液相色譜常見問題及處理方法

1、液相色譜常見問題及處理方法HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法1、樣品量不足，解決辦法為增加樣品量2、樣品未從柱子中流出?？筛鶕?jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子3、樣品與檢測器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器4、檢測器衰減太多。調(diào)整衰減即可。5、檢測器時間常數(shù)太大。解決辦法為降低時間參數(shù)6、檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。7、檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。8、記錄儀測壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。9、流動相流量不合適。

2、調(diào)整流速即可。10、檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。為什么HPLC柱柱壓過高柱壓過高是HPLC柱用戶最常碰到的問題。其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的問題，您可按下面步驟檢查問題的起因。1、拆去保護預(yù)柱，看柱壓是否還高，否則是保護柱的問題，若柱壓仍高，再檢查；2、把色譜柱從儀器上取下，看壓力是否下降，否則是管路堵塞，需清洗，若壓力下降，再檢查；3、將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上，用10倍柱體

3、積的流動相沖洗柱子，（此時不要連接檢測器，以防固體顆粒進(jìn)入流動池）。這時，如果柱壓仍不下降，再檢查；4、更換柱子入口篩板，若柱壓下降，說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì)，正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高，請與廠商聯(lián)系。一般情況下，在進(jìn)樣器與保護柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題，SGE提供的Rheodyne7315型過濾器就是解決這一問題的最佳選擇。h.柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時；用中等強度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改

4、流動相時，在分析前用1020倍體積的新流動相對柱子進(jìn)行沖洗。3、接頭處為何經(jīng)常漏液，如何處理？答：接頭沒有擰緊；擰松后再緊，手緊接頭以手勁為限，不要使用工具，不銹鋼接頭先用手?jǐn)Q緊，再用專用扳手緊1412圈，注意接頭中的管路一定要通到底，否則會留下死體積。接頭被污染或磨損；建議更換接頭。接頭不匹配，建議使用同一品牌的配件。4、進(jìn)樣閥漏液是如何造成的？答：a.轉(zhuǎn)子密封損壞；更換轉(zhuǎn)子密封b.定量環(huán)阻塞；清洗或更換定量環(huán)c.進(jìn)樣口密封松動；調(diào)整

5、松緊度d.進(jìn)樣針頭尺寸不合適，一般是過短；使用恰當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣針（注意針頭形狀）e.廢液管中產(chǎn)生虹吸；清空廢液管譜圖問題1、問：造成峰拖尾的原因是什么，如何消除？答：a.篩板阻塞；反沖色譜柱、更換進(jìn)口篩板b.色譜柱塌陷；填充色譜柱c.有干擾物質(zhì)的存在；使用更長的色譜柱、改變流動相或更換色譜柱e.流動相PH值不合適；調(diào)整PH值，對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰f.樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應(yīng)；加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑或更改色