滅菌及空氣除菌

1、第五章 發(fā)酵工業(yè)的滅菌及空氣除菌,第一節(jié) 消毒與滅菌第二節(jié) 發(fā)酵工業(yè)的無菌技術(shù)第三節(jié) 培養(yǎng)基與發(fā)酵設(shè)備的滅菌第四節(jié) 空氣的除菌,目的要求：,了解滅菌對(duì)發(fā)酵工業(yè)的意義，滅菌的原理及常用的方法。掌握培養(yǎng)基及發(fā)酵設(shè)備的滅菌方法。了解生產(chǎn)中空氣除菌的基本方法、原理及設(shè)備。理解空氣凈化流程。,幾個(gè)問題,1、滅菌對(duì)發(fā)酵的意義2、滅菌的原理3、滅菌的方法4、滅菌的對(duì)象5、空氣的滅菌,滅菌的目的及內(nèi)容,,目的：為了保證純種

2、并安全發(fā)酵內(nèi)容：培養(yǎng)基補(bǔ)料液（流加料） 發(fā)酵過程的無菌控制空氣系統(tǒng) 直接關(guān)系到發(fā)酵罐 生產(chǎn)的成敗!管道系統(tǒng)環(huán)境：需要消毒,第一節(jié) 消毒與滅菌,一、控制有害微生物的主要措施,二、幾個(gè)概念,（一）滅菌（二）消毒（三）防腐（四）化療,（一）滅菌（sterilization）,滅菌： （p

3、128）采用理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措施，稱為滅菌。 Sterilization就是失去繁殖力。例如各種高溫滅菌措施等。滅菌實(shí)質(zhì)上可分殺菌和溶菌兩種，前者指菌體雖死，但形體尚存，后者則指菌體殺死后，其細(xì)胞發(fā)生溶化、消失的現(xiàn)象 。,,,（二）消毒,從字義上來看，消毒就是消除毒害，這里的“毒害”就是指傳染源或致病菌的意思。消毒:是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的病

4、原菌，而對(duì)被消毒的物體基本無害的措施。,（三）防腐（antisepsis）,防腐:就是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖，從而達(dá)到防止食品等發(fā)生霉腐的措施。（1）低溫（2）缺氧（3）干燥 （4）高滲 （5）高酸度 （6）防腐劑,（四）化療（chemotherapy）,化療:即化學(xué)治療。它是利用具有高度選擇毒力（即對(duì)病原菌具有高度毒力而對(duì)宿主無顯著毒性）的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖，借以達(dá)到治療該傳染

5、病的一種措施。用于化療目的的化學(xué)物質(zhì)稱化學(xué)治療劑。最重要的化學(xué)治療劑如各種抗生素、磺胺類藥物和中草藥中的有效成分等。,第二節(jié) 發(fā)酵工業(yè)的無菌技術(shù),常用的除菌方法（p128-129）一、高溫滅菌：干熱滅菌和濕熱滅菌。火焰滅菌：接種時(shí)用。二、射線滅菌：用紫外線、高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行滅菌的方法。三、化學(xué)藥劑滅菌：一些化學(xué)藥劑能與微生物反應(yīng)而具殺菌作用。適用于環(huán)境、設(shè)備等方面的消毒，一般不用于培養(yǎng)基的滅菌。四、

6、過濾除菌：利用過濾方法阻留微生物，達(dá)滅菌目的。適用于澄清流體（如氣體和液體）的除菌以及熱敏性培養(yǎng)基的除菌。,一、高溫殺菌,（一）高溫致死原理（二）高溫滅菌的方法（三）高溫對(duì)培養(yǎng)基成分的有害影響及其防止（四）滅菌設(shè)備,（一）高溫致死原理,高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等重要生物高分子發(fā)生變性、破壞。例如它可使核酸發(fā)生脫氨、脫嘌呤或降解，以及破壞細(xì)胞膜上的類脂質(zhì)成分等。,（二）高溫滅菌的方法,1．干熱滅菌法,干熱滅菌法： 將金屬制品或清

