈及圓心，在體視鏡下找到圓圈后將白紙固定好，將麻醉后的果