薄層層析通用顯色劑

1、通用試劑(1)重絡酸鉀硫酸:檢查一般有機物.噴灑劑:5克重絡酸鉀溶于100毫升40%硫酸中.薄層檢查:噴灑后加熱到150℃至班點出現(xiàn)(2)熒光素溴:檢查不飽和化合物噴灑劑:0.1克熒光素溶于100毫升乙醇中溴試劑:5%的溴的四氯化碳溶液噴灑后處理:噴灑熒光素溶液后放置存有溴溶液的缸內可于紫外線分析燈下檢查熒光熒光素與溴化和成曙紅(Eosin)(無螢光)而不飽和化合物則成溴加成物保留了原有熒光若點樣較多則呈黃色斑點底板呈紅色.(3)碘:檢

2、查一般有機物.方法:a層析譜放密閉缸內或瓷盤內，缸內預先放有碘結晶少許，大部分有機化合物呈棕色斑點。B層析譜放碘蒸氣中5分鐘（或噴5％碘的氯仿溶液）取出置空氣中待過量的碘蒸氣全部揮發(fā)后，噴1％淀粉的水溶液，斑點轉成藍色。（4）硫酸：通用噴灑劑：5％的濃硫酸乙醇溶液，或15％濃硫酸正丁醇溶液，或濃硫酸－醋酸（1：1）噴灑后處理：空氣中干燥15分鐘，再熱至110℃直至出現(xiàn)顏色或熒光。（5）硝酸銀－氫氧化銨（TollenZaffaroni）試

3、劑：檢查還原性物質。溶液I:0.1%N硝酸銀溶液II:5N氫氧化銨噴灑劑:I和II以1:5混合(臨用前混合)噴灑后處理:105℃加熱5~10分鐘至深黑色斑點出現(xiàn).(6)磷鉬酸或磷鎢酸硅鎢酸:檢查還原性物質類脂體生物堿甾體噴灑劑:5~10%磷鉬酸或磷鎢酸或硅鎢酸乙醇溶液噴灑后處理:120℃加熱至斑點出現(xiàn).沉淀試劑:1克硅鎢酸溶于20毫升水中加10%鹽酸至強堿性.生物堿(7)硫酸=硫酸:檢查生物堿及含碘化合物噴灑劑:0.1克硫酸混懸于4毫升

4、水中加入1克三氯醋酸加熱至沸逐滴加入濃硫酸至澄清.噴灑后處理:110℃加熱數(shù)分鐘至斑點出現(xiàn).(8)碘化鉍鉀(Dragendff)試劑:檢查生物堿及其他含氟化合物.溶液I:0.85克次硝酸鉍溶于10毫升冰醋酸40毫升水中溶劑II:8克碘化鉀溶于20毫升水中.制備液III等體積混合.可用于棕色瓶中保存較長時間一般制備液可作沉淀試劑用.噴灑液:制備液1毫升與2毫升醋酸10毫升水混合即得(9).碘化汞鉀(Mayer)試劑:檢查生物堿.制備液:1

5、3.55克氯化汞和49.8克碘化鉀各溶于20毫升水中等體積混合并用水稀釋至1000毫升.噴灑液:制備液加110體積的17%鹽酸.噴灑后處理:觀察斑點并于紫外線熒光分析燈下檢出.(10)酸納濃硫酸(Melin)試劑:檢查生物堿.1%酸納的濃硫酸溶液.與多種生物堿呈不同顏色.(11)碘－碘化鉀(Wagner)試劑:檢查生物堿.1克碘及10克碘化鉀溶于50毫升水中加熱加2毫升醋酸再用水稀釋至100毫升.可作紙層板顯色劑液可作沉淀試劑.(24)

6、4二甲氨基苯甲醛醋酸磷酸(E.P.試劑):檢查Azulene及前體Proazulene.噴灑劑:0.25克4二甲氨基苯甲醛溶于50毫升醋酸5克85％磷酸和20毫升水的混合液中(棕色瓶中保存數(shù)月):烴室溫即成藍紫色斑點前體于80℃加熱10分鐘出現(xiàn)藍紫色斑點.(25)氯胺T－三氯醋酸:檢查強心甙.噴灑劑:I.3%氯仿T水溶液新鮮制備.II.25%三氯醋酸乙醇溶液(能保存數(shù)天).10毫升I加40毫升II用前混合.噴灑后處理:110℃加熱7分鐘

7、紫外線熒光分析燈下檢示呈藍色或黃色熒光.(26)亞硝酸基鐵氰化鈉氫氧化鈉(Legal試劑):檢查不飽和內酯甲基酮或活性次甲基常用于強心甙噴灑劑:1克亞硝基鐵氰化鈉溶于100毫升2N氫氧化鈉乙醇(1:1)的水溶液.顯紅色或紫色斑點.(27)35二硝基苯甲酸(Legal試劑):檢查強心甙αβ不飽和內酯.噴灑劑:1克35二硝基苯甲酸溶于50毫升甲醇加入1N氫氧化鉀50毫升.強心甙呈紫紅色斑點.糖類(28)鄰苯二甲基苯胺:檢查還原糖.噴灑劑:0

8、.93克苯氨1.66克鄰苯二甲酸溶于100毫升水飽和的正丁醇中.噴灑后處理:105℃加熱10分鐘.(29)235Triphenyltetrazoliumchlide(T.T.C.)：檢查還原糖及其他還原物質。溶液I：4％（T.T.C.）甲醇溶液；溶液II：1N氫氧化鈉。噴灑液：I，II，臨用前等體積混合。噴灑后處理：100℃加熱5～10分鐘，得紅色斑點。（30）KellerKiliani試劑：檢查α－去氧糖，常用于強心甙。試液：100毫

9、升冰醋酸加三氯化鐵試液0.5毫升混合均勻.試樣1毫克加試液2毫克溶解后沿試官管壁滴入濃硫酸2毫升接觸面即顯棕色漸變淺綠藍色.最后冰醋酸層全部燃呈藍色.(31)13二羥基萘磷酸:檢查糖類.噴灑液:0.2%13二羥基萘(Naphthescinol)乙醇溶液100毫升與10毫升85%磷酸混合.(32)費林溶液(Fehling):檢查還原糖.溶液I:69.3克結晶硫酸銅溶于1000毫升水中.上述二溶液如不清可濾過.臨用前等體積混合.氨基酸(33