7、潔玻璃器皿放入電熱干燥箱內(nèi)，在160～170℃下維持1～2h后，即可達(dá)到徹底滅菌的目的。原因：在這種條件下，可使細(xì)胞膜破壞、蛋白質(zhì)變性、原生質(zhì)干燥，以及各種細(xì)胞成分發(fā)生氧化。適用對(duì)象：玻璃器皿、金屬材料、耐高溫物品。灼燒：是一種最徹底的干熱滅菌方法，但它只能用于接種環(huán)、接種針等少數(shù)對(duì)象的滅菌。,2．濕熱滅菌法,濕熱滅菌法：利用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。濕熱滅菌法與干熱滅菌法的比較：濕熱滅菌法比干熱滅菌法更有效，這一方面是由于濕熱易

8、于傳遞熱量，另一方面是由于濕熱更易破壞保持蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的氫鍵等結(jié)構(gòu)，從而加速其變性。方法：常壓和高壓。微生物的耐熱情況：多數(shù)細(xì)菌和真菌的營養(yǎng)細(xì)胞在60℃左右處理5～10min后即可殺死；酵母菌和真菌的孢子稍耐熱些，要用80℃以上的溫度處理才能殺死；細(xì)菌的芽孢最耐熱，一般要在121℃下處理15min才能殺死。,（1）常壓法,巴氏消毒法： 用于牛奶、啤酒、果酒和醬油等不能進(jìn)行高溫滅菌的液體的一種消毒方法，其主要目的是殺死其中無芽孢

9、的病原菌（如牛奶中的結(jié)核桿菌或沙門氏菌），而又不影響它們的風(fēng)味。它是一種低溫消毒法。低溫維持法：在63℃下保持30min可進(jìn)行牛奶消毒；高溫瞬時(shí)法：用于牛奶消毒時(shí)只要在72℃下保持15秒鐘即可。,,間歇滅菌法：又稱丁達(dá)爾滅菌法或分段滅菌法。方法：將待滅菌的培養(yǎng)基在80～100℃下蒸煮15～60min，以殺死其中所有微生物的營養(yǎng)細(xì)胞，然后置室溫或37℃下保溫過夜，誘導(dǎo)殘留的芽孢發(fā)芽，第二天再以同法蒸煮和保溫過夜，如此連續(xù)重復(fù)3天，即

10、可在較低溫度下達(dá)到徹底滅菌的效果。用途：適用于不耐熱培養(yǎng)基的滅菌。,（2）加壓法,常規(guī)加壓滅菌法:將盛有適量水的加壓蒸汽滅菌鍋加熱煮沸，徹底驅(qū)盡氣體后將鍋密閉。分為兩種具體的方法：①再繼續(xù)加熱至121℃（壓力為1kg／cm2或15磅／英寸2），時(shí)間維持15～20min；②或采用在較低的溫度115℃，（即壓力為0.7kg／cm2或10磅／英寸2）下維持35min。用途：一切微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、醫(yī)療保健機(jī)構(gòu)或發(fā)酵工廠中對(duì)培養(yǎng)基及多種

11、器材、物料的滅菌。,連續(xù)加壓滅菌法——“連消法”,用途：只在大規(guī)模的發(fā)酵工廠中作培養(yǎng)基滅菌用。主要操作：將培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外連續(xù)不斷地進(jìn)行加熱、維持和冷卻，然后才進(jìn)入發(fā)酵罐。方法：培養(yǎng)基一般在135～140℃下處理5～15秒鐘以達(dá)到滅菌的目的。,連續(xù)加壓滅菌法優(yōu)點(diǎn)：,①因采用高溫瞬時(shí)滅菌，故既可殺滅微生物，又可最大限度減少營養(yǎng)成分的破壞，從而提高了原料的利用率，比“實(shí)罐滅菌”（121℃，30min）提高產(chǎn)量5～10％；②由于總的滅菌

12、時(shí)間較分批滅菌注明顯減少，所以縮短了發(fā)酵罐的占用周期，從而提高了它的利用率；③由于蒸汽負(fù)荷均勻，故提高了鍋爐的利用率；④適宜于自動(dòng)化操作；⑤降低了操作人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。,影響加壓蒸汽滅菌效果的因素,（1）滅菌物體含菌量的影響（2）滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度的影響（3）滅菌對(duì)象pH的影響（4）滅菌對(duì)象的體積（5）加熱與散熱速度,,（1）滅菌物體含菌量的影響天然原料尤其是麩皮等植物性原料配成的培養(yǎng)基，一般含菌量較高，而用純粹化學(xué)試劑

