藥物物理常數(shù)測定

1、藥物分析中常用儀器分析技術(shù),學習目標：1、初步掌握藥物檢驗中經(jīng)常使用的物理常數(shù)測定方法及儀器；2、初步了解光譜法（紫外-可見分光光度法、紅外光譜法；原子吸收分光光度法）在藥物檢驗中的應(yīng)用；3、初步了解色譜法（薄層色譜法；高效液相色譜法、氣相色譜法等）在藥物檢驗中的應(yīng)用；,,第一節(jié) 藥物物理常數(shù)的測定 物理常數(shù)是評價藥物質(zhì)量的重要指標，不同性質(zhì)、純度的藥物有著不同的物理常數(shù)值，在分析工作中可選擇測定相關(guān)的物理常數(shù)才進行藥物的

2、鑒別，檢查。,,,相對密度 pH值 熔點 餾程 凝點 黏度 旋光度 折光率 吸收系數(shù),主要內(nèi)容（Ch.P 2010）,,,1、概念相對密度:指在相同的溫度、壓力條 件下，某物質(zhì)的密度與水的密度的比值，除另有規(guī)定外，溫度為20℃。,一、相對密度,2、測定相對密度的意義 純藥物的相對密度在特定條件下為不變的常數(shù)，藥物的純度改變，相對密度也隨之改變，測定相對密度，可以區(qū)別或檢查藥物的純雜程度。,,3、相對密度測定方法

3、中國藥典中：比重瓶法 測定一般液體藥物的相對密度。韋氏比重秤法 測定揮發(fā)性液體藥物。,,首先將潔凈、干燥并精密稱定重量的比重瓶，裝滿供試品，裝好溫度計，水浴使內(nèi)容物達到20℃(或各品種項下規(guī)定溫度)，用濾紙吸干溢出側(cè)管的液體，立即蓋上罩。然后將比重瓶從水浴中取出，再用濾紙將比重瓶的外面擦凈，精密稱定，減去比重瓶的重量，求得供試品的重量后傾去，洗凈比重瓶，裝滿新沸過的冷水，再照上法測得同一溫度

4、時水的重量，計算，即得。,,（1） 比重瓶法,供試品的相對密度＝供試品重量/水重量注意：用比重瓶測定時的環(huán)境(指比重瓶和天平的放置環(huán)境)溫度應(yīng)略低于20℃或各品種項下規(guī)定的溫度。,,圖3-2 比重瓶,取20℃時相對密度為1的韋氏比重秤，用新沸過的冷水將所附玻璃圓筒裝至八分滿，置20℃(或各品種項下規(guī)定的溫度)的水浴中，將懸于秤端的玻璃錘浸入圓筒內(nèi)的水中，秤臂右端懸掛游碼于1.0000處，調(diào)節(jié)秤臂左端平衡用的螺旋使平衡，然后將玻璃圓筒

5、內(nèi)的水傾去，拭干，裝入供試液至相同的高度，并用同法調(diào)節(jié)溫度，平衡后讀取數(shù)值，即得供試品的相對密度。,,（2） 韋氏比重秤法,,該比重秤系在4℃時相對密度為1，則用水校準時游碼應(yīng)懸掛于0.9982處，并應(yīng)將在20℃測得的供試品相對密度除以0.9982。,圖3-2 韋氏比重秤,,1、概念溶解度：是藥品的一種物理性質(zhì)，通常是指在一定溫度下，在一定量溶劑中達飽和時溶解的最大藥量，是反映藥物溶解性的重要指標。2、意義溶解度在一定程度上也可

6、反映藥品的純度。《中國藥典》2005年版關(guān)于藥物溶解度有七種提法：（見表3-1）,二、溶解度,表3-1 藥物溶解性能含義,,以上這些術(shù)語僅表示藥物大致的溶解性能。準確的溶解度：常用一定溫度下100g溶劑中（或100g溶液或100ml溶液）溶解溶質(zhì)的最大克數(shù)來表示。 例：咖啡因在20℃的水溶液中溶解度為1.46％，即表示在100ml水中溶解1.46g咖啡因時溶液達到飽和。,,3、藥物溶解度的粗略試驗法（ChP）： 除另有規(guī)定外，

