現(xiàn)代分子生物學(xué)試題及答案

1、現(xiàn)代分子生物學(xué)習(xí)題及答案現(xiàn)代分子生物學(xué)習(xí)題及答案一、填空題1基因工程是70年代發(fā)展起來(lái)的遺傳學(xué)的一個(gè)分支學(xué)科。2基因工程的兩個(gè)基本特點(diǎn)是：(1)分子水平上的操作分子水平上的操作，(2)細(xì)胞水平上的表達(dá)細(xì)胞水平上的表達(dá)3基因克隆中三個(gè)基本要點(diǎn)是：克隆基因的類(lèi)型克隆基因的類(lèi)型；受體受體的選擇；載體的選擇的選擇；載體的選擇4通過(guò)比較用不同組合的限制性?xún)?nèi)切核酸酶處理某一特定基因區(qū)域所得到的不同大小的片段，可以構(gòu)建顯示該區(qū)域各限制性?xún)?nèi)切核酸酶切點(diǎn)

2、相互位置的限制性酶切圖譜限制性酶切圖譜。5限制性?xún)?nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個(gè)大寫(xiě)字母取自屬名的第一個(gè)字母，第二、三兩個(gè)字母取自_種名的前兩個(gè)字母，第四個(gè)字母則用株名表示。6部分酶切可采取的措施有：(1)減少酶量；(2)縮短反應(yīng)時(shí)間；(3)增大反應(yīng)體積等。7第一個(gè)分離的限制性?xún)?nèi)切核酸酶是EcoK；而第一個(gè)用于構(gòu)建重組體的限制性?xún)?nèi)切核酸酶是_Ecl。8限制性?xún)?nèi)切核酸酶BsuRI和HaeⅢ的來(lái)源不同，但識(shí)別的序列都是GG

3、CC，它們屬于異源同工酶。9DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性：(1)53合成酶的活性；(2)35外切核酸酶的活性。10為了防止DNA的自身環(huán)化，可用堿性磷酸酶去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團(tuán)。11EGTA是_Ca2_離子螯合劑。12測(cè)序酶是修飾了的T7DNA聚合酶，它只有_53合成酶的活性，而沒(méi)有35外切酶的活性。13切口移位(nicktranslat

4、ion)法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用DNA聚合酶I的__5一3外切核酸酶和5一3合成酶24野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是沒(méi)有合適的限制性?xún)?nèi)切核酸酶識(shí)別位點(diǎn)和選擇標(biāo)記。25黏粒(cos)是質(zhì)?！删w雜合載體，它的復(fù)制子來(lái)自質(zhì)粒、COS位點(diǎn)序列來(lái)自?噬菌體，最大的克隆片段達(dá)到45kb。26野生型的?噬菌體DNA不宜作為基因工程載體，原因是：(1)分子量大，(2)酶的多切點(diǎn)，(3)無(wú)選擇標(biāo)記27噬菌粒是由質(zhì)粒和噬菌體DN

5、A共同構(gòu)成的，其中來(lái)自質(zhì)粒的主要結(jié)構(gòu)是復(fù)制區(qū)，而來(lái)自噬菌體的主要結(jié)構(gòu)是IG區(qū)。28?噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長(zhǎng)度應(yīng)在噬菌體基因組的75％～105％的范圍內(nèi)。29在分離DNA時(shí)要使用金屬離子螯合劑，如EDTA和檸檬酸鈉等，其目的是螯合Mg2離子，抑制核酸酶的活性。30用乙醇沉淀DNA時(shí)，通常要在DNA溶液中加人單價(jià)的陽(yáng)離子，如NaCl和NaAc，其目的是中和DNA分子的負(fù)電荷，增加DNA分子間的凝聚力。31

6、引物在基因工程中至少有4個(gè)方面的用途：(1)合成探針；(2)合成cDNA；(3)用于PCR反應(yīng)；(4)進(jìn)行序列分析32Clark發(fā)現(xiàn)用TaqDNA聚合酶得到的PCR反應(yīng)產(chǎn)物不是平末端，而是有一個(gè)突出堿基末端的雙鏈DNA分子。根據(jù)這一發(fā)現(xiàn)設(shè)計(jì)了克隆PCR產(chǎn)物的T—載體。33在cDNA的合成中要用到S1核酸酶，其作用是切除在第二鏈合成時(shí)形成的發(fā)夾環(huán)34乙醇沉淀DNA的原理是乙醇使DNA分子脫水。35假定克隆一個(gè)編碼某種蛋白質(zhì)的基因，必須考慮