13、配制成的組合培養(yǎng)基，含菌量低。,,（2）滅菌鍋內(nèi)空氣排除程度的影響檢驗(yàn)滅菌鍋內(nèi)空氣排除度，可采用多種方法。最好的辦法是滅菌鍋上同時(shí)裝有壓力表和溫度計(jì)，其次是將待測(cè)氣體通過橡膠管引入深層冷水中，如只聽到“撲撲”聲而未見有氣泡冒出，也可證明鍋內(nèi)已是純蒸汽了。,,（3）滅菌對(duì)象pH的影響（4）滅菌對(duì)象的體積要防止用常規(guī)的壓力和時(shí)間在加壓滅菌鍋內(nèi)進(jìn)行大容量培養(yǎng)基的滅菌。（5）加熱與散熱速度這兩段也對(duì)滅菌效果和培養(yǎng)基成分發(fā)生影響。為了使

14、科學(xué)研究的結(jié)果有良好的重演性，在滅菌操作中對(duì)這些技術(shù)細(xì)節(jié)都應(yīng)加以注意。,（三）高溫對(duì)培養(yǎng)基成分的有害影響及其防止,消除高溫有害影響的措施：,（1）采用特殊加熱滅菌法 （2）對(duì)易破壞的含糖培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，應(yīng)先將糖液與其他成分分別滅菌后再合并。（3）對(duì)含Ca2+或Fe3+的培養(yǎng)基與磷酸鹽先作分別滅菌，然后再混合，就不易形成磷酸鹽沉淀。,,（4）對(duì)含有在高溫下易破壞成分的培養(yǎng)基（如含糖組合培養(yǎng)基）可進(jìn)行低壓滅菌（在112℃即0.57kg

15、／cm2或8磅／英寸2下滅菌15min）或間歇滅菌。（5）在大規(guī)模發(fā)酵工業(yè)中，可采用連續(xù)加壓滅菌法進(jìn)行培養(yǎng)基的滅菌。,1. 高壓蒸汽滅菌設(shè)備 2．常壓蒸汽滅菌鍋,（四）滅菌設(shè)備,1.高壓蒸汽滅菌設(shè)備,手提式滅菌鍋：容量小，多用于母種培養(yǎng)基滅菌。立式或臥式滅菌鍋：較大，多用于原種或少量栽培種培養(yǎng)基的滅菌，一般能裝幾十瓶或幾百瓶。滅菌柜：要和蒸汽鍋爐配套，用于大量的原種和栽培種培養(yǎng)基的滅菌，一次能裝幾百至幾千瓶(袋)。但投

16、資太大，適合大型菌種場(chǎng)使用。,,,2．常壓蒸汽滅菌鍋    常壓蒸汽滅菌鍋是用鐵鍋、磚、水泥砌成的，造價(jià)低，適于一般生產(chǎn)單位和專業(yè)戶使用。大小可根據(jù)需要而定，但最大的鍋每次裝料也最好不超過500Kg。 3．烘箱   烘箱主要是用于玻璃器皿的干燥和滅菌，也可用于其它物品烘干。,二、射線滅菌,射線滅菌：是用紫外線、高能電磁波或放射性物質(zhì)產(chǎn)生的高能粒子進(jìn)行滅菌的方法。 常用

17、的方法：波長為2537A°的紫外線，多用于表面及空氣消毒。 0.06～1.4A°的X射線。 C060產(chǎn)生的γ射線。 微波滅菌等。,三、化學(xué)殺菌劑或制菌劑,（一）表面消毒劑,表面消毒劑：是指對(duì)一切活細(xì)胞都有毒性，不能用作活細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)治療用的化學(xué)藥劑。常用消毒劑的種類很多，它們的殺菌強(qiáng)度各不相同。但幾乎都有一個(gè)共同規(guī)律，即當(dāng)其在極低濃度時(shí)，常常會(huì)對(duì)微生物的生命活動(dòng)起刺激作用，隨著濃度逐漸增高，就相繼出現(xiàn)制菌和

