梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測

1、張國軍（首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心）張國軍（首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京天壇醫(yī)院實(shí)驗(yàn)診斷中心）寫在課前的話寫在課前的話梅毒是一種慢性、系統(tǒng)性疾病。學(xué)員通過本課件的學(xué)習(xí)，要熟悉梅毒的定義、傳播途徑及臨床分期；掌握不同時(shí)期梅毒的治療方法；掌握梅毒實(shí)驗(yàn)室檢測方法和梅毒免疫學(xué)反應(yīng)；掌握梅毒血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的原理、特點(diǎn)及各自優(yōu)缺點(diǎn)；掌握先天性梅毒和神經(jīng)梅毒的診斷方法。一梅毒概況及臨床分期一梅毒概況及臨床分期梅毒是由梅毒螺旋體引起的一種慢性、系統(tǒng)性

2、性傳播疾病。人體受感染后，螺旋體很快播散到全身，可侵犯全身各組織與器官，臨床表現(xiàn)多樣，且時(shí)隱時(shí)顯，病程較長。梅毒早期主要侵犯皮膚及粘膜，晚期除侵犯皮膚、粘膜外，還可侵犯心臟血管系統(tǒng)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)等全身各個(gè)系統(tǒng)；另一方面，梅毒又可多年無癥狀而呈潛伏狀態(tài)。主要傳播途徑:性接觸傳染是最主要的傳播方式；其次是垂直傳播。隨著梅毒在人群中流行率升高，母嬰垂直傳播發(fā)生率日益上升，并伴隨著包括診斷、治療、阻斷等在內(nèi)的一系列問題；第三，輸血傳播。輸血傳播

3、曾經(jīng)是梅毒重要的傳播方式。但隨著血液篩查的廣泛開展及輸血的減少，梅毒經(jīng)輸血傳播已很少發(fā)生。但近年來，由于艾滋病的流行，梅毒仍然是輸血安全的威脅。臨床分期：一期梅毒：主要表現(xiàn)為單個(gè)、無痛性的硬下疳，通常在感染梅毒螺旋體后34周出現(xiàn)；二期梅毒：一期梅毒不經(jīng)治療，梅毒螺旋體在幾周到幾個(gè)月后會(huì)播散到血液中，引起二期梅毒。二期梅毒的臨床表現(xiàn)多樣，常見發(fā)熱、淋巴結(jié)病、彌漫性皮疹、生殖道或會(huì)陰濕疣等。一、二期梅毒統(tǒng)稱為早期數(shù)量以及口腔、肛門破損處存在

4、的非致病性螺旋體等因素的影響。鍍銀染色法：與暗視野檢查法的臨床意義基本相同。該法利用梅毒螺旋體具有親銀性，可被銀溶液染成棕黑色，再通過普通高倍顯微鏡進(jìn)行觀察。直接免疫熒光法（DFA）：是目前國外采用較多的方法，其特異性及敏感性均優(yōu)于暗視野顯微鏡檢查法。將特異性的抗梅毒螺旋體單克隆抗體用熒光素標(biāo)記，如果標(biāo)本中存在梅毒螺旋體，則通過抗原抗體特異性結(jié)合，在熒光顯微鏡下可見到發(fā)蘋果綠色的梅毒螺旋體。此法可區(qū)分梅毒螺旋體和其他非致病性或條件致病性

5、螺旋體。聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：能對生殖器潰瘍進(jìn)行早期鑒別診斷，區(qū)分梅毒、生殖器皰疹和軟下疳。它又可分為PCR和RTPCR。PCR的設(shè)計(jì)主要針對編碼梅毒螺旋特異性抗原和TpN47的DNA開放編碼區(qū)，常見的引物有K03A、K04、471、472、473、474等。由于在PCR中會(huì)偶然出現(xiàn)非特異的PCR產(chǎn)物而干擾結(jié)果，因此必須用特異性DNA探針進(jìn)行DNADNA雜交來提高PCR的特異性及敏感性。此外，由于TpN47的保守性，雅司螺旋體可產(chǎn)生類

6、似的PCR產(chǎn)物，所以這種設(shè)計(jì)的PCR不能區(qū)分梅毒和雅司；但可以區(qū)分梅毒螺旋體和引博氏疏螺旋體，這就可以解決梅毒與萊姆病之間血清診斷中的免疫交叉的問題。另外一種是RTPCR，常見的設(shè)計(jì)是針對梅毒螺旋體的16srRNA366bp片段，這種方法污染少，特異性敏感性都比較高，但價(jià)格也較高。PCR在梅毒持續(xù)感染中的診斷價(jià)值目前還沒有一致的意見，理論上講PCR可以查出死亡的TP，所以治療后PCR陽性并不意味著治療失敗，但死亡的TP從機(jī)體內(nèi)清除比較快