油菜葉際微生物多樣性及其對敵敵畏的降解.pdf

1、植物的葉際存在多種類型的微生物,包括不同種類的細(xì)菌、絲狀真菌、酵母和藻類。這些葉際微生物是植物生態(tài)系統(tǒng)中的重要組成部分,發(fā)揮著重要的生態(tài)功能。伴隨著各種農(nóng)藥廣泛應(yīng)用于控制植物的病蟲害,其殘留問題越來越受到關(guān)注,農(nóng)藥殘留的生物降解越來越受到重視。關(guān)于葉際微生物的多樣性及其對農(nóng)藥殘留的降解作用鮮見報(bào)道。
　　 本文采用傳統(tǒng)的微生物分離培養(yǎng)方法調(diào)查了油菜葉際可培養(yǎng)微生物的多樣性,并檢測了這些微生物對敵敵畏的降解能力,采用分子生物學(xué)方法

2、對細(xì)菌進(jìn)行了初步鑒定和系統(tǒng)發(fā)育分析。獲得主要結(jié)果如下:
　　 1)從稀釋平板法計(jì)數(shù)結(jié)果表明,油菜的葉際上存在著大量的微生物,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上為5.3×105CFU·g-1鮮葉片、馬丁氏培養(yǎng)基上為2.9×103CFU·g-1鮮葉片,和改良高氏Ⅰ號上的為5.9×104 CFU·g-1鮮葉片。在三種培養(yǎng)基上細(xì)菌總數(shù)分別為5.2×105CFU·g-1鮮葉片和8.7×102CFU·g-1鮮葉片和3.8×104CFU·g-1鮮葉片,占微

3、生物總量的94％。
　　 2)從三種培養(yǎng)基上分離出細(xì)菌60株,真菌54株,并對細(xì)菌16S rDNA序列進(jìn)行了分析。16S rDNA序列分析表明,油菜葉際具有較為豐富的可培養(yǎng)細(xì)菌種群,最終分離獲得36株菌落形態(tài)各異的細(xì)菌。主要包括厚壁菌門(Firmicutes,16株)、變形菌門(Proteobacteria,14株)、放線菌門(Actinobacteria,4株)和擬桿菌門/綠菌門(Bacteroidetes/Chlorobi

4、group,2株)；其中,芽孢桿菌屬(Bacillus)為優(yōu)勢菌屬,占菌株總數(shù)的35％。
　　 3)從油菜葉面上篩選得到2株能夠高效降解敵敵畏的細(xì)菌,命名為N20和N2。這些菌經(jīng)16S rDNA序列分析和系統(tǒng)發(fā)育分析,鑒定為Bacillus cereus和Janibacter sp.,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,對敵敵畏的降解率24 h內(nèi)可達(dá)80％以上。
　　 4)研究了一株從土壤中分離、篩選的類球紅細(xì)菌(編號為EBL070