18、殺菌作用，因而形成一個(gè)連續(xù)的作用譜。適用：環(huán)境以及物體表面的消毒．,（二）石炭酸系數(shù),為比較各種表面消毒劑的相對(duì)殺菌強(qiáng)度，常采用在臨床上最早使用的消毒劑——石炭酸作為比較的標(biāo)準(zhǔn)，并提出了石炭酸系數(shù)這一指標(biāo)。石炭酸系數(shù)：指在一定時(shí)間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時(shí)間為10min，而供試菌定為Salmonellatyphi（傷寒沙門氏菌）。,,四、過濾除菌,過濾除菌：將液體或氣體

19、用微孔薄膜過濾，使大于孔徑的細(xì)菌等微生物顆粒阻留，從而達(dá)到除菌目的。適用：澄清流體（如氣體和液體）的除菌熱敏性培養(yǎng)基的除菌工業(yè)生產(chǎn)中用于制備無菌空氣產(chǎn)品提取過程中處理料液而獲得無菌產(chǎn)品（尤其適合對(duì)熱不穩(wěn)定的物質(zhì)）。在實(shí)際生產(chǎn)中，以上幾種方法有時(shí)根據(jù)情況可結(jié)合使用。如制備培養(yǎng)基時(shí)，其中一些成分對(duì)熱敏感（如氨基酸、維生素等）就要用過濾方法除菌。而其它物質(zhì)可用蒸汽滅菌，最后合并使用。,,目前，大多實(shí)驗(yàn)室采用微孔濾膜濾器除菌。關(guān)鍵步

20、驟是安裝濾膜及無菌過濾過程。濾膜過濾裝置:燒結(jié)玻璃濾板過濾器、石棉板過濾器（Seitz濾器）、素?zé)蛇^濾器以及硅藻土過濾器等。過濾除菌的缺點(diǎn)：是無法去除其中的病毒和噬菌體。,,常見的過濾器濾膜孔徑：0.22、0.45µm。可以攔截的微生物：細(xì)菌、放線菌、酵母菌、霉菌。除病毒需要的濾膜孔徑：0.04µm。,醋酸纖維素膜過濾器攔截的 大腸桿菌圖片,板式膜分離器（實(shí)驗(yàn)室用）,中空纖維膜分離器（實(shí)

21、驗(yàn)室用）,中空纖維膜分離器（工業(yè)用）,第三節(jié)  培養(yǎng)基與發(fā)酵設(shè)備的滅菌,培養(yǎng)基與設(shè)備滅菌的方法（p129-137） ——高壓蒸汽濕熱滅菌法一、濕熱滅菌的基本原理二、影響培養(yǎng)基滅菌的因素三、滅菌的實(shí)際操作,原理：濕熱滅菌是直接用蒸汽滅菌。蒸汽冷凝時(shí)釋放大量潛熱，并具有強(qiáng)大的穿透力，在高溫和水存在時(shí)，微生物細(xì)胞中的蛋白質(zhì)極易發(fā)生不可逆的凝固性變性，致使微生物在短

22、時(shí)間內(nèi)死亡。致死溫度：殺死微生物的極限溫度。致死時(shí)間：殺死全部微生物所需的時(shí)間。由于濕熱滅菌有經(jīng)濟(jì)和快速等特點(diǎn)，因此被廣泛用于工業(yè)生產(chǎn)。,一、濕熱滅菌的基本原理,,用蒸汽加熱的方法對(duì)培養(yǎng)基滅菌的要求:既要達(dá)到一定的滅菌程度。 又要盡量減少營養(yǎng)成分的破壞。,（一）理論滅菌時(shí)間,某些分子的分解和分子內(nèi)部的重新排列的反應(yīng)屬于單分子反應(yīng)。雜菌雖然是一個(gè)復(fù)雜的高分子體系，但其受熱被殺死，主要原因是高溫能使蛋白質(zhì)變性，這種反應(yīng)屬于單分子

23、反應(yīng)，因此，雜菌在一定溫度下受熱死亡也遵循單分子反應(yīng)方程。,微生物受熱死亡的定律——對(duì)數(shù)殘留定律：,計(jì)算滅菌時(shí)間的基本公式——對(duì)數(shù)殘留方程： t =(2.303/k)·log(No/Nt) t---滅菌時(shí)間（s） k---滅菌反應(yīng)速度常數(shù)，與菌的種類和滅菌溫度有關(guān)（s－１） No---滅菌開始時(shí)，培養(yǎng)基中雜菌個(gè)數(shù)（個(gè)／ml） ---經(jīng)過滅菌時(shí)間t后，殘存活菌個(gè)數(shù)（個(gè)／ml） 滅菌時(shí)間與污染程度（No）、滅菌程度（