7、稱取研成細粉的供試品或量取液體供試品，于25℃±2℃一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘，觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，如無目視可見的溶質(zhì)顆?；蛞旱螘r，即視為完全溶解。,,藥物溶液、分析時所用溶劑的酸堿性可用pH值來表示，pH值常用酸度計來測定。 酸度計主要包括:電極和電位計 參比電極：有穩(wěn)定的已知電位；有甘汞電極、 氯化銀電極等 指示電極：電極的電位隨溶液中氫離子濃

8、 度改變而變化；有玻璃電極、 氫醌電極和銻電極等。,,三、pH值,,中國藥典規(guī)定：除另有規(guī)定外，水溶液的pH值應(yīng)以玻璃電極為指示電極、飽和甘汞電極為參與電極的酸度計進行測定。 測定試樣pH值的酸度計應(yīng)定期進行計量檢定，使精密度和準確度符合要求。,,儀器校正常用的緩沖液有草酸鹽、苯二甲酸鹽、磷酸鹽、硼砂以及氫氧化鈣標準緩沖液。 標準緩沖液的配制必須用pH值基準試劑按藥典規(guī)定的

9、方法配制。（配制標準緩沖液與溶解供試品的水，應(yīng)是新沸過的冷蒸餾水，其pH值一般應(yīng)為5.5～7.0。） 標準緩沖液一般可保存2～3個月，但發(fā)現(xiàn)有渾濁、發(fā)霉或沉淀等現(xiàn)象時,不能繼續(xù)使用。,,表3-2 不同溫度時各種標準緩沖液的pH值表,,,首先選擇與供試液pH值接近的標準緩沖液對儀器進行校正，使其讀數(shù)與上表數(shù)值一致，再應(yīng)用pH值相差約3個pH單位的另一種的標準緩沖液核對儀器示值，誤差應(yīng)不超過±0.02pH單位。若大于此偏差，應(yīng)小

10、心調(diào)節(jié)斜率，使示值與第二種標準緩沖液的數(shù)值一致。重復(fù)上述定位和斜率調(diào)節(jié)操作，至儀器示值與標準緩沖液規(guī)定數(shù)值相差不大于0.02pH單位后即可進行樣品pH值測定。,樣品pH的測定方法,,例：對弱緩沖液（如水）的pH值測定時，應(yīng)先用苯二甲酸鹽（4.01)標準緩沖液校正儀器后測定供試液，并重取供試液再測，直至pH值的讀數(shù)在1分鐘內(nèi)改變不超過 ±0.05為止；然后再用硼砂標準緩沖液(9.18)校正儀器，再如上法測定；二次pH值的讀數(shù)相差

11、應(yīng)不超過0.1；取二次讀數(shù)的平均值為其pH值。,,,,概念：熔點是固體藥物固液兩態(tài)在大氣壓力下達成平 衡的溫度。由于受藥物純度及測定時溫度傳導(dǎo)的影響，絕大多數(shù)藥物在加熱熔化表現(xiàn)為一個過程，即從供試品在毛細管內(nèi)局部液化，出現(xiàn)明顯液滴（初熔）至固相消失，供試品全部液化（全熔）的過程，即從初熔到全熔的過程。,,,四、熔點,有的藥物初熔和全熔難以辨別，則以熔化時發(fā)生突變的溫度作為熔點。 有的藥物熔融同時分解，則以熔融同時分解的溫度作為熔點。

12、因此，一般來說，藥物的熔點系指藥物由固體熔化成液體的溫度，熔融同時分解的溫度，或在熔化時自初熔至全熔的一段溫度。,,根據(jù)藥物的性狀不同，中國藥典（2010年版）中收載有三種熔點測定的方法：,第一法 用于測定易粉碎的固體藥物。第二法 用于測定不易粉碎的固體藥品。第三法 用于測定凡士林或其他類似的物質(zhì)。,,第一法 用于測定易粉碎的固體藥物,取供試品，研細，按規(guī)定的干燥失重條件干燥，（五氧化二磷干燥或其他適宜的干燥方法）。取供試品適量裝

