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1、第1頁(yè)共21頁(yè)實(shí)驗(yàn)一:觀察實(shí)驗(yàn)一:觀察DNADNA、RNARNA在細(xì)胞中的分布(必修一在細(xì)胞中的分布(必修一P26P26)一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模阂粚?shí)驗(yàn)?zāi)康模撼醪秸莆沼^察DNA和RNA在細(xì)胞中分布的方法二實(shí)驗(yàn)原理二實(shí)驗(yàn)原理1甲基綠甲基綠DNADNA綠色綠色兩種試劑不是單獨(dú)使用,應(yīng)混合使用兩種試劑不是單獨(dú)使用,應(yīng)混合使用吡羅紅吡羅紅RNARNA紅色紅色28%8%鹽酸:改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色休中的鹽酸:改變細(xì)胞膜的通透性,加
2、速染色劑進(jìn)入細(xì)胞,同時(shí)使染色休中的DNADNA和蛋白質(zhì)分離,有利于和蛋白質(zhì)分離,有利于DNADNA與染色劑結(jié)合。與染色劑結(jié)合。0.9%NaCl0.9%NaCl溶液:保持口腔上皮細(xì)胞正常形態(tài)溶液:保持口腔上皮細(xì)胞正常形態(tài)蒸餾水:配制染色劑,沖冼載玻片蒸餾水:配制染色劑,沖冼載玻片三方法步驟三方法步驟操作步驟操作步驟注意問(wèn)題注意問(wèn)題解釋解釋取口腔上皮取口腔上皮細(xì)胞制片細(xì)胞制片載玻片要潔凈,滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為載玻片要潔凈,滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9
3、%0.9%的NaClNaCl溶液(生理鹽水)溶液(生理鹽水)用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕刮幾下取細(xì)胞上輕刮幾下取細(xì)胞將載玻片在酒精燈下烘干將載玻片在酒精燈下烘干防止污跡干擾觀察效果防止污跡干擾觀察效果保持細(xì)胞原有形態(tài)保持細(xì)胞原有形態(tài)消毒為防止感染,漱口避免取材失消毒為防止感染,漱口避免取材失敗殺死并固定裝片;烘干時(shí)應(yīng)來(lái)回移殺死并固定裝片;烘干時(shí)應(yīng)來(lái)回移動(dòng),防止受熱不均破裂動(dòng),防止受熱不均破裂水解水
4、解將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為將烘干的載玻片放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%8%的鹽酸(的鹽酸(HClHCl)溶液中,用)溶液中,用30300C水浴水浴保溫保溫5min5min①改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色改變細(xì)胞膜的通透性,加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞劑進(jìn)入細(xì)胞②促進(jìn)染色體的促進(jìn)染色體的DNADNA與蛋白質(zhì)分離與蛋白質(zhì)分離而被染色,細(xì)胞為死細(xì)胞而被染色,細(xì)胞為死細(xì)胞沖冼涂片沖冼涂片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片用蒸餾水的緩水流沖洗載玻片10S10S洗去殘留在外的
5、鹽酸洗去殘留在外的鹽酸緩水流:防止細(xì)胞被沖走緩水流:防止細(xì)胞被沖走染色染色用吸水線除去多余的水分用吸水線除去多余的水分滴2滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上滴吡羅紅甲綠染色劑于載玻片上染色染色5min5min吸取染色劑吸取染色劑除去多余的染色劑并蓋上蓋玻片除去多余的染色劑并蓋上蓋玻片觀察觀察先低倍鏡觀察:選擇染色均勻、色澤先低倍鏡觀察:選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域,移至視野淺的區(qū)域,移至視野中央,調(diào)節(jié)清晰中央,調(diào)節(jié)清晰后才換用高倍物鏡觀察:后才
6、換用高倍物鏡觀察:使觀察效果最佳使觀察效果最佳現(xiàn)象現(xiàn)象細(xì)胞核大部分被染成綠色細(xì)胞核大部分被染成綠色細(xì)胞質(zhì)大部分被染成紅色細(xì)胞質(zhì)大部分被染成紅色細(xì)胞核也有小部分被染成紅色細(xì)胞核也有小部分被染成紅色細(xì)胞質(zhì)也有小部分被染成綠色細(xì)胞質(zhì)也有小部分被染成綠色結(jié)論結(jié)論DNADNA主要集中分布于細(xì)胞核中主要集中分布于細(xì)胞核中RNARNA主要集中分布于細(xì)胞質(zhì)中主要集中分布于細(xì)胞質(zhì)中在細(xì)胞質(zhì)中也有在細(xì)胞質(zhì)中也有DNADNA分布分布在細(xì)胞核中也有在細(xì)胞核中也
