沉淀反應(yīng)在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用

1、沉淀反應(yīng)在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用沉淀反應(yīng)在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用可溶性抗原與抗體結(jié)合，在兩者比例合適時(shí)，可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物。在反應(yīng)體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物，這種抗原抗體反應(yīng)稱為沉淀反應(yīng)(precipitionreaction)。沉淀反應(yīng)多用半固體瓊脂凝膠作為介質(zhì)進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散或免疫擴(kuò)散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴(kuò)散，在比例合適處相遇時(shí)形成可見(jiàn)的白色沉淀。(1)單向免疫擴(kuò)散(singleimmunodiffusion)單向免疫擴(kuò)散試

2、驗(yàn)是在凝膠中進(jìn)行的沉淀反應(yīng)。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當(dāng)位置上打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內(nèi)，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴(kuò)散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物體積增加到一定程度時(shí)停止擴(kuò)散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度呈正相關(guān)。取已知量抗原繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，可根據(jù)所形成沉淀環(huán)的直徑，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出待檢標(biāo)本的抗原含量。本方法簡(jiǎn)便，易于觀察結(jié)果，可測(cè)定抗原的靈

3、敏度(最低濃度)約為1020ug／ml。(2)雙向免疫擴(kuò)散(doubleimmunodiffusion)將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴(kuò)散，在相遇處形成沉淀線。若反應(yīng)體系中含兩種以上抗原抗體系統(tǒng)，則小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測(cè)、組成和兩種抗原的相關(guān)性分析。(3)免疫電泳(immunoelectrophesis)先將待檢血清標(biāo)本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組分被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方

4、向平行挖一小槽，加入相應(yīng)抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴(kuò)散，在各區(qū)帶相應(yīng)位置形成沉淀弧。對(duì)照正常血清形成的沉淀弧數(shù)量、位置和形態(tài)，可分析標(biāo)本中所含抗原成分的性質(zhì)和含量。(4)免疫比濁(immunonephelometry)當(dāng)抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見(jiàn)的小免疫復(fù)合物，它可使通過(guò)液體的光束發(fā)生散射，隨著加入的抗原增多，形成的免疫復(fù)合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應(yīng)加強(qiáng)。免疫比濁法(immunonephel

5、omytry)就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，用光散射濁度計(jì)(nephelometry)測(cè)量反應(yīng)液體的濁度，來(lái)推算樣品中的抗原含量。本法敏感、快速簡(jiǎn)便，可取代單向擴(kuò)散法定量測(cè)定免疫球蛋白的濃度。沉淀反應(yīng)在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用沉淀反應(yīng)在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中的應(yīng)用可溶性抗原與抗體結(jié)合，在兩者比例合適時(shí)，可形成較大的不溶性免疫復(fù)合物。在反應(yīng)體系中出現(xiàn)不透明的沉淀物，這種抗原抗體反應(yīng)稱為沉淀反應(yīng)(precipitionrea

6、ction)。沉淀反應(yīng)多用半固體瓊脂凝膠作為介質(zhì)進(jìn)行瓊脂擴(kuò)散或免疫擴(kuò)散。即可溶性抗原與抗體在凝膠中擴(kuò)散，在比例合適處相遇時(shí)形成可見(jiàn)的白色沉淀。(1)單向免疫擴(kuò)散(singleimmunodiffusion)單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn)是在凝膠中進(jìn)行的沉淀反應(yīng)。將抗體混入加熱溶解的瓊脂中，傾注于玻片上，制成含有抗體的瓊脂板，在適當(dāng)位置上打孔，將抗原材料加入瓊脂板的小孔內(nèi)，讓抗原從小孔向四周的瓊脂中擴(kuò)散，與瓊脂中的抗體相遇形成免疫復(fù)合物。當(dāng)復(fù)合物體積增

7、加到一定程度時(shí)停止擴(kuò)散，出現(xiàn)以小孔為中心的圓形沉淀圈，沉淀圈的直徑與加入的抗原濃度呈正相關(guān)。取已知量抗原繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，可根據(jù)所形成沉淀環(huán)的直徑，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中查出待檢標(biāo)本的抗原含量。本方法簡(jiǎn)便，易于觀察結(jié)果，可測(cè)定抗原的靈敏度(最低濃度)約為1020ug／ml。(2)雙向免疫擴(kuò)散(doubleimmunodiffusion)將抗原與抗體分別加于瓊脂凝膠的小孔中，二者自由向四周擴(kuò)散，在相遇處形成沉淀線。若反應(yīng)體系中含兩種以上抗原抗體系統(tǒng)，則

8、小孔間可出現(xiàn)兩條以上沉淀線。本法常用于抗原或抗體的定性檢測(cè)、組成和兩種抗原的相關(guān)性分析。(3)免疫電泳(immunoelectrophesis)先將待檢血清標(biāo)本作瓊脂凝膠電泳，血清中各蛋白組分被分為不同區(qū)帶，然后按電泳方向平行挖一小槽，加入相應(yīng)抗血清，與已分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴(kuò)散，在各區(qū)帶相應(yīng)位置形成沉淀弧。對(duì)照正常血清形成的沉淀弧數(shù)量、位置和形態(tài)，可分析標(biāo)本中所含抗原成分的性質(zhì)和含量。(4)免疫比濁(immunonephe

9、lometry)當(dāng)抗體濃度高，加入少量可溶性抗原，即可形成一些肉眼看不見(jiàn)的小免疫復(fù)合物，它可使通過(guò)液體的光束發(fā)生散射，隨著加入的抗原增多，形成的免疫復(fù)合物也增多，光散射現(xiàn)象也相應(yīng)加強(qiáng)。免疫比濁法(immunonephelomytry)就是在一定的抗體濃度下，加入一定體積的樣品，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，用光散射濁度計(jì)(nephelometry)測(cè)量反應(yīng)液體的濁度，來(lái)推算樣品中的抗原含量。本法敏感、快速簡(jiǎn)便，可取代單向擴(kuò)散法定量測(cè)定免疫球蛋白的濃度。