實驗一_苯酚的高效液相色譜法

1、實驗一高效液相色譜法紫外法測定水中的苯酚含量一、實驗目的1、熟悉高效液相色譜儀的結(jié)構2、掌握苯酚的高效液相色譜紫外測定法3、熟練掌握高效液相色譜儀的操作二、實驗原理苯酚是最簡單的酚，為無色固體，有特殊氣味，顯酸性。苯酚是有機化工工業(yè)的基本原料，可通過多種途徑對環(huán)境水體造成污染，對人類、魚類以及農(nóng)作物帶來嚴重危害。根據(jù)國家環(huán)保部門有關規(guī)定，工作場所苯酚的最高允許質(zhì)量濃度為5106μgL，飲用水中為2μgL，地面水中為0.1mgL。苯酚的測

2、量方法有多種，如溴化容量法、比色法、高效液相色譜法等。但前兩種方法分析速度較慢、精度較低，高效液相色譜法是近年來發(fā)展起來的一種新技術，具有分析速度快、檢測靈敏度高、操作簡便、樣品用量少等特點。三、儀器和試劑1、設備及試劑安捷倫高效液相色譜儀1100，紫外檢測器，C18色譜柱。苯酚(分析純)，甲醇(色譜純)，二次蒸餾水。2、操作條件色譜柱為C18柱；流動相為甲醇二次蒸餾水=80∶20(體積比)；檢測波長為270nm；流速為1.0mlmin

3、；進樣量為20μL。四、實驗步驟1、標準曲線的制備稱取純苯酚600mg于100.0ml容量瓶中，用適量甲醇溶解，用甲醇稀釋至刻度。分別吸取該溶液(單位:ml)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0于50ml的容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。得到標準系列溶液。分別采用高效液相色譜紫外法測定標準溶液，記錄色譜峰面積，以濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標繪制標準曲線。2、樣品分析10mL三支、1.5mL一次性離心管一支2.試劑：甲醇（色譜純）；

4、苯酚標準使用溶液（10mgL）待測水樣四、實驗步驟1標準系列配制取苯酚標準使用液0.50、1.00、2.00mL于10mL的具塞離心管中，用甲醇定容至5mL，混勻。待測。2樣品的制備取水樣約1mL于1.5mL一次性離心管中。待測。3色譜參數(shù)色譜柱：C18柱；流動相：乙腈、水；梯度洗脫程序：洗脫時間0:004:004:015:005:018:00乙腈（%）656575756565流速：1.0mLmin；柱溫：室溫；進樣量：20μL；檢測器