葡萄球菌屬檢驗(yàn)

1、文件編號(hào)：生效日期：20111101文件版本：第一版元謀縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室葡萄球菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件頁(yè)碼：13編寫：常曉林20110910審核：文佳瓊20111111批準(zhǔn)：文佳瓊201111011概述葡萄球菌屬是一類觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性球菌，包括金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌、中間型葡萄球菌等35個(gè)種，17個(gè)亞種。金黃色葡萄球菌是最重要的致病葡萄球菌。2.標(biāo)本類型血液、尿液、腦脊液、穿刺液、膿液等標(biāo)本。3.鑒定3

2、.1形態(tài)與染色革蘭陽(yáng)性球菌，成單、雙、短鏈或不規(guī)則葡萄狀排列。3.2培養(yǎng)特性金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上的典型菌落為金黃色，周圍有明顯的?溶血環(huán)，部分菌落也可呈灰白色或檸檬色。在高鹽甘露醇平板上呈淡橙黃色菌落。表皮葡萄球菌在血瓊脂平板上菌落為白色或檸檬色，多數(shù)不溶血。3.3生化反應(yīng)金黃色葡萄球菌觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖和甘露醇，不分解棉子糖和水楊苷，明膠、血漿凝固酶和DNA酶試驗(yàn)陽(yáng)性，七葉苷試驗(yàn)陰性。3.4鑒別要點(diǎn)3.4.

3、1本菌屬特征革蘭陽(yáng)性球菌，呈葡萄狀排列，觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性。金黃色葡萄球菌在血瓊脂平板上菌落呈金黃色或白色，DNA酶和血漿凝固酶試驗(yàn)均陽(yáng)性，發(fā)酵苷露醇。3.4.2與微球菌屬的鑒別葡萄球菌屬葡萄糖OF試驗(yàn)為發(fā)酵型，鏡下以葡萄狀排列為主，菌體較小，而微球菌屬為氧化型或無(wú)反應(yīng)，鏡下以四聯(lián)排列為主，且菌體較大。3.4.3與鏈球菌屬的鑒別葡萄球菌屬OF試驗(yàn)為發(fā)酵型，觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，鏈球菌屬葡萄糖OF試驗(yàn)為氧化型，觸酶試驗(yàn)陰性。3.4.4凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性葡萄

4、球菌的鑒別見(jiàn)下表1。表1凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌鑒別的關(guān)鍵性試驗(yàn)菌名凝固酶觸酶溶血硝酸鹽海藻糖半乳糖苷酶金黃色葡萄球菌金黃色亞種金黃色葡萄球菌厭氧亞種施氏葡萄球菌聚集亞種ND中間葡萄球菌d海豚葡萄球菌NDS.lutrae豬葡萄球菌d注：“”為90%以上菌株為陽(yáng)性，“”為90%以上菌株為陰性，“d”為11%89%陽(yáng)性，“ND”為無(wú)資料。3.5操作步驟3.5.1涂片、染色觀察菌落特征，在血平板上挑取可疑菌落，涂片染色鏡檢。3.5.2觸酶試驗(yàn)參見(jiàn)《

5、觸酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。3.5.3凝固酶試驗(yàn)參見(jiàn)《凝固酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》。3.5.4鑒定從血瓊脂平板上挑取純菌落，用微生物鑒定儀或傳統(tǒng)生化反應(yīng)進(jìn)行細(xì)菌鑒定。4.藥敏參見(jiàn)《藥物敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》及CLSIM100S20最新版本文件。文件編號(hào)：生效日期：20111101文件版本：第一版元謀縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物室葡萄球菌屬檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件頁(yè)碼：33編寫：常曉林20110910審核：文佳瓊20111111批準(zhǔn)：文佳瓊2011110

6、1參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)[1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì).CNASGL23:2008醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的指南.2008[2]周庭銀編著.臨床微生物學(xué)診斷與圖解.第二版.上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，2007[3]葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜主編.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006[4]MurrayPR.ManualofCinicalMicrobilogy.9thed.Washington:ASM