秦皇島海水浴場(chǎng)水體細(xì)菌多樣性研究.pdf

1、海洋細(xì)菌在海洋生態(tài)系統(tǒng)中扮演著極為重要的角色，海洋中各種循環(huán)和能量流動(dòng)、有機(jī)物質(zhì)的合成和分解等都離不開細(xì)菌的參與。海水浴場(chǎng)作為一種旅游資源，浴場(chǎng)水體環(huán)境質(zhì)量，尤其是水中細(xì)菌及致病菌的含量對(duì)旅游者的旅游體驗(yàn)、身體健康、甚至生命安全都有著十分重要的影響。所以，研究海水浴場(chǎng)水體中細(xì)菌群落的組成和多樣性具有十分重要的意義。
　　本研究以秦皇島市的東山浴場(chǎng)、老虎石浴場(chǎng)、南戴河浴場(chǎng)、西浴場(chǎng)四個(gè)浴場(chǎng)為研究對(duì)象，分別于2014年6月-2015年4

2、月期間進(jìn)行了樣品采集工作，并采用傳統(tǒng)平板培養(yǎng)和熒光定量 PCR技術(shù)相結(jié)合的方法研究分析了這四個(gè)浴場(chǎng)海水中細(xì)菌群落的多樣性和季節(jié)變化。
　　秦皇島四個(gè)海水浴場(chǎng)水體中的細(xì)菌總數(shù)的變化會(huì)受到溫度、降雨、游客數(shù)量等因素的影響，同時(shí)細(xì)菌總數(shù)的驟增還可能與浴場(chǎng)附近排污口集中排污有關(guān)，所以細(xì)菌總數(shù)的峰值主要出現(xiàn)在夏季高溫時(shí)、降雨后、游客數(shù)多時(shí)以及浴場(chǎng)周邊排污口大量排污時(shí)段。
　　可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性的分析結(jié)果表明：秦皇島四個(gè)浴場(chǎng)夏季海水中可培

3、養(yǎng)細(xì)菌主要分屬于變形菌門（α-、β-、γ-變形菌綱）、厚壁菌門（芽孢桿菌綱）、擬桿菌門（黃桿菌綱）和放線菌門（放線菌綱），在門（綱）水平上的細(xì)菌結(jié)構(gòu)差異不大。序列比對(duì)后發(fā)現(xiàn)這四個(gè)浴場(chǎng)海水中存在大量大腸桿菌、副溶血弧菌、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌、溶藻弧菌等致病菌。此外，這四個(gè)浴場(chǎng)海水中還有一部分細(xì)菌為Unclassified類群，說(shuō)明秦皇島海水浴場(chǎng)水體中依然存在很多未知的海洋新種，值得進(jìn)行進(jìn)一步研究探索。
　　實(shí)時(shí)熒光定量 PCR實(shí)

4、驗(yàn)的定量結(jié)果顯示，與海洋中碳、氮、硫循環(huán)密切相關(guān)的α-變形菌綱、藍(lán)細(xì)菌門、擬桿菌門和厚壁菌門類群細(xì)菌的豐度在考察的兩個(gè)浴場(chǎng)中均表現(xiàn)為夏季時(shí)最高，此時(shí)海水溫度較高，細(xì)菌新陳代謝活動(dòng)旺盛，生長(zhǎng)繁殖較快，所以豐度較高；β-變形菌綱和放線菌門類群細(xì)菌的豐度在老虎石浴場(chǎng)表現(xiàn)為冬季時(shí)最高，推測(cè)可能受到了老虎石浴場(chǎng)周圍排污口冬季集中排污的影響。通過(guò)對(duì)東山浴場(chǎng)和老虎石浴場(chǎng)四個(gè)季節(jié)各菌門（綱）豐度變化的分析發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌群落構(gòu)成和豐度會(huì)隨季節(jié)變化而發(fā)生一定變

5、化。
　　基于可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性的研究結(jié)果，對(duì)秦皇島四個(gè)海水浴場(chǎng)水體中大腸桿菌、副溶血弧菌、蠟樣芽胞桿菌三種優(yōu)勢(shì)致病菌進(jìn)行了研究。快速檢測(cè)方法建立在特異性顯色培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，選擇通過(guò)用滅菌海水來(lái)配制使其營(yíng)養(yǎng)環(huán)境更接近海水條件，從而使計(jì)數(shù)結(jié)果更可靠。通過(guò)對(duì)這三種致病菌的長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)浴場(chǎng)海水中大腸桿菌和副溶血弧菌數(shù)量表現(xiàn)為夏秋季（旅游高峰期）較高，冬春季較低，其變化與溫度和游客數(shù)量有關(guān)；而蠟樣芽孢桿菌數(shù)量表現(xiàn)為夏冬兩季較多，春秋兩季較

6、少，除了受溫度調(diào)控外，其冬季數(shù)量變化可能是受周圍排污口排污的影響更大；此外，降雨也是影響這三種致病菌數(shù)量的因素之一，在降雨后，三種致病菌數(shù)量均產(chǎn)生了不同程度的增長(zhǎng)。
　　基于研究結(jié)果，建議秦皇島海水浴場(chǎng)相關(guān)管理部門將細(xì)菌總數(shù)、大腸桿菌、副溶血弧菌、蠟樣芽孢桿菌的監(jiān)測(cè)加入到日常監(jiān)測(cè)中，并加強(qiáng)雨后對(duì)海水浴場(chǎng)致病菌污染情況的監(jiān)測(cè)，在旅游高峰期（主要是夏季及秋季初期）適當(dāng)控制浴場(chǎng)游客數(shù)量，同時(shí)嚴(yán)格控制浴場(chǎng)周圍排污口排污，通過(guò)這些舉措進(jìn)一步