2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、1生物選修三易考知識(shí)點(diǎn)背誦專題專題1基因工程基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外體外DNADNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù)重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品要的新的生物類型和生物產(chǎn)品?;蚬こ淌窃贒NADNA分子水平分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的,又叫做DNDNA重組技術(shù)重組技術(shù)。(一)基因工程的基本工具1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)

2、切酶(限限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)制酶)(1)來源:主要是從原核生物原核生物中分離純化出來的。(2)功能:能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一專一性。(3)結(jié)果:經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式:黏性末端黏性末端和平末端平末端。2.“分子縫合針”——DNADNA連接酶連接酶(1)兩種DNA連接酶(EcoliDNA連接酶和T4D

3、NA連接酶)的比較:①相同點(diǎn):都縫合磷酸二酯磷酸二酯鍵。②區(qū)別:EcoliDNA連接酶來源于T4噬菌體噬菌體,只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶能縫合兩種兩種末端末端,但連接平末端的之間的效率較低較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)兩個(gè)DNADNA片段片段的末端,形成磷酸二酯鍵。3

4、.“分子運(yùn)輸車”——載體載體(1)載體具備的條件:①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNADNA片段片段插入插入。③具有標(biāo)記基因,供重組具有標(biāo)記基因,供重組DNADNA的鑒定和選擇的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒質(zhì)粒,它是一種裸露裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀具有自

5、我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNADNA分子分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。毒。(二)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的目的基因的獲取1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2.原核基因采取直接分離直接分離獲得,真核基因是人工合成工合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNADNA雙鏈復(fù)制雙鏈復(fù)制(2)

6、過程:第一步:加熱至90~95℃DNADNA解鏈解鏈;第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)引物結(jié)合到互補(bǔ)DNANA鏈;第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNADNA聚合酶聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步:基因表達(dá)基因表達(dá)載體的構(gòu)建體的構(gòu)建1.目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)表達(dá)和發(fā)揮作用和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因目的基因+啟動(dòng)子啟

7、動(dòng)子+終止子終止子+標(biāo)記基標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNADNA片段,位于基因的首端首端,是RNARNA聚合酶聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出轉(zhuǎn)錄出mRNAmRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。31.理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性細(xì)胞全能性全能性表達(dá)的難易程度:受精卵>生殖細(xì)受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞;植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過程:離體離體的植物器官、組織

8、或細(xì)胞―→愈傷組愈傷組織―→試管苗―→植物體(2)用途:微型繁殖、作物脫微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)工廠化生產(chǎn)。(3)地位:是培育轉(zhuǎn)基因植轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過程:(2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振離心、振動(dòng)、電刺激動(dòng)、電刺激等。化學(xué)法一般是用聚乙二醇(聚乙二醇(PEPEG)作

9、為誘導(dǎo)劑。(3)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙??朔诉h(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。(二)動(dòng)物細(xì)胞工程1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)概念:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖生長(zhǎng)和繁殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞單個(gè)細(xì)胞

10、→制成細(xì)胞懸液細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代傳代培養(yǎng)。(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制相互抑制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止停止分裂增殖分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制細(xì)胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:①無菌、無毒的環(huán)境無菌、無毒的環(huán)境:培養(yǎng)

11、液應(yīng)進(jìn)行無菌無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng):合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血清、血漿血漿等天然成分。③溫度溫度:適宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.536.5℃+℃+0.0.5℃;pH:7.27.2~7.47.4。④氣體環(huán)境氣體環(huán)境:95%空氣+5%CO2

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