ms分析經(jīng)驗

1、1977年，LCMS開始投放市場1978年，LCMS首次用于生物樣品分析1989年，LCMSMS取得成功1991年，APILCMS用于藥物開發(fā)1997年，LCMSMS用于藥物動力學高通量篩選2002年美國質(zhì)譜協(xié)會統(tǒng)計的藥物色譜分析各種不同方法所占的比例。1990年，HPLC高達85%，而2000年下降到15%，相反，LCMS所占的份額從3%提高到大約80%。我們國家目前在這方面可能相當于美國1990年的水平。為此我們還有很長的一段路要走

2、色譜質(zhì)譜的在線聯(lián)用將色譜的分離能力與質(zhì)譜的定性功能結(jié)合起來，實現(xiàn)對復雜混合物更準確的定量和定性分析。而且也簡化了樣品的前處理過程，使樣品分析更簡便。色譜質(zhì)譜聯(lián)用包括氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GCMS)和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LCMS)，液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用互為補充，分析不同性質(zhì)的化合物。液質(zhì)聯(lián)用與氣質(zhì)聯(lián)用的區(qū)別:氣質(zhì)聯(lián)用儀(GCMS)是最早商品化的聯(lián)用儀器，適宜分析小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物；用電子轟擊方式（EI）得到的譜圖，可與標準譜庫

3、對比。液質(zhì)聯(lián)用(LCMS)主要可解決如下幾方面的問題：不揮發(fā)性化合物分析測定；極性化合物的分析測定；熱不穩(wěn)定化合物的分析測定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析測定；沒有商品化的譜庫可對比查詢，只能自己建庫或自己解析譜圖?，F(xiàn)代有機和生物質(zhì)譜進展在20世紀80及90年代，質(zhì)譜法經(jīng)歷了兩次飛躍。在此之前，質(zhì)譜法通常只能測定分子量500Da以下的小分子化合物。20世紀70年代，出現(xiàn)了場解吸（FD）離子化技術(shù)，能夠測定分子量高達1

4、500~2000Da的非揮發(fā)性化合物，但重復性差。20世紀80年代初發(fā)明了快原子質(zhì)譜法（FABMS），能夠分析分子量達數(shù)千的多肽。隨著生命科學的發(fā)展，欲分析的樣品更加復雜，分子量范圍也更大，因此，電噴霧離子化質(zhì)譜法（ESIMS）和基質(zhì)輔助激光解吸離子化質(zhì)譜法（MALDIMS）應(yīng)運而生。目前的有機質(zhì)譜和生物質(zhì)譜儀，除了GCMS的EI和CI源，離子化方式有大氣壓電離（API）（包括大氣壓電噴霧電離ESI、大氣壓化學電離APCI、大氣壓光電離

5、APPI）與基質(zhì)輔助激光解吸電離。前者常采用四極桿或離子阱質(zhì)量分析器，統(tǒng)稱APIMS。后者常用飛行時間作為質(zhì)量分析器，所構(gòu)成的儀器稱為基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜儀（MALDITOFMS）。APIMS的特點是可以和液相色譜、毛細管電泳等分離手段聯(lián)用，擴展了應(yīng)用范圍，包括藥物代謝、臨床和法醫(yī)學、環(huán)境分析、食品檢驗、組合化學、有機化學的應(yīng)用等；MALDITOFMS的特點是對鹽和添加物的耐受能力高，且測樣速度快，操作簡單。質(zhì)譜原理簡介：質(zhì)

6、譜分析是先將物質(zhì)離子化，按離子的質(zhì)荷比分離，然后測量各種離子譜峰的強度而實現(xiàn)分析目的的一種分析方法。以檢測器檢測到的離子信號強度為縱坐標，離子質(zhì)荷比為橫坐標所作的條狀圖就是我們常見的質(zhì)譜圖。常見術(shù)語:質(zhì)荷比:離子質(zhì)量(以相對原子量單位計)與它所帶電荷(以電子電量為單位計)的比值寫作(2)確定元素組成，即確定分子式或碎片化學式高分辨質(zhì)譜可以由分子量直接計算出化合物的元素組成從而推出分子式低分辨質(zhì)譜利用元素的同位素豐度，例:(3)峰強度與結(jié)

7、構(gòu)的關(guān)系豐度大反映離子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定在元素周期表中自上而下，從右至左，雜原子外層未成鍵電子越易被電離，容納正電荷能力越強，含支鏈的地方易斷，這同有機化學基本一致，總是在分子最薄弱的地方斷裂。不同類型有機物有不同的裂解方式相同類型有機物有相同的裂解方式只是質(zhì)量數(shù)的差異需要經(jīng)驗記憶。質(zhì)譜解析的一般步驟(適于低分辨小分子譜圖若已經(jīng)是高分辨質(zhì)譜圖得到元素組成更好)(1)核對獲得的譜圖扣除本底等因素引起的失真考慮操作條件是否適當(2)綜合樣品其他知識：

8、例如熔點，沸點，溶解性等理化性質(zhì)，樣品來源，光譜，波譜數(shù)據(jù)等.(3)盡可能判斷出分子離子。(4)假設(shè)和排列可能的結(jié)構(gòu)歸屬：高質(zhì)量離子所顯示的，在裂解中失去的中性碎片，如M1，M15，M18，M20，M31......意味著失H，CH3，H2O，HF，OCH3......(5)假設(shè)一個分子結(jié)構(gòu)，與已知參考譜圖對照，或取類似的化合物，并作出它的質(zhì)譜進行對比。有機質(zhì)譜的特點優(yōu)點:(1)定分子量準確，其它技術(shù)無法比。(2)靈敏度高，常規(guī)107—

9、108g單離子檢測可達1012g。(3)快速，幾分甚至幾秒。(4)便于混合物分析，LCMS，MSMS對于難分離的混合物特別有效其它技術(shù)無法勝任。(5)多功能，廣泛適用于各類化合物。局限性:(1)異構(gòu)體，立體化學方面區(qū)分能力差。(2)重復性稍差，要嚴格控制操作條件。所以不能象低場NMR，IR等自己動手，須專人操作。(3)有離子源產(chǎn)生的記憶效應(yīng)，污染等問題。(4)價格稍顯昂貴，操作有點復雜。質(zhì)譜儀器：質(zhì)譜儀由以下幾部分組成數(shù)據(jù)及供電系統(tǒng)┏━