13、入熔點測定用毛細管（內(nèi)徑0.9-1.1mm，壁厚0.10-0.15mm）中，裝管高度約3mm，填緊。將溫度計插入到傳溫液中，加熱傳溫液至比規(guī)定熔點低限低約10 ℃時，將毛細管插入傳溫液，貼附在溫度計上，使毛細管的內(nèi)容物正好在溫度計汞球的中部，繼續(xù)加熱，調(diào)節(jié)升溫速率1.0-1.5℃/min，加熱時不斷攪拌使傳溫液受熱均勻。,,觀察樣品在加熱過程中的變化，以局部液化時的溫度作為初熔溫度，全部液化時的溫度作為全熔溫度。記錄供試品在初熔至全熔時

14、的溫度，重復(fù)測定三次，取平均值，即得。,,第二法 用于測定不易粉碎的固體藥品,如脂肪、石蠟、羊毛脂等的測定。 將供試品熔化后，吸入兩端開口的毛細管（同第一法，但管端不熔封）中，高約10mm，冷卻，凝固后照第一法放入傳溫液中，加熱至比規(guī)定熔點低約5℃時，調(diào)節(jié)升溫速度為每分鐘不超過0.5℃，供試品在毛細管中開始上升的溫度即為熔點。,,第三法 用于測定凡士林或其他類似的物質(zhì),將已加熱至融熔的供試品粘附于溫度計的汞球部，冷卻，將溫度計插入一外

15、徑約為25mm，長150mm的試管中，塞緊，使溫度計懸于其中，將試管放入16℃的水浴中，加熱。使水浴溫度以每分鐘 2℃的速率升到38℃，再以每分鐘1℃的速率升溫至供試品的第一滴脫離溫度計為止，檢讀溫度計上的溫度，即可作為供試品的近似熔點，重復(fù)測定3次，如3次測得的熔點相差不超過1℃，即可取平均值作為供試品的熔點，如3次測得的熔點相差超過1℃，可再測定2次，并取5次的平均值作為供試品的熔點。,,傳溫液的選擇視被測藥品熔點的高低而定 熔點

16、在80℃以下者，用水作為傳溫液； 熔點在80℃以上者，用硅油或液體石蠟作為傳溫液。 測定熔點用的溫度計通常選用分浸型溫度計（溫度計有全浸型和分浸型溫度計兩種）。溫度計使用前還應(yīng)用熔點標準品進行校正。,,測定熔點的方法較多，毛細管法仍是各國藥典使用的主要方法。由于測定熔點的方法不同，受傳溫液、升溫的速度等因素的影響，所以應(yīng)嚴格按照中國藥典的規(guī)定進行測定。 熔點測定用的對照品無有效期，一般只要外觀無變異均可使用。,,當用毛細管法測定

17、熔點難以判斷時，須用差示熱分析法（DSC）予以輔佐。 對于一類新藥，其熔點須用毛細管法和DSC法兩種方法進行測定。,,五、餾 程,1、 概念 餾程系指一種液體依照中國藥典規(guī)定方法進行蒸餾，校正到標準壓力[101．3kPa（760mmHg）]下，自開始餾出第5滴算起，至供試品僅剩3-4ml或一定比例的容積餾出時的溫度范圍。,,2、測定餾程的意義：某些液體藥品具有一定的餾程，不同的藥物餾程不同。因此測定餾程可以 區(qū)別不同的藥物；

18、 檢查藥物的純雜程度。 純度高的藥品，餾程較短； 純度低的藥品則餾程較長。,,3、餾程的測定方法,餾程的測定采用國產(chǎn)19標準磨口蒸餾裝置，用具有0.5ml刻度的量筒收集餾出液。測定時取供試品25ml，經(jīng)長頸干燥小漏斗加入干燥蒸餾瓶中， 加入潔凈的無釉小磁片數(shù)片，插入溫度計，安裝好蒸餾裝置，加熱，使液體沸騰，調(diào)節(jié)溫度使每分鐘餾出2-3ml，注意檢讀自冷凝管開始餾出第5 滴與供試品僅剩3-4ml的溫度范圍，或一定比

