環(huán)境水體中典型抗生素的毛細管電泳高靈敏分析方法研究.pdf

1、近年來，環(huán)境中抗生素殘留的污染，由于其可能引起的各類生態(tài)危害，以及造成細菌耐藥性的增強，危害人類健康，逐漸受到人們的廣泛關(guān)注。根據(jù)報道，在我國的各種環(huán)境介質(zhì)，包括土壤、污泥、地表水、地下水等均檢出了抗生素殘留。本文以環(huán)境水體中最常檢出的氟喹諾酮和磺胺類兩類抗生素作為目標(biāo)物，采用配備光電二極管陣列檢測器（PDA）的毛細管電泳（Capillary Electrophoresis, CE-UV）對七種抗生素進行同時分析檢測。CE技術(shù)的分離效率

2、高、試劑使用量較少，但配備紫外檢測器，其檢測靈敏度不能達到環(huán)境水體中痕量抗生素的檢測要求。為了提高方法的靈敏度，開發(fā)了PAEKI在柱富集技術(shù)，并結(jié)合固相萃取（SPE）技術(shù)，消除環(huán)境水樣中的雜質(zhì)干擾，富集待測抗生素。將此方法用于環(huán)境水樣分析，可作為考察環(huán)境水體中抗生素殘留的一種重要技術(shù)。
　　第一章先概述了目前抗生素的生產(chǎn)、使用情況，主要臨床和獸藥抗生素的種類，環(huán)境中抗生素的殘留對生物和人類健康可能產(chǎn)生的危害，環(huán)境水體中主要殘留抗生

3、素的種類及分析方法。介紹了本課題使用的毛細管電泳技術(shù)的各種分離模式和在柱富集技術(shù)，以及目前用于環(huán)境水體抗生素分析的研究，總結(jié)了環(huán)境水樣幾種主要的前處理方法，著重介紹固相萃取方法及其優(yōu)勢，最后簡述了本課題研究的內(nèi)容和意義。
　　第二章開發(fā)了配備紫外檢測器的毛細管區(qū)帶電泳（CZE-UV）對七種抗生素（氧氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、諾氟沙星、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺嘧啶）的分離分析方法，在電泳緩沖溶液中添加不同濃度的甲基-β-環(huán)糊

4、精進行優(yōu)化實驗，利用其與各種抗生素之間結(jié)合形成包合物改變電泳淌度，實現(xiàn)七種抗生素的基線分離。對該電泳分析方法做了線性、重現(xiàn)性的驗證，方法的檢測限在0.20~0.40 mg/L。將優(yōu)化的電泳方法運用于實際水樣分析（自來水、鏡月湖水、醫(yī)院附近河水樣），未檢出抗生素殘留，證明這三種水體中的抗生素殘留量在0.40 mg/L以下。
　　第三章對比了壓力進樣(HDI)、電動進樣(EKI)、壓力輔助電動進樣(PAEKI)三種進樣方式對七種抗生素

5、的檢測靈敏度。結(jié)果表明，EKI模式相對HDI模式，靈敏度有較大提高，檢測限在5.39~11.77μg/L，富集效果是HDI的27~71倍，而PAEKI可進一步提高靈敏度，其檢測限最低達到了μg/L級(1.96~4.06μg/L)，富集效果最好，相較HDI提高了86~129倍；對PAEKI進樣富集方法做了線性、重現(xiàn)性的驗證，將優(yōu)化的電泳在柱預(yù)濃縮方法運用于實際水樣分析（自來水、鏡月湖水、醫(yī)院附近河水樣），未檢測出抗生素殘留。
　　第

6、四章采用固相萃取(SPE)技術(shù)對環(huán)境水樣進行前處理，消除基質(zhì)干擾，實現(xiàn)七種抗生素的富集和凈化。對比三種固相萃取小柱對七種抗生素的萃取效果（回收率），Waters Oasis HLB萃取效果最佳。再對萃取條件（萃取溶液的滴速、洗脫溶劑的種類、體積、流速等） 進行優(yōu)化，對加標(biāo)環(huán)境水樣（加入的7種抗生素的濃度分別為0.01 mg/L）富集，回收率在50％以上。將此固相萃取技術(shù)用于自來水、鏡月湖水、醫(yī)院附近河水樣中抗生素的富集，并結(jié)合