24、Nt）和滅菌反應(yīng)速度常數(shù)（k）有關(guān)。滅菌時(shí)間和溫度呈反比關(guān)系。（p 130）,（二）滅菌溫度與滅菌反應(yīng)速度常數(shù)的關(guān)系,滅菌溫度與滅菌反應(yīng)速度常數(shù)的關(guān)系——阿侖烏斯定律： k=Ae-E/RT K——滅菌反應(yīng)速度常數(shù)（ s-1）A——阿侖烏斯常數(shù)（s-1） E——活化能（J／mol）R——?dú)怏w常數(shù) 4.1868×1.98J／（ mol·K） T——絕對(duì)溫度（K） 滅菌溫度越低，K值越小，滅菌時(shí)間越長；反

25、之，滅菌溫度越高，K值越大，則滅菌時(shí)間越短。（p130-131）,,殺死細(xì)菌和芽孢的溫度和時(shí)間：一般根據(jù)試驗(yàn)確定?；蛘吒鶕?jù)推算確定。p131,二、影響培養(yǎng)基滅菌的因素(p134-135),1、培養(yǎng)基成分 2、培養(yǎng)基的物理狀態(tài)3、培養(yǎng)基pH值的影響4、微生物細(xì)胞含水量5、培養(yǎng)基中微生物的性質(zhì)與數(shù)量6、冷空氣排除情況7、泡沫8、攪拌,1、培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)基的成分中，油脂、糖類、蛋白質(zhì)都是傳熱的不良介質(zhì)，會(huì)增加微生物的

26、耐熱性，使滅菌困難。濃度較高的培養(yǎng)基相對(duì)需要較高溫度和較長時(shí)間滅菌。高濃度的鹽類，色素則削弱其耐熱性，故較易滅菌。天然培養(yǎng)基不易滅菌，而化學(xué)合成培養(yǎng)基較易滅菌。,2、培養(yǎng)基的物理狀態(tài),培養(yǎng)基中的顆粒物質(zhì)大，滅菌困難，反之，滅菌容易。一般說來，含有小于1mm顆粒的培養(yǎng)基對(duì)滅菌影響不大。但在培養(yǎng)基混有較大顆粒，特別是存在凝結(jié)成團(tuán)的膠體時(shí)，會(huì)影響滅菌效果，必須過濾除去。,3、培養(yǎng)基的pH值,pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大：pH為6

27、.0～8.0時(shí)微生物最不易死亡pH＜6.0時(shí)，氫離子易滲入微生物的細(xì)胞內(nèi)，促使其死亡，縮短滅菌時(shí)間。培養(yǎng)基pH與滅菌時(shí)間的關(guān)系見p134表5-4。,4、微生物細(xì)胞含水量,微生物細(xì)胞含水量越少，越耐熱，滅菌時(shí)間越長。孢子、芽孢的含水量少，要長時(shí)間，高溫才能將其殺死。,5、微生物性質(zhì)與數(shù)量,微生物的種類不同，耐熱情況不同。因此，采用的滅菌溫度不同。 細(xì)菌、酵母菌的營養(yǎng)體、霉菌的菌絲體對(duì)熱敏感；放線菌、酵母菌、霉菌的孢子，細(xì)菌的芽孢等

28、，對(duì)熱的抵抗力強(qiáng)。處于不同生長時(shí)期的微生物耐熱不同，采用的溫度不同。數(shù)量多滅菌的時(shí)間長，含芽孢滅菌的時(shí)間長。,6、冷空氣排除情況,高壓蒸汽滅菌鍋中的冷空氣對(duì)滅菌效果影響很大。原因：冷空氣導(dǎo)熱性能差。降低高壓鍋內(nèi)的蒸汽分壓使之不能達(dá)到應(yīng)有的溫度。因此，滅菌器內(nèi)的冷空氣一定要排除徹底，否則高壓鍋內(nèi)的實(shí)際溫度要低于壓力表所對(duì)應(yīng)的溫度，達(dá)不到滅菌效果?？諝馀懦潭扰c溫度的關(guān)系，見p135表5-6。,7、泡沫,泡沫中的空氣形成隔熱層

