快速繁殖資料

1、園林植物快繁技術(shù)說明?試題題型與題量?比較題：5個(gè)小題，每小題6分，共30分。?簡述題：5個(gè)小題，每小題8分，共40分。?論述題：2個(gè)小題，每小題15分，共30分。?考試范圍?全書?其他問題?考試時(shí)間2小時(shí)?滿分為100，及格分為60分?考試時(shí)無需帶工具緒論1、植物離體培養(yǎng)是指通過無菌操作，使植物體的各類結(jié)構(gòu)材料(外植體)，接種于人工配制的培養(yǎng)基上，在人工控制的環(huán)境條件下，進(jìn)行離體培養(yǎng)的一套技術(shù)與方法，通常稱之為植物組織培養(yǎng)或植物的細(xì)胞

2、與組織培養(yǎng)。2、離體培養(yǎng)技術(shù)體系?胚胎培養(yǎng)及以胚胎為基礎(chǔ)的培養(yǎng)技術(shù)?器官及器官原基培養(yǎng)?組織培養(yǎng)?細(xì)胞培養(yǎng)?原生質(zhì)體培養(yǎng)及以原生質(zhì)體為基礎(chǔ)的培養(yǎng)技術(shù)第一章離體培養(yǎng)的基本操作方法1、外植體植物離體培養(yǎng)中的各種接種材料。包括植物體的各個(gè)器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體等。2、外植體的選擇?選擇優(yōu)良的種質(zhì)?選擇健壯的植株?選擇外植體的大小?選取外植體的時(shí)期?選擇細(xì)胞培養(yǎng)材料3、培養(yǎng)材料的處理?母株的預(yù)處理?外植體休眠期的處理?外植體的滅菌4、培養(yǎng)基

3、外植體生長的營養(yǎng)物質(zhì)，通常有兩個(gè)水平，一是基本培養(yǎng)基，包括大量元素和微量元素、維生素和氨基酸，還有糖和水。二是完全培養(yǎng)基，即在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，附加各種植物生長調(diào)節(jié)劑以及其它的復(fù)雜有機(jī)附加物。5、固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基的比較?固體培養(yǎng)基?設(shè)備簡單，使用方便?狹義：包括形成層組織、分生組織、表皮組織、薄壁組織和各種器官組織，以及其培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織的培養(yǎng)。3、莖尖培養(yǎng)其含義較廣，包括小的僅10—100um的莖尖分生組織，大的幾十毫米的莖

4、尖或更大的芽的培養(yǎng)，前者主要用于無病毒苗的培養(yǎng)，后者用于無性系快速繁殖。4、花藥培養(yǎng)5、花粉培養(yǎng)第四章細(xì)胞培養(yǎng)1、成批培養(yǎng)是把細(xì)胞接種到一個(gè)與外界隔絕的只允許氣體和揮發(fā)性的代謝物質(zhì)交換的，營養(yǎng)液體體積保持不變的密閉系統(tǒng)中培養(yǎng)。2、連續(xù)培養(yǎng)是用一定容積的但非密閉的反應(yīng)器來進(jìn)行的，在培養(yǎng)過程中不斷注入新鮮培養(yǎng)基，而使其營養(yǎng)物質(zhì)連續(xù)得到補(bǔ)充，細(xì)胞的生長和增殖連續(xù)進(jìn)行。它可分為開放式連續(xù)培養(yǎng)和封閉式連續(xù)培養(yǎng)。3、固相化細(xì)胞把細(xì)胞固定在一種墮性基

5、質(zhì)，如瓊脂、藻酸鹽、纖維或膜上面或里面，細(xì)胞不能運(yùn)動(dòng)，而營養(yǎng)液可以在細(xì)胞間流動(dòng)，供應(yīng)其營養(yǎng)。4、單細(xì)胞培養(yǎng)也稱單細(xì)胞克隆技術(shù)，它不是指培養(yǎng)的只有單個(gè)細(xì)胞，而是指接種的細(xì)胞群體中，不存在懸浮培養(yǎng)中所可能存在的小細(xì)胞團(tuán)，而是純粹的單細(xì)胞。各單離細(xì)胞不僅僅只留在增殖階段，它可被誘導(dǎo)再分化，形成完整植株。第五章原生質(zhì)培養(yǎng)與融合1、游離原生質(zhì)體的一般技術(shù)程序?植物材料稱重約05g，常規(guī)方法滅菌、無菌水沖洗5遍，在無菌條件下把其搞碎，稱重后放入中6

6、cm的培養(yǎng)皿，搞碎。?把預(yù)先配制好的5ml酶混合液經(jīng)孔徑為0.2um的過濾器過濾入培養(yǎng)皿。?用石蠟封住培養(yǎng)皿后，放在轉(zhuǎn)速為30轉(zhuǎn)／min、25—30℃，微光或黑暗條件下保育幾小時(shí)或過夜。?用倒置顯微鏡檢查原生質(zhì)體游離效果，確定保育處理時(shí)間。?把游離效果已達(dá)要求的酶——原生質(zhì)體混合液在無菌條件下經(jīng)孔徑為45um左右的尼龍網(wǎng)過濾，濾去消解不完全的組織碎塊和細(xì)胞團(tuán)。?已過濾的混合液以60—100g重力離心3—5min。?棄去上清液，原生質(zhì)體用

7、滲透壓穩(wěn)定劑再稀釋，反復(fù)離心三次。在倒置顯微鏡下檢查純化效果，若效果好，最后一遍用原生質(zhì)體培養(yǎng)基離心。?若純化效果不好，可用20％的蔗糖離心，使完整的原生質(zhì)浮于液面，雜質(zhì)沉于離心管底，也可用界面法收集。?計(jì)算原生質(zhì)體的產(chǎn)率和原生質(zhì)體活力測定2、原生質(zhì)體融合也稱體細(xì)胞雜交，就是使分離下來的不同親本的原生質(zhì)體之間在人工控制的條件下，像性細(xì)胞受精作用那樣互相融合為一體。第六章細(xì)胞全能性及其營養(yǎng)代謝1、植物細(xì)胞全能性植物細(xì)胞具有該植物有機(jī)體的全