19、例的容積餾出時的溫度范圍，即為供試品的餾程。,,,圖3-3 餾程測定裝置,測定時，氣壓如在： 101.3kPa(760mmHg)以上，每高0.36kPa (2.7mmHg)，應(yīng)將測得的溫度減去0.1℃； 101.3kPa(760rnmHg)以下，每低0.36kPa (2.7mmHg)，應(yīng)增加0.1℃,,1、概念：指一種物質(zhì)照藥典規(guī)定方法測定，由液體凝結(jié)為固體時，在短時間內(nèi)停留不變的最高溫度。 某些藥品具有一定的凝點，若純度變

20、化，凝點也隨之變化。2、測定凝點的意義：區(qū)別或檢查藥品的純雜程度。,,六、凝點,藥品準備： 取藥品適量，（一般來說，如供試品為液體，量取15ml；如為固體，則稱取15～20g，加微溫使熔融）置內(nèi)管中，使其迅速冷卻，測定供試品的近似凝點。再將內(nèi)管置較近似凝點約高5～10℃的水浴中，使凝結(jié)物僅剩極微量未熔融。,,3、凝點測定方法,儀器準備及測定： 燒杯中加入較供試品近似凝點約低5℃的水或其他適宜的冷卻液。用攪拌器不斷攪拌供試品，

21、每隔30秒鐘觀察溫度1次，至液體開始凝結(jié)，停止攪拌并每隔5～10秒鐘觀察溫度1次，至溫度計的汞柱在一點能停留約1分鐘不變，或微上升至最高溫度后停留約1分鐘不變，即將該溫度作為供試品的凝點。,,,圖3-4 凝點測定裝置,需要注意的是，有些藥品在一般冷卻條件下不易凝固，需另用少量供試品在較低溫度凝固后，取少量作為母晶加到供試品中，才能測定其凝點。,,1、概念： 黏度系指流體對流動的阻抗能力。 中國藥典2010年版把黏度分為：運動黏度

22、、 動力黏度和特性黏度2、測定黏度的意義：可以區(qū)別或檢查其藥物的純雜程度。,,七、黏度,動力黏度指液體以1cm/s的速度流動時，在每1cm2平面上所需剪應(yīng)力的大小，以Pa?s為單位。運動黏度是液體的動力黏度與其密度的比值，再乘以系數(shù)10-6即得，以mm2/s為單位。對于高聚物，溶劑的黏度η0常因高聚物的溶入而增大，溶液的黏度η與溶劑的黏度η0的比值（η/η0）稱為相對黏度（ηr），當高聚物溶液的濃度較稀時，其相對黏度的對數(shù)值與高

23、聚物溶液的濃度的比值，即為該高聚物的特性黏度［η］。,,3、黏度的測定方法,黏度的測定用黏度計。中國藥典采用的黏度測定方法有三種：第一法是采用平氏黏度計測定牛頓流體（包括純液體和低分子物質(zhì)的溶液）的運動黏度。第二法是采用旋轉(zhuǎn)式黏度計測定非牛頓液體（包括高聚物的溶液、混懸液、乳劑分散液體和表面活性劑的溶液）的動力黏度。第三法是采用烏氏黏度計測定特性黏度，常用于右旋糖酐及其制劑等的特性黏度的測定。,,A

24、 B圖3-5 平氏黏度計（A） 烏氏黏度計（B）,第一法：平氏黏度計測定牛頓流體的 運動黏度或動力黏度,測定時，取毛細管內(nèi)徑符合要求的平氏黏度計1支，在支管上連接一根橡皮管，用手指堵住寬管管口，倒置黏度計，將主管插入供試液體中，從橡皮管的另一端開始抽氣使得供試品充滿緩沖球與測定球，并達到測定線m2處，迅速提出黏度計并倒轉(zhuǎn)，抹去黏附于管外的供試品，取下橡皮管使連接于主管管口上，將黏度計垂直固定于恒溫水浴中

25、。,,黏度計水浴時，水浴的液面高于緩沖球的中部，放置15分鐘后，自橡皮管的另一端抽氣，使供試品充滿測定球，并超過測定線m1，開放橡皮管口，使供試品在管內(nèi)自然下落，用秒表準確記錄液面自測定線m1下降至測定線m2處的流出時間。取兩份供試溶液多次測量取平均值，并按下式計算，即為供試品的運動黏度或供試溶液的動力黏度。,,運動黏度（mm2/s）＝Kt 動力黏度（Pa?s）＝106?Kt?ρ 式中 K 為用已知黏度的標準液測得的黏度計常數(shù)