7、有RNARNA分布分布幾種液體幾種液體的作用的作用第3頁(yè)共21頁(yè)(二)脂肪的鑒定(二)脂肪的鑒定⑴顯微鏡觀察法操作方法注意問(wèn)題解釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片,將薄片放在載玻片的水滴中,用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡3~4小時(shí),新花生的浸泡時(shí)間可縮短。因?yàn)榻輹r(shí)間短,不易切片,因?yàn)榻輹r(shí)間短,不易切片,浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),組織較軟,切浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng),組織較軟,切下的薄片不易成形。切片要盡下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些,便于觀察
8、。可能薄些,便于觀察。取最理想的薄片,放在載玻片中央在子葉薄片上滴2~3滴蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液蘇丹Ⅳ染液,染色1分鐘。染色時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。用吸水紙吸去薄片周圍染液,用50%酒精洗去浮色,吸去酒精。酒精用于洗去浮色①防止浮色影響對(duì)橘黃色脂肪防止浮色影響對(duì)橘黃色脂肪滴的觀察。滴的觀察。②酒精是脂溶性溶劑,可將花酒精是脂溶性溶劑,可將花生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油生細(xì)胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精,滴上1~2滴蒸餾水
9、,蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)滴上清水可防止蓋蓋玻片時(shí)產(chǎn)生氣泡。生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片的最薄處,可看到細(xì)胞中有染成橘黃色或紅色圓形小顆粒。裝片不宜久放。時(shí)間一長(zhǎng),油滴會(huì)溶解在乙醇時(shí)間一長(zhǎng),油滴會(huì)溶解在乙醇中。中。⑵花生種子勻漿蘇丹III染液橘黃色或花生種子勻漿蘇丹IV染液紅色三、蛋白質(zhì)的鑒定三、蛋白質(zhì)的鑒定操作方法注意問(wèn)題解釋制備組織樣液(浸泡、去皮研磨、過(guò)濾。)黃豆浸泡黃豆浸泡1至2天,容易研磨成天,容易研磨成漿,
10、也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)漿,也可購(gòu)新鮮豆?jié){以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間。間。鑒定:加樣液約2ml于試管中加入雙縮脲試劑A,搖勻再加入雙縮脲試劑B液3~4滴,搖勻溶液變紫色A液和B液也要分開配制,儲(chǔ)存。鑒定時(shí)先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加。先加先加NaOHNaOH溶液,提供一個(gè)堿性的環(huán)溶液,提供一個(gè)堿性的環(huán)境。境。A、B液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)液混裝或同時(shí)加入,會(huì)導(dǎo)致CuCu22變成變成CuCu(OHOH)2沉淀,而失沉淀,而失效。效。否則否
11、則CuSOCuSO4的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)的藍(lán)色會(huì)遮蓋反應(yīng)的真實(shí)顏色。顏色??捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在如果稀釋不夠,在實(shí)驗(yàn)中蛋清粘在試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘試管壁,與雙縮脲試劑反應(yīng)后會(huì)粘固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹固在試管內(nèi)壁上,使反應(yīng)不容易徹底,并且試管也不易洗干凈。底,并且試管也不易洗干凈。留適當(dāng)樣液與反應(yīng)后溶液做對(duì)照留適當(dāng)樣液與反應(yīng)后溶液做對(duì)照附:淀粉的檢測(cè)和觀察用試管取2ml待測(cè)組織樣
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