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文檔簡介
1、,,膜 泡 運 輸,生物工程學院 安 雯,蛋白質分選類型,跨膜轉運膜泡運輸選擇性門控轉運細胞質基質中的蛋白質轉運,膜泡運輸,膜泡運輸是蛋白運輸的一種特有方式,普遍存在于真核細胞中。蛋白質通過不同類型的轉運小泡從糙面內質網合成部位轉運至高爾基體進而分選至細胞的不同部位。轉運過程不僅涉及蛋白本身的修飾、加工和裝配,還涉及到多種不同運輸小泡的定向轉運及膜泡出芽與融合等復雜的調控過程。,三種主要的運輸小泡,①網格蛋白有
2、被小泡 高爾基體TGN 質膜、包內體或溶酶體和植物液泡 ②COPⅡ有被小泡 內質網 高爾基體③COPⅠ有被小泡 回收、轉運內質網逃逸蛋白返回內質網,,,,網格蛋白有被小泡結構,網格蛋白由相對分子質量為180kDa的重鏈和相對分子質量為35~40kDa的輕鏈組成二聚體 。二聚體 三聯(lián)體骨架 六(或五) 邊形網格蛋白亞基 網格蛋白小泡,,,,網格蛋白的結構,形成過程:,
3、● 1、被膜小窩的形成 網格蛋白被膜小窩是網格蛋白小泡形成過程中的一個中間體。在胞吞過程中, 吞入物(配體)先同膜表面特異受體結合, 然后網格蛋白裝配的亞基結合上去, 使膜凹陷成小窩狀。由于這種小窩膜外側結合有許多網格蛋白, 故稱為網格蛋白被膜小窩。,● 網格蛋白小泡的形成 在形成了網格蛋白被膜小窩之后, 很快通過出芽的方式形成小泡,即網格蛋白小泡,小泡須在發(fā)動蛋白的作用下與質膜割離。由于此時的小泡外面有網格蛋白包被, 故稱為
4、被膜小泡?!?無被小泡的形成 網格蛋白小泡形成之后, 很快脫去網格蛋白的外被, 成為無被小泡。在真核細胞中有一種分子伴侶Hsc70催化披網格蛋白小泡的外被去聚合形成三腿復合物, 并重新用于披網格蛋白小泡的裝配。,網格蛋白小泡的形成過程,在高爾基體TGN區(qū)網格蛋白有被小泡形成的示意圖,COPⅡ有被小泡,具有對轉運物質的選擇性并使之濃縮。原因: ①能識別并結合跨膜內質網蛋白胞質面一端的信號序列; ②跨膜內質網蛋白的腔面一端
5、作為受體與ER腔中的可溶性蛋白(如分泌蛋白)結合。,Sar蛋白,是一種小的GTP結合蛋白,作為分子開關起調節(jié)作用,主要是調節(jié)膜泡包被的裝配與去裝配。當GDP被GTP取代,則激活Sar蛋白并導致它與內質網結合,同時引發(fā)其它包被蛋白組分在ER膜上裝配、出芽,隨即形成COPⅡ有被小泡 。,,COP I有被小泡,內質網向高爾基體輸送運輸小泡時,一部分自身的蛋白質也不可避免的被運送到了高爾基體,如不進行回收則內質網因為磷脂和某些蛋白質的匱乏而停
6、止工作。內質網通過兩種機制維持蛋白質的平衡 :一是轉運泡將應被保留的駐留蛋白排斥在外,例如有些駐留蛋白參與形成大的復合物,因而不能被包裝在出芽形成的轉運泡中,結果被保留下來;二是通過對逃逸蛋白的回收機制,使之返回它們正常駐留的部位。,內質網的正常駐留蛋白,它們在C端含有一段回收信號序列,如果它們被意外地逃逸進入轉運泡從內質網運至高爾基體cis面,則cis面的膜結合受體蛋白將識別并結合逃逸蛋白的回收信號,形成COPI衣被小泡將它們返回內
7、質網。內質網腔中的蛋白,如蛋白二硫鍵異構酶和協(xié)助折疊的分子伴侶,均具有典型的回收信號Lys-Asp-Glu-Leu(KDEL)。內質網的膜蛋白(如SRP受體)在C端有一個不同的回收信號,通常是Lys-Lys-X-X(KKXX,X:任意氨基酸),同樣可保證它們的回收。,KDEL序列 引自Molecular Biology of the Cell. 4th ed. 2002,膜泡運輸的定向機制,選擇性融合是保證細胞內定向膜流的因素之一。
8、各類運輸小泡之所以能夠被準確地和靶膜融合,是因為運輸小泡表面的標志蛋白能被靶膜上的受體識別,其中涉及識別過程的兩類關鍵性的蛋白質是SNAREs(soluble NSF attachment protein receptor)和Rabs(targeting GTPase)。其中SNARE介導運輸小泡特異性停泊和融合,Rab的作用是使運輸小泡靠近靶膜。,SNAREs,SNAREs的作用是保證識別的特異性和介導運輸小泡與目標膜的融合,位于運
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