26、，mm2/s2； t 為測得的平均流出時間s；ρ為供試溶液在規(guī)定溫度下的密度，kg/m3。 平氏黏度計規(guī)格很多，常用的毛細管內(nèi)徑為0.8mm±0.05mm，1.0mm±0.05mm，1.2mm±0.05mm，1.5mm±0.1mm 或 2.0mm±0.1ｍｍ。,,第二法: 采用旋轉(zhuǎn)式黏度計測定非牛頓液體動力黏度。,通常是根據(jù)在旋轉(zhuǎn)過程中作用于液體介質(zhì)中的切應(yīng)力的大小來完成測定的，

27、并下列公式來計算供試品的動力黏度。,,,式中 K為已知黏度的標準液測得的旋轉(zhuǎn)式黏度計常數(shù)；T為扭力矩；ω為角速度。,常用的旋轉(zhuǎn)式黏度計有同軸雙筒黏度計、單筒轉(zhuǎn)動黏度計、錐板型黏度計、轉(zhuǎn)子型旋轉(zhuǎn)式黏度計，可根據(jù)供試品的實際情況和黏度范圍適當選用。,,第三法: 采用烏氏黏度計測定特性黏度,測定時，首先將待測藥物制成一定濃度的溶液，用3號垂熔玻璃漏斗過濾，取續(xù)濾液（7ml以上）沿潔凈、干燥烏氏黏度計的寬管內(nèi)壁注入儲器中，將黏度計垂直固定于恒溫

28、水浴中，并使水浴的液面高于緩沖球，放置15分鐘后，將兩根乳膠管分別接于主管和側(cè)管處，夾住側(cè)管管口的膠管，自主管管口處抽氣，使供試品溶液的液面緩緩升高至緩沖的中部，依次開放側(cè)管，主管，使供試品溶液在管內(nèi)自然下落。,,供試品在管內(nèi)下落時，用秒表準確記錄液面自測定線m1下降至測定線m2處的流出時間即為供試液的流出時間（T），重復(fù)測定兩次取平均值，兩次測定值相差不得超過0.1秒。 再取溶劑經(jīng)3號垂熔玻璃漏斗濾過后按照相同的方法操作測得溶劑的

29、流出時間（T0），重復(fù)測定兩次，兩次測定值應(yīng)相同。,,按下式計算特性黏數(shù)： 特性黏數(shù)［η］＝ln ηr/c，    式中ηr為（T/T0）；c為供試液的濃度g/ml。 測定時，通常水浴溫度應(yīng)為25℃±0.1℃。,,1、概念：旋光度指偏振光旋轉(zhuǎn)的度數(shù)。 當平面偏振光通過含有某些光學活性物質(zhì)的液體或溶液時，能引起旋光現(xiàn)象，使偏振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。旋光度有左旋和右旋之分，偏振光

30、向右旋轉(zhuǎn)（順時針）稱為右旋，用符號“+”表示；偏振光向左旋轉(zhuǎn)（逆時針）稱為左旋，用符號“-”表示。,,八、旋光度,偏振光透過1dm并每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液，在一定波長與溫度下測得的旋光度稱為比旋度。2、測定比旋度的意義：區(qū)別或檢查某些藥品的純雜程度，用以測定藥物的含量。,,中國藥典規(guī)定具有旋光性的藥品要作比旋度測定，因為具有不同旋光性的藥物其藥理作用差異很大，因此，對于光學異構(gòu)體藥理作用不同的藥物，控制其光學異構(gòu)體的量

