牛瘤胃中纖維素降解菌的分離鑒定及對玉米秸稈發(fā)酵效果的研究.pdf

1、農(nóng)作物秸稈是一種潛在的非競爭性資源,具有數(shù)量大、分布廣、種類多的特點(diǎn)。目前,在全球資源和糧食緊缺的今天,發(fā)展秸稈畜牧業(yè)具有重大的生態(tài)價值和經(jīng)濟(jì)價值。本研究以牛的瘤胃內(nèi)容物作為微生物的來源,以期獲得優(yōu)良的纖維素酶高產(chǎn)菌株,來最大限度地開發(fā)和利用秸稈資源,解決人畜爭糧問題,促進(jìn)我國畜牧業(yè)的發(fā)展。本研究主要包括如下四部分內(nèi)容:
　　 試驗(yàn)一:經(jīng)選擇性培養(yǎng)基初篩、纖維素剛果紅培養(yǎng)基鑒別和固體發(fā)酵培養(yǎng)復(fù)篩,篩選出一株的纖維素酶活相對較高,

2、并且能提高玉米秸稈中還原糖和可溶性蛋白含量的菌株(No.3)。其羧甲基纖維素酶活和濾紙?zhí)敲富罘謩e達(dá)到6.01U/g和1.15U/g。經(jīng)形態(tài)特征觀察和26SrDNAITS區(qū)序列分析確定其為米曲霉(Aspergillusoryzae)。
　　 試驗(yàn)二:本研究將從牛瘤胃內(nèi)容物中篩選出的纖維素酶高產(chǎn)菌株米曲霉用于玉米秸稈固態(tài)發(fā)酵,對其發(fā)酵效果及酶學(xué)特性進(jìn)行分析。結(jié)果顯示:該菌所產(chǎn)纖維素酶的最適pH為5.5～6.0,在4.0～6.0范圍內(nèi)

3、穩(wěn)定性較好:最適溫度為50℃,在30℃～50℃區(qū)間穩(wěn)定性較好。CaCl2和MnSO4對纖維素酶活表現(xiàn)出顯著的促進(jìn)作用。FeSO4和NaCl對纖維素酶活表現(xiàn)出強(qiáng)抑制作用。KH2PO4、MgSO4、ZnCl2、CoCl2對濃度范圍要求嚴(yán)格,并且對不同纖維素酶活表現(xiàn)出的作用不同。與發(fā)酵前相比,發(fā)酵后的玉米秸稈中還原糖和可溶性蛋白含量分別提高123.53％和48.98％(P<0.05)；纖維素和半纖維素的降解率分別為25.01％和45.99％(

4、P<0.05)。這表明該菌株具有較高的應(yīng)用價值,可以作為開發(fā)和利用農(nóng)作物秸稈的優(yōu)良菌株。
　　 試驗(yàn)三:通過研究不同發(fā)酵條件對玉米秸稈發(fā)酵效果的影響,以確定米曲霉最適發(fā)酵條件。試驗(yàn)結(jié)果顯示,以10％的復(fù)合飼料添加量(P>0.05),1％接種量(P>0.05),1:1.5的料水比(P>0.05),粉碎粒度1～2cm(P<0.05),固體發(fā)酵3d(P<0.05)為最佳發(fā)酵條件。
　　 試驗(yàn)四:為了研究日糧中添加米曲霉發(fā)酵玉米

5、秸稈粉代替等量玉米對肉雞營養(yǎng)物質(zhì)代謝率、腸道微生物區(qū)系和消化酶的影響。本試驗(yàn)選擇25只6周齡AA肉雞,隨機(jī)分成五組,正處理組設(shè)4％、8％和12％三個水平,用發(fā)酵秸稈代替基礎(chǔ)日糧中等量玉米。用基礎(chǔ)日糧(對照組)和8％未發(fā)酵秸稈替代基礎(chǔ)日糧中等量玉米(負(fù)處理組)作對比。試驗(yàn)結(jié)果顯示:添加一定量的發(fā)酵玉米秸稈粉有助于粗蛋白、粗脂肪、鈣、中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的消化吸收,但不利于磷的消化吸收。與負(fù)處理組和對照組相比,日糧中添加發(fā)酵玉米秸稈粉