29、，使傳熱困難，所以要消泡。,8、攪拌,攪拌的作用：不至于造成局部過熱或滅菌死角的情況，在保證不過多的破壞培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的前提下，達(dá)到徹底滅菌的目的。,三、滅菌的實(shí)際操作 （p131-137）,（一）發(fā)酵罐和液體培養(yǎng)基的滅菌（二）固體培養(yǎng)基的滅菌（三）其他設(shè)備的滅菌,（一）發(fā)酵罐和液體培養(yǎng)基的 滅菌,發(fā)酵罐滅菌包括： 種子罐、發(fā)酵罐、計(jì)量罐、補(bǔ)料罐等的空罐滅菌及管道滅菌等。滅菌的

30、方法：發(fā)酵罐的滅菌方法：空消、實(shí)消液體培養(yǎng)基的滅菌方法：分批滅菌（實(shí)消）、連續(xù)滅菌（連消）滅菌具體的方法：１、空罐滅菌（空消）2、實(shí)罐滅菌（實(shí)消，分批滅菌）3、連續(xù)滅菌（連消）,（一）發(fā)酵罐和液體培養(yǎng)基的 滅菌,發(fā)酵罐滅菌包括： 種子罐、發(fā)酵罐、計(jì)量罐、補(bǔ)料罐等的空罐滅菌及管道滅菌等。滅菌的方法：發(fā)酵罐的滅菌方法：空消、實(shí)消液體培養(yǎng)基的滅菌方法：分批滅菌（實(shí)消）、連續(xù)滅菌（連消）滅菌具

31、體的方法：１、空罐滅菌（空消）2、實(shí)罐滅菌（實(shí)消，分批滅菌）3、連續(xù)滅菌（連消）,１、空罐滅菌（空消） p137,空罐滅菌：無論是種子罐、發(fā)酵罐、還是尿素（或液氨）罐、消泡罐，當(dāng)培養(yǎng)基（或物料）尚未進(jìn)罐前對(duì)罐進(jìn)行預(yù)先滅菌，為空罐滅菌。方法：一般從管道通入蒸汽，使罐內(nèi)壓力為0.147MPa，維持40min，滅菌結(jié)束，關(guān)閉蒸汽，在保溫結(jié)束后，關(guān)鍵是隨即通入無菌空氣，使容器保持正壓（0.098MPa） ，防止形成真空而吸入帶菌的

32、空氣。,,空罐滅菌的特點(diǎn)：為了殺死所有微生物特別是耐熱的的芽孢，空罐滅菌要求溫度較高，滅菌時(shí)間較長，只有這樣才能殺死設(shè)備中各死角殘存的雜菌或芽孢。,2、實(shí)罐滅菌（分批滅菌） p131-132,實(shí)罐滅菌： 將培養(yǎng)基置于發(fā)酵罐中用蒸汽加熱，達(dá)到預(yù)定滅菌溫度后，維持一定時(shí)間，再冷卻到接種溫度，然后接種發(fā)酵的滅菌方法，又稱分批滅菌、間歇滅菌。即發(fā)酵罐、種子罐等和培養(yǎng)基一起的滅菌。操作要求： 為達(dá)到良好的滅菌效果，不留死角，應(yīng)嚴(yán)格按

33、照操作規(guī)程進(jìn)行操作。它包括升溫、保溫、降溫三個(gè)階段。 適用： 中小型發(fā)酵罐和種子罐的滅菌。,實(shí)罐滅菌的特點(diǎn)：（p132）,優(yōu)點(diǎn)：（1）不需專門滅菌設(shè)備，在發(fā)酵罐中滅菌即可。（2）投入少，操作簡單。 （3）滅菌效果可靠，對(duì)蒸汽要求低，一般（3～4）×10５ Pa（表壓）即可。滅菌標(biāo)準(zhǔn)是121℃，15～30min。（4）適合含有固體顆粒、較多泡沫、粘度大的培養(yǎng)基的滅菌。缺點(diǎn)：（1）易發(fā)生過熱破壞培養(yǎng)基營養(yǎng)的現(xiàn)象。