31、非常重要。,,3、旋光度的測定,物質(zhì)的旋光度不僅與其化學結(jié)構(gòu)有關(guān)，而且還與被測溶液的濃度、光路長度、測定時定時的溫度以及偏振光的波長有關(guān)。濃度越大，光路越長，則偏振面旋轉(zhuǎn)的角度也就越大。即在一定的波長和溫度下，旋光度（α）與濃度（c）、光路長度（l）以及該物質(zhì)的比旋度 三者成正比關(guān)系：,,,,中國藥典2010年版采用鈉光譜的D線(589.3nm)測定旋光度，除另有規(guī)定外，測定管長度為1dm，測定溫度為20℃，在此條件下測定的比旋度用

32、 表示。 對于液體供試品： 對于固體供試品： 式中， 為比旋度；α為測得的旋光度；l為光路長度（即測定管長度，dm）；d為液體的相對密度； c為每100ml溶液中含有被測物質(zhì)的重量，g(按干燥品或無水物計算)。,,,,,,測定藥物旋光度時，鈉光燈啟輝后至少20分鐘后發(fā)光才能穩(wěn)定，測定或讀數(shù)時應(yīng)在鈉光燈穩(wěn)定后讀取，供試的液體或固體物質(zhì)的溶液若有渾濁或含有混懸的顆粒。應(yīng)預(yù)先濾過．取續(xù)濾液測定。儀器的各個光學鏡片應(yīng)保持干燥

33、清潔，防止灰塵和油污的污染。測定結(jié)束后測試管必須洗凈晾干，以備下次再用。,,1、概念 光線自一種透明介質(zhì)進入另一種透明介質(zhì)時，由于兩種介質(zhì)的密度不同，光的進行方向發(fā)生變化，即發(fā)生光的折射現(xiàn)象，并且遵從折射定律。根據(jù)折射定律，光線入射角的正弦值與光線折射角的正弦值的比值即為折光率。,,,式中，n是折光率；sini是光線入射角的正弦；sinr是光線折射角的正弦。,九、折光率,中國藥典所規(guī)定的折光率系指光線從空氣中進入供試品的折光率。

34、藥物的折光率因溫度和光線波長的不同而改變。透光物質(zhì)的溫度升高，折光率變小；光線的波長越短，折光率就越大 。2、折光率測定的意義 折光率是液體藥物的物理常數(shù)，測定折光率可以用于藥物真?zhèn)蔚蔫b別和純度檢查。,,3、折光率的測定 采用阿貝折光儀。中國藥典規(guī)定在20 ℃時用鈉光譜的D線（589.3nm）作為光源測定折光率。在此條件下測得的折光率表示為nD20 。由于折光率與溫度有關(guān)，故阿培氏折光計還裝有保溫層，可通入一定溫度的水保

35、持溫度恒定，測定前，折光計讀數(shù)應(yīng)用校正用棱鏡或水進行校正，測定時，應(yīng)重復(fù)讀數(shù)三次，三次讀數(shù)的平均值即為供試品的折光率。水的折光率20℃時為1.330，25℃時為1.3325。,,,圖3-6 折射定律示意圖,,4、注意事項(1)大多數(shù)供試品的折射率受溫度的影響較大，測定時溫度恒定在半小時以上?？捎煤銣厮h(huán)控制溫度。(2)上下棱鏡應(yīng)保持潔凈．應(yīng)用脫脂棉蘸取丙酮或乙醚擦拭．用擦鏡紙擦干。不得測定強酸性、強堿性或有腐蝕性的物質(zhì)。(3)滴

36、加的供試品量應(yīng)適中，同時勿使氣泡進入樣品，以免影響折射率的測定。(4)測定揮發(fā)性液體時，可關(guān)閉上下棱鏡，將測定液從進樣孔滴人，隨加隨讀數(shù)。(5)測定固體樣品以及棱鏡校正儀器時，不得關(guān)閉上下棱鏡。(6)測定結(jié)束時，必須用能溶解供試品的試劑(如水、丙酮或乙醚)將上下棱鏡擦凈，晾干，放入儀器箱里，并放人硅膠防潮。,4．應(yīng)用： 折射率測定法多用于不同油類、液態(tài)藥物的區(qū)別。,十、吸收系數(shù),1、概念 藥物對不同波長的單色光具有選

