生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結(jié)

1、生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結(jié)生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結(jié)一、化學物質(zhì)的檢測方法一、化學物質(zhì)的檢測方法①淀粉——碘液(藍色)②還原性糖——斐林試劑班氏試劑(磚紅色)③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)④乳酸——pH試紙⑤O2——余燼復然⑥蛋白質(zhì)——被蛋白酶水解、雙縮脲試劑(紫紅色)⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液(橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液(紅色)⑧DNA——二苯胺(藍色)⑨染色體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液二、實驗條件的控制方法

2、二、實驗條件的控制方法1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水3、除去容器中CO2——NaOH溶液4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱6、除去光合對呼吸干擾——給植株遮光7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉9、線粒體提取——細胞勻漿離心10、骨無機鹽的除去——鹽酸溶液11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌接種環(huán)用火

3、焰灼燒滅菌雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒實驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌整個過程都在實驗室無菌區(qū)或酒精燈旁進行。三、實驗結(jié)果的顯示方法三、實驗結(jié)果的顯示方法①光合速度——O2釋放量或CO2吸收量或有機物生成量◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時間內(nèi)上浮的葉片數(shù)目◆植物體上的葉片可依指示劑(如碘液)處理后葉片顏色深淺。②呼吸速度——O2吸收量或CO2釋放量或有機物消耗量③原子或分子轉(zhuǎn)移途徑——

4、放射性同位素示蹤④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離⑤植物細胞是否死亡——質(zhì)壁分離⑥甲狀腺激素—動物耗氧量發(fā)育速度等⑦生長激素—生長速度(體重、體長變化)⑧胰島素作用—動物活動狀態(tài)⑨菌量—菌落數(shù)，亞甲基藍褪色程度四、實驗中控制溫度的方法四、實驗中控制溫度的方法1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱2、酶促反應(yīng)——水浴保溫3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、4、細胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng)五、實驗中常用器材和藥品的使用五、實

5、驗中常用器材和藥品的使用1、NaOH：用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H2、Ca(OH)2：鑒定CO23、CaCl2提高細菌細胞壁的通透性4、HCl：解離或改變?nèi)芤旱膒H5、NaHCO3：提供CO26、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA7、瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑8、亞甲基藍：用于檢測污水的細菌含量9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液10、蔗糖：測定植物細胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復原、作為碳源和能源物質(zhì)

6、11、濾紙：過濾或紙層析12、紗布、尼龍布：過濾，遮光13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑六、一些常見的實驗方法六、一些常見的實驗方法⑴、根據(jù)顏色來確定某種物質(zhì)的存在：淀粉I2(藍色)還原性糖斐林試劑(磚紅色)脂肪蘇丹Ⅲ(橘黃)或蘇丹Ⅳ(紅色)蛋白質(zhì)雙縮脲試劑(紫色)大腸桿菌伊紅和美藍(菌落為深紫色，有金屬光澤)⑵、用顏色標記法來確定原腸胚三個胚層的分化情況。⑶、用熒光標記法來證明細胞膜具有一

7、定的流動性⑷、同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來源光合作用中二氧化碳的去向噬菌體侵染細菌實驗證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)DNA的復制是半保留復制。⑸、確定某種元素為植物生長必需的元素的方法:水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對照)⑹、獲得無籽果實的方法:用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房，如無籽蕃茄、誘導染色體變異，如無籽西瓜。⑺、確定某種激素功能的方法：飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。⑻、確定傳入、傳出神

8、經(jīng)的功能：刺激觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測定神經(jīng)上的電位變化。⑼、植物雜交的方法雌雄同花：花蕾期去雄套袋開花期人工授粉套袋雌雄異花：花蕾期雌花套袋開花期人工授粉套袋⑽、確定某一顯性個體基因型的方法：固而失去功能，以達到消毒殺菌的目的。高于體積分數(shù)為75%濃度的酒精與細菌接觸時，就可能使得菌體表面迅速凝固，形成一層薄膜，阻止了酒精繼續(xù)向菌體內(nèi)部滲透，待到適當時機，薄膜內(nèi)的細胞可能將薄膜沖破而重新復活。在此高濃度下，酒精迅速凝固蛋白質(zhì)的作用往往隨著

9、其濃度升高而增強，因此，其消毒殺菌的效果也就越差。若酒精的濃度低于75％，也因不能順利地滲入到細菌體內(nèi)而徹底殺死細菌。如果使用體積分數(shù)為75％的酒精，既能使組成細菌的蛋白質(zhì)凝固，又不能形成薄膜，這樣，酒精可繼續(xù)向內(nèi)部滲透，從而達到較好的消毒效果。值得注意的是，體積分數(shù)為75%的酒精溶液的殺菌能力不是絕對很強，它對芽孢就不起作用。3.3應(yīng)用學習微生物的培養(yǎng)技術(shù)。在接種開始時，待用肥皂將雙手洗干凈后，再用體積分數(shù)為75%的酒精棉球擦拭雙手，