34、（2）能耗增加。（3）發(fā)酵周期延長。（4）降低發(fā)酵罐的利用率。,3、連續(xù)滅菌（連消） p132-133,連消：液體培養(yǎng)基的連續(xù)滅菌又稱連消。就是將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐輸送的同時(shí)進(jìn)行加熱、保溫和冷卻的過程，從而達(dá)到滅菌的效果。適用：發(fā)酵培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基、補(bǔ)料等液體培養(yǎng)基滅菌。,連續(xù)滅菌的特點(diǎn)： （p132-133）,優(yōu)點(diǎn)：（1）培養(yǎng)液受熱時(shí)間短，既能達(dá)滅菌要求又能減少培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的破壞。（2）在培養(yǎng)基連續(xù)滅菌

35、過程中，蒸汽用量平衡，但蒸汽壓力一般要求高于5 × 10 ５Pa（表壓）。滅菌標(biāo)準(zhǔn)是126-132℃，5-8min。（3）設(shè)備利用率高，適于自動(dòng)控制。缺點(diǎn)：（1）所用設(shè)備多而復(fù)雜，投資較大。（2）染菌機(jī)會(huì)大。（3）不適合含有大量固體顆粒培養(yǎng)基的滅菌。,培養(yǎng)基連續(xù)滅菌的主要設(shè)備：,加熱器（連消塔）維持罐（或管）冷卻器（噴淋或真空冷卻器）,幾種加熱器：,培養(yǎng)基連消工藝流程圖：（p133）,,噴射加熱連續(xù)滅菌流程：,特

36、點(diǎn):蒸汽直接噴入生的培養(yǎng)液，溫度幾乎直接上升到預(yù)定殺菌溫度，由保溫段管子的長度來保證必要的殺菌時(shí)間。,薄板換熱器連續(xù)滅菌流程：,,特點(diǎn)：效率高，利用冷的培養(yǎng)液作冷卻劑。既冷卻了熱的培養(yǎng)基又預(yù)熱了冷的培養(yǎng)液，節(jié)約用水和蒸汽。并且可在20S內(nèi)達(dá)到殺菌溫度，經(jīng)保溫段保持必要的殺菌時(shí)間，然后在板式熱交換器另一段，20S內(nèi)冷卻到發(fā)酵溫度。,,熱交換器,水20℃,31 ℃,進(jìn)料35 ℃,120 ℃,120 ℃,147 ℃,120 ℃,55 ℃,出料

37、35 ℃,100 ℃,（二）固體培養(yǎng)基的滅菌 （p133）,1、方法：采用旋轉(zhuǎn)蒸煮鍋也稱轉(zhuǎn)鼓式滅菌器（滅菌蒸汽壓力0.098MPa，維持20～30min）進(jìn)行滅菌。2、用途：固體曲、固體發(fā)酵原料的滅菌。3、固體培養(yǎng)基的特點(diǎn)：呈片狀或粒狀，不易翻動(dòng)，吸水后加熱易成團(tuán)，熱傳遞性能差，冷卻困難。,4、旋轉(zhuǎn)蒸煮鍋結(jié)構(gòu),有單頭（出口）和雙頭兩種，由鋼板焊制能承受一定壓力。鍋中心有帶孔空心橫軸， 蒸汽沿軸中心通入鍋內(nèi)加熱；

38、滅菌結(jié)束后用真空泵抽氣， 以降壓和降溫。軸裝在支架兩端的 軸承中，借齒輪 轉(zhuǎn)動(dòng)（0.5～1r/min）。,（三）其他設(shè)備及物品的滅菌（p137）,1、玻璃器皿及用具的滅菌： 壓力為0.098MPa，維持30～60min。2、空氣總過濾器和分過濾器滅菌： 壓力為0.174MPa，維持2h，滅菌完畢，通入壓縮空氣吹干。3、消泡劑滅菌： 121℃，保溫30min。4、尿素溶液滅菌： 105℃

39、，保溫5min。淀粉料液的滅菌：121 ℃，保溫30min。5、各管路的滅菌：0.3 ～0.45MPa，保溫1h。,第四節(jié) 空氣的除菌（p137-148）,一、空氣除菌的原因二、空氣除菌的方法三、介質(zhì)過濾除菌四、空氣介質(zhì)過濾除菌設(shè)備五、發(fā)酵生產(chǎn)中空氣凈化的工藝流程,一、空氣除菌的原因,（一）空氣中微生物的分布空氣中微生物的含量和種類，隨地區(qū)，季節(jié)和空氣中灰塵粒子多少，以及人們的活動(dòng)情況而異。北方氣候干燥，寒冷，空氣