37、擇性吸收，其在最大吸收波長處的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)之一。中國藥典使用百分吸收系數(shù)（ ），其定義為：一定波長的單色光透過濃度為1g/100ml，光路長度為1cm 的吸光物質(zhì)溶液時的吸收度。,,,2、吸光系數(shù)的意義 在給定單色光、溶劑和溫度的情況下，吸光系數(shù)是藥物的特性常數(shù)，表明藥物對某一特定波長光的吸收能力。不同藥物對同一波長的單色光，有著不同的吸光系數(shù)。測定吸收系數(shù)可以鑒別藥物的真?zhèn)危部梢苑从吵鏊幬锛冸s的程度。,,藥品標準

38、中的物理常數(shù)是藥品的物質(zhì)常數(shù)，不同性質(zhì)、純度的藥物有著不同的物理常數(shù)值，藥物分析中常用的物理常數(shù)有：相對密度、溶解度、pH值、熔點、餾程、凝點、黏度、旋光度、折光率、吸收系數(shù)等。在分析工作中可根據(jù)不同藥品的特性或檢定目的的需求，選擇有關(guān)物理常數(shù)的測定。測定時應(yīng)嚴格按照中國藥典的要求進行。,,,小 結(jié),1.藥品質(zhì)量標準中測定物理常數(shù)有何意義？2.物理常數(shù)的常用測定方法有哪些？,,思考題,儀器分析法分類：,1.光學分析法：輻射發(fā)射：AE

39、S輻射吸收：AAS；IR；UV-VIS；NMR；AFS輻射散射：濁度法；拉曼光譜法輻射衍射法：X射線衍射法；電子衍射法 2.電化學 電導(dǎo)：電導(dǎo)法；電流：電流滴定法；電位：電位分析法；電量：庫侖分析法；電流-電壓特性：極譜分析法；伏安法。 3.色譜法：GC；HPLC；離子色譜；質(zhì)譜法,第二節(jié) 光學分析法,一、紫外-可見分光光度法（一）原理：1、物質(zhì)對光選擇性吸收；2、光的吸收定律：朗伯-比爾定律 光的吸

40、收定律也稱為朗伯-比爾定律。朗伯定律是說明光的吸收與吸收層厚度成正比。比爾定律是說明光的吸收與溶液濃度成正比。如果同時考慮吸收層厚度和溶液的濃度對單色光吸收率的影響，則得朗伯-比爾定律。它是吸光度分析的理論基礎(chǔ)。,（二）紫外-可見分光光度計在紫外及可見光區(qū)用于測定溶液吸光度的分析儀器稱為紫外-可見分光光度計（簡稱分光光度計），目前，紫外-可見分光光度計的型號較多，但它們的基本構(gòu)造相似，都由光源、單色器、樣品吸收池、檢測器和測量系統(tǒng)等五

41、大部件組成，框圖見圖2-5。 圖2-5 分光光度計組成部件框圖,第二節(jié) 紫外-可見分光光度法,,,,,,光源,單色器,吸收池,檢測器,測量系統(tǒng),,,,,（三）應(yīng)用在大多數(shù)有機藥物分子中，因含有某些能吸收紫外光的官能團而顯示吸收的特征光譜，可作為鑒別、檢查、含量測定的依據(jù)?！鼍哂凶贤馕盏乃幬锝Y(jié)構(gòu)：●不飽和脂肪族化合物；●苯及其衍生物；●芳香雜環(huán)化合物；,1、鑒別（1）對比吸收光

42、譜特性：最大吸收波長、最小吸收波長、肩峰；（2）對比吸收光譜的一致性；（3）對比吸光度比值的一致性；最大吸收波長的吸光度/最小吸收波長的吸光度值。,2、檢查在某波長處藥物無吸收，而所含雜質(zhì)有吸收，可檢查某雜質(zhì)的限度。例：乙醇中苯檢查，苯在265nm處有吸收峰，而乙醇無吸收，控制雜質(zhì)限度10PPm。,3、含量測定（1）百分系數(shù)法（2）對照法（3）標準曲線法,第二節(jié) 光譜法,二、紅外吸收光譜法（一）基本原理紅外光譜在可