10、然后在進行接種操作。4無水酒精無水酒精4.1作用提取色素。4.2原理葉綠體中的各種色素均是有機物，能溶解在有機溶劑中，各色素在無水酒精中的溶解度較大，且酒精無毒，方便操作。4.3應(yīng)用葉綠體中色素的提取與分離。5工業(yè)酒精工業(yè)酒精（一般是體積分數(shù)為95%的酒精）5.1作用燃燒加熱。5.2原理酒精是富含能量的有機物，燃燒能產(chǎn)生大量的熱量。5.3應(yīng)用此處包括各類必須加熱的實驗，如生物組織中還原糖的鑒定、比較過氧化氫酶和Fe3的催化效率、探索淀粉

11、酶對淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取與鑒定、溫度對酶活性的影響、學習微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)、自身固氮菌的分離等實驗。在觀察根尖分生組織細胞的有絲分裂中，與酒精1:1混合，起解離作用在觀察DNA和RNA在細胞中的分布中，改變細胞膜的通透性，加速染色劑進入細胞，同時使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。酒精在生物實驗中的作用有以下四個方面酒精在生物實驗中的作用有以下四個方面1.有機溶劑有機溶劑酒精是能與水和大多數(shù)有機溶劑混

12、溶的親水性和脂溶性有機溶劑，是實驗室常用的溶劑。其特點是在常溫常壓下呈液態(tài)，具有較大的揮發(fā)性，在溶解過程中，溶質(zhì)與溶劑的性質(zhì)均無改變。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分，在乙醇中的溶解度也較大。因此，利用酒精的這種特性在生物實驗中常有下面幾種用途。1.1脫色劑酒精是一種常用的脫色試劑。在一些以顏色變化為觀察對象的實驗中，必須將材料中會引起干擾作用的色素除去，即要進行脫色處理以

13、免干擾對實驗結(jié)果的觀察。如在“探究葉綠體在光照下合成淀粉實驗”中，將處理過的天竺葵葉片放入盛有酒精的小燒杯里，隔水加熱，使葉片褪色（破壞和溶解葉片中所含的色素）。這樣就可在滴加碘液后避免對觀察葉片顏色變化的干擾。1.2漂洗劑酒精是良好的有機漂洗劑。材料經(jīng)染色或相應(yīng)處理后會有一些染料或物質(zhì)附著在其表面，必須將材料表面的浮色等清洗掉才能避免對后續(xù)實驗步驟以及實驗結(jié)果觀察的干擾。對于不溶于水的物質(zhì)需用酒精漂洗。如在“脂肪的鑒定實驗”中，用蘇丹

14、Ⅲ染液對脂肪組織進行染色后，可用體積分數(shù)為50%的酒精來沖洗浮色，以免干擾對細胞內(nèi)脂肪顆粒的觀察。因為50%酒精對脂肪組織沒有破壞作用并且容易揮發(fā)，且蘇丹Ⅲ染料在酒精溶解度較高，所以用50%的酒精作為洗去浮色的漂洗劑。1.3提取劑和層析劑酒精的溶解性能比較好，對細胞的穿透能力較強。能夠溶解各種色素和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，且酒精無毒，方便操作，可用酒精作為提取和分離物質(zhì)的試劑。在“綠葉中色素的提取和分離實驗”中，可以用酒精作為提取色素的試劑。利用

15、各種色素在層析液中溶解度的不同使色素隨層析液在濾紙上因擴散速度差異而分離。用醫(yī)用酒精(體積分數(shù)為95%的酒精)作為層析液分離各種色素。在“DNA的粗提取與鑒定實驗”中，采用酒精沉淀法，利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)、脂肪及磷脂等能溶解其中，可以進一步提出含雜質(zhì)較少的DNA絲狀物。2.固定劑固定劑酒精的脫水能力比較強，又能使蛋白質(zhì)變性硬化組織。是一般固定液中不可缺少的成分。用其作為簡單固定劑使用時，常用于組織制片固定劑或組織保存劑。如在“

16、觀察植物細胞有絲分裂實驗”中一般采用質(zhì)量分數(shù)為15%的鹽酸和體積分數(shù)為95%的酒精按體積比1：1混合而成的藥液作為解離試劑。鹽酸能夠使洋蔥細胞的細胞壁軟化，并使細胞間的中膠層物質(zhì)溶解，從而達到分離細胞的目的。酒精的作用是固定蛋白質(zhì)，使細胞的原生質(zhì)凝固，不發(fā)生變化，固定細胞的分裂相，以盡可能保持原來的結(jié)構(gòu)供觀察。酒精也可與其它試劑混合成復合固定劑，如卡諾固定液就是由無水酒精3份：冰醋酸1份配制而成，適用于一般植物組織和細胞的固定，常用于根

17、尖、花藥壓片及子房石蠟切片等。3.消毒劑消毒劑酒精是常用的外用消毒藥，具有消毒殺菌作用，常用于皮膚創(chuàng)傷清洗、注射、輸血、抽血以及手術(shù)前皮膚的消毒等。不同濃度的酒精其用途和作用也不同。70％～75％濃度殺菌作用最強，此濃度的酒精與細菌的滲透壓近似，在細菌表面蛋白未變性前能不斷地向菌體內(nèi)部滲入，使細菌所有蛋白脫水、變性凝固，最終殺死細菌，以達到消毒殺菌的目的。濃度低于70％，則滲透性降低，達不到滅菌消毒目的。高于體積分數(shù)為75%濃度的酒精與