痰涂片鏡檢操作規(guī)范

1、痰涂片鏡檢操作規(guī)范,寧波市疾病預(yù)防控制中心 平國華,一、標(biāo)本的來源與收集,初診時(shí)留取標(biāo)本數(shù)量,以三份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)作為100％，留取一份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)占全部陽性例數(shù)的80％，留取兩份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)占全部陽性檢出例數(shù)的95％。,,不同痰液涂片陽性率表（僅供示例） 性質(zhì) 例數(shù) 陽性數(shù) 陽性率 干酪樣痰 55 36 65.5% 血性痰 46

2、 16 34.8% 粘液性痰 529 56 10.6% 水樣痰 92 7 7.6%,二、痰標(biāo)本制作前的準(zhǔn)備,（一）、脫脂玻片（95%乙醇浸泡）（二）、竹簽（三）、痰涂片模板,,脫脂玻片95%的乙醇浸泡后晾干備用,,,痰涂片摸板10mm×20mm的橢圓 于玻片右2/3的中心,,使用鉛筆在磨砂面上標(biāo)記,www.themeg

3、allery.com,三、痰涂片的制作,標(biāo)本靜置消毒確保標(biāo)本編號(hào)一致（初診3個(gè)、治療或隨訪2個(gè)）輕輕打開蓋子挑取標(biāo)本中膿樣或可疑部分按照模板，從橢圓形中心開始，從里→外→里，反復(fù)多次涂抹，稍晾，待痰膜水分揮發(fā)部分，視痰膜厚薄程度，再次挑取適量痰液，涂至滿意為止（循環(huán)覆蓋）,不得使用火焰加熱的方法加速痰膜干燥,×,太厚 適宜

4、 太薄,,,痰膜的厚薄,,,,水樣痰的涂法 可用反復(fù)多次覆蓋法，實(shí)在挑取不到什么東西，先用吸管吸取適量標(biāo)本（標(biāo)本一定要靜置），稍晾（時(shí)間較長），再用竹簽涂抹均勻致滿意涂抹完的標(biāo)本自然干燥后，再火焰固定（5秒內(nèi)來回4次）,四、抗酸染色原理,初染時(shí)堿性復(fù)紅與細(xì)胞壁的分枝菌酸結(jié)合脫色時(shí)脫色液不能將堿性復(fù)紅從抗酸菌細(xì)胞壁上洗脫抗酸菌的染色保持初染的顏色復(fù)染提供背景對(duì)比,五、注意事項(xiàng),加熱固定后待徹底冷卻染液覆蓋整

5、個(gè)痰膜染架要平衡玻片間保持一定距離沖洗用背面沖洗法脫色時(shí)人不能離開,,,,背面沖洗,,脫色,討論（1）：痰盒正確否？right?,那一種可以接受？,討論（2）滴加染液和加熱,討論（2）滴加染液和加熱,討論（2）滴加染液和加熱,附件（僅供參考）,六、評(píng)價(jià)痰涂片,位置大?。?0mm×20mm）厚?。▌偤猛高^報(bào)紙的5號(hào)字體，鏡下每個(gè)視野20個(gè)左右細(xì)胞）染色（肉眼看天藍(lán)色,無紅/紫色斑塊）脫落（＜10%痰膜面積）,單一

6、的抗酸菌,,,,,“V”- 字形,成簇的抗酸菌,復(fù)染太濃造成的影響,,,,適宜的復(fù)染,涂片檢查視野順序,鏡檢：在淡藍(lán)色背景下，抗酸桿菌呈紅色，其它細(xì)菌和細(xì)胞呈藍(lán)色 涂片結(jié)果報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)(萋－尼氏抗酸菌染色法)陰性 300 視野 0條報(bào)告菌數(shù) 300 視野 1～8條 陽性1＋ 100視野 3～9條 陽性2＋

7、10視野 1～9條陽性3＋ 每視野 1～9條陽性4＋ 每視野 >10條,如何進(jìn)行痰涂片質(zhì)量控制,痰標(biāo)本收集:標(biāo)本性狀的控制（加強(qiáng)于醫(yī)生溝通）3份痰標(biāo)本（1即時(shí)痰、2夜間痰、3晨間痰）痰標(biāo)本保存（不能當(dāng)日檢查的保存于冰箱防液化）染液控制用之前過濾一下（一周一次）,如何進(jìn)行痰涂片質(zhì)量控制,室內(nèi)質(zhì)控抽查復(fù)檢當(dāng)日10%的涂片，自查或互查選取結(jié)果可疑的涂片復(fù)查，

8、尤其是只看到一條的或只在一處視野看到細(xì)菌選擇痰陽病人有陰性結(jié)果的涂片記錄結(jié)果1-8條涂片,玻片的保存,使用顯微鏡附帶的鏡油，或者是購買的鏡油（immersion oil）,而不是香柏油（cedar oil）,則不需使用二甲苯，直接使用鏡頭紙擦拭即可干燥后的玻片，按實(shí)驗(yàn)室序號(hào)及涂片編號(hào)放置在玻片盒中，存放在陰涼干燥環(huán)境中。處于潮濕炎熱的環(huán)境中抗酸菌易于褪色。,痰細(xì)菌學(xué)檢查工作經(jīng)常被忽視,人員不穩(wěn)定，培訓(xùn)不足實(shí)驗(yàn)室設(shè)備不足，更新較慢

9、不注意總結(jié)與提高,如何提高痰細(xì)菌學(xué)檢查在專業(yè)人員心目中地位,加強(qiáng)自身專業(yè)技術(shù)素質(zhì)保證痰細(xì)菌學(xué)檢查工作質(zhì)量應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)一的技術(shù)規(guī)范注意積累、總結(jié)工作經(jīng)驗(yàn)不斷加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室的規(guī)范化建設(shè)（人員配備、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、安全操作、質(zhì)量控制）,質(zhì)控范圍,評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)痰片鏡檢：陽性片符合率≥98%, 陰性片符合率≥96%制片質(zhì)量：痰細(xì)胞，痰膜面積、厚薄、脫落合格率≥90%，染色合格率≥95%,,歡迎提出寶貴意見！,謝