43、見光區(qū)和微波區(qū)之間，其波長范圍約為0.75～1000?m。根據(jù)實驗技術(shù)和應(yīng)用的不同，通常將紅外光譜劃分為三個區(qū)域。如下表所示。,,,,,,（二）紅外光譜儀目前生產(chǎn)和使用的紅外光譜儀主要有色散型和干涉型兩大類。色散型紅外光譜儀，又稱經(jīng)典紅外光譜儀，其構(gòu)造系統(tǒng)基本上和紫外-可見分光光度計類似。它主要由光源、吸收池、單色器、檢測器、放大器及記錄機械裝置五個部分組成。圖2-6顯示了這五個部分之間的連接情況。,紅外光譜儀,,圖2-6雙光束紅外

44、分光光度計,三、應(yīng)用分析試樣的處理制備樣品的要求：試樣應(yīng)該是單一組分的純物質(zhì)，純度應(yīng)大于98%或符合商業(yè)標準。多組分樣品應(yīng)在測定前用分餾、萃取、重結(jié)晶、離子交換或其他方法進行分離提純，否則各組分的紅外光譜會相互重疊，難以辯析；試樣中應(yīng)不含游離水。因水本身有紅外吸收，會嚴重干擾樣品譜圖，還會浸蝕吸收池的鹽窗；試樣的濃度和測試厚度應(yīng)選擇適當，以使光譜圖中大多數(shù)峰的透射比在10%～80%范圍內(nèi)。,鑒別：（1）利用標準物質(zhì)進行鑒別（已知化

45、合物）；（2）利用標準圖譜進行鑒別；■比較峰的位置、峰的強度、峰的形狀等。,布洛芬紅外標準光譜圖,第二節(jié) 光譜法,三、原子吸收分光光度法檢查項的應(yīng)用：原子吸收分光光度法用于雜質(zhì)限量檢查時，按下法進行：取供試品按規(guī)定配制成供試溶液；另取等量的供試品，加入限量的待測元素溶液，制備成對照溶液。先將對照溶液噴入火焰，調(diào)節(jié)儀器使具有合適的讀數(shù)a；在相同條件下測定供試液B，記錄其讀數(shù)b。則 b相當于供試品溶液中待檢元素的含量，（a－b）相當

46、于對照溶液中按限量加入的待檢元素的量。當b＜（a－b）時，表示供試品中所含雜質(zhì)元素符合規(guī)定，反之，為不合格。,第三節(jié) 色譜法,一、 薄層色譜法(TLC)二、高效液相色譜法(HPLC)三、氣相色譜法(GC),一、高效液相色譜法特點 分離效能高、應(yīng)用范圍廣，能準確、快速、分離分析同時進行,1、高效液相色譜儀：高效液相色譜儀是實現(xiàn)液相色譜分析的儀器設(shè)備，自1967年問世以來，由于使用了高壓輸液泵、全多孔微粒填充柱和高靈敏度檢

47、測器，從而實現(xiàn)了對樣品的高速、高效和高靈敏度的分離測定。⑴儀器工作流程 高效液相色譜儀是由色譜柱為中心的分離部分和檢測器為中心的檢測部分組成，無論哪種儀器，基本都由輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器及計算機等組成，其中輸液泵、色譜柱及檢測器是儀器的關(guān)鍵。圖2-22是普通配制的帶有預(yù)柱的HPLC的結(jié)構(gòu)圖。,圖2-22 帶有預(yù)柱的HPLC的儀器結(jié)構(gòu)圖,●高效液相色譜法使用步驟：1、溶液（對照品、供試品、流動相）配制：過濾、脫氣。2、儀器

48、的準備：脫氣。五大系統(tǒng)先后打開。3、測定：系統(tǒng)適用性實驗（理論塔板數(shù)、分離度、拖尾因子）。4、計算,2、應(yīng)用（1）鑒別：對照法。（2）檢查：⑴面積歸一化法供試品溶液經(jīng)高效液相色譜分離后，測定各雜質(zhì)及藥物的峰面積，計算各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積的百分率，不得超過規(guī)定的限量。如鹽酸克林霉素中有關(guān)物質(zhì)的檢查。,⑵主成分自身對照法,當雜質(zhì)峰面積與主成分峰面積相差懸殊時，采用該法。檢查時，將供試品溶液稀釋成一定濃度的溶液，作為對照