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1、以鯽魚為受試動(dòng)物,用甲草胺和阿特拉津兩種除草劑染毒,研究這兩種環(huán)境激素對(duì)鯽魚的主要免疫細(xì)胞-淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活性功能的影響,觀察甲草胺和阿特拉津體外染毒與長(zhǎng)期暴露對(duì)鯽魚的免疫毒性,為評(píng)價(jià)環(huán)境激素對(duì)動(dòng)物的內(nèi)分泌干擾效應(yīng)及篩選環(huán)境激素的生物標(biāo)志物提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下: 從鯽魚血液中分離淋巴細(xì)胞體外培養(yǎng),用甲草胺和阿特拉津染毒,開展對(duì)淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)活性的影響實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,兩種環(huán)境激素對(duì)淋巴細(xì)胞活性的抑制作用存在較明顯的
2、劑量-效應(yīng)關(guān)系,甲草胺和阿特拉津?qū)α馨图?xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為27.7±7.6 μg/L和 97.6±26.4 μg/L。兩種環(huán)境激素對(duì)鯽魚淋巴細(xì)胞增殖的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甲草胺在濃度達(dá)到7 μg/L時(shí)就對(duì)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生明顯的抑制作用,而阿特拉津則在濃度達(dá)到50 μg/L時(shí)才對(duì)淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生抑制作用。 從鯽魚的免疫器官-頭腎中分離純化得到巨噬細(xì)胞,體外培養(yǎng),用甲草胺和阿特拉津染毒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甲草胺和阿特拉津
3、對(duì)巨噬細(xì)胞的IC50分別為68.2±7.1 μg/L和153.9±23.5 μg/L。甲草胺和阿特拉津?qū)a魚巨噬細(xì)胞產(chǎn)生超氧陰離子(O2-)活性的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,兩種環(huán)境激素均可抑制巨噬細(xì)胞產(chǎn)生超氧陰離子(O2-)活性,但劑量-效應(yīng)關(guān)系并不顯著。 甲草胺和阿特拉津?qū)?xì)胞酶活的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,兩種環(huán)境激素對(duì)淋巴細(xì)胞的乳酸脫氫酶(LDH)酶活和巨噬細(xì)胞的LDH與酸性磷酸酶(ACP)酶活的抑制作用表現(xiàn)出明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。因此
4、可推斷,甲草胺和阿特拉津?qū)?xì)胞酶活的抑制效應(yīng)可能是其對(duì)鯽魚淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活性功能產(chǎn)生影響的主要原因。 將鯽魚分別暴露于不同濃度的甲草胺和阿特拉津,60 d后采血,一部分用于分離淋巴細(xì)胞進(jìn)行淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),一部分用于血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)。長(zhǎng)期暴露實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,濃度范圍為64~500 μg/L的甲草胺染毒組和濃度范圍為6~3000 μg/L的阿特拉津染毒組的淋巴細(xì)胞增殖水平與對(duì)照組相比均有不同程度的下降。血液白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明
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