40、中的含菌量較多，離地面越高，含菌量越少；一般每升高10m，空氣中的含菌量就降低一個(gè)數(shù)量級(jí)；城市的空氣中含菌量較多，農(nóng)村的空氣中含菌量較少，一般城市空氣中雜菌數(shù)為103～104個(gè)／m3 。,,空氣中的微生物種類:以細(xì)菌和細(xì)菌芽胞較多，也有酵母，霉菌和病毒。這些微生物大小不一，一般附著在空氣中的灰塵上或霧滴上。灰塵粒子的平均大小約0.6µm左右，所以空氣除菌主要是去除空氣中的微粒(0.6～1µm）,（二）空氣除菌的

41、原因,1.空氣中存在有大量的各種各樣的微生物 （工業(yè)設(shè)計(jì)中常以微生物濃度104個(gè)/m3作為空氣的污染指標(biāo)。）2.空氣中存在著潤滑油、灰塵顆粒、水蒸汽等。（由于深層發(fā)酵所用空氣需一定壓力，空氣經(jīng)壓縮機(jī)壓縮后，將夾帶大量的油滴和水霧。如它們進(jìn)入過濾介質(zhì)的纖維間，將阻塞通道，甚至使過濾介質(zhì)結(jié)塊，完全喪失其除菌作用，所以要除去這些物質(zhì)。）,二、空氣除菌的方法,（一）工業(yè)發(fā)酵對(duì)空氣質(zhì)量的要求隨發(fā)酵產(chǎn)品和菌種不同而異：半固體制曲和酵母生產(chǎn)中無

42、菌要求不十分嚴(yán)格，一般無需復(fù)雜的空氣凈化處理。密閉的深層通氣發(fā)酵需嚴(yán)格的純凈培養(yǎng)，進(jìn)入發(fā)酵罐前空氣必須進(jìn)行冷卻、脫水、脫油和過濾除菌等處理（如氨基酸、抗生素等）。同一工廠的不同生產(chǎn)區(qū)域（環(huán)節(jié)）有不同的空氣無菌度的要求。,（二）發(fā)酵對(duì)空氣無菌程度的要求,好氣性發(fā)酵過程中需要大量的無菌空氣，空氣要作到絕對(duì)無菌在目前是不可能的，也是不經(jīng)濟(jì)的。無菌空氣：通過除菌處理使空氣中含菌量降到零或者極低從而使污染的可能性降至極小。發(fā)酵對(duì)無菌空氣的

43、要求：無菌，無灰塵，無雜質(zhì)，無水，無油，正壓等幾項(xiàng)指標(biāo)。發(fā)酵對(duì)無菌空氣的無菌程度要求：只要在發(fā)酵過程中不因無菌空氣染菌，而造成損失即可。一般按染菌率計(jì)算，在工程設(shè)計(jì)中一般要求染菌率為10-3 即1000次發(fā)酵無菌空氣使用周期中只允許一次染菌。,,一般空氣無菌程度是用空氣潔凈度表示?？諝鉂崈舳龋簼崈舡h(huán)境中空氣含塵量多少的程度?？諝鉂崈舳鹊母叩褪怯每諝鉂崈舳燃?jí)別來區(qū)分的?？諝鉂崈舳燃?jí)別是用操作時(shí)間內(nèi)空氣的計(jì)數(shù)含塵量表示。環(huán)境空

44、氣的潔凈程度：p138,（三）空氣除菌的方法（p141-146）,空氣除菌：就是除去或殺死空氣中的微生物。常用的方法：加熱殺菌輻射殺菌 靜電除菌過濾除菌,1、加熱滅菌,原理：基于加熱后微生物體內(nèi)的蛋白（酶）熱變性而得以實(shí)現(xiàn)。熱空氣進(jìn)入培養(yǎng)系統(tǒng)之前，一般均需用壓縮機(jī)壓縮，提高壓力?？諝鈮嚎s后溫度能達(dá)到200℃以上，保持一定時(shí)間后，便可實(shí)行干熱殺菌。,熱殺菌：,空氣熱滅菌流程示意圖1-空氣壓縮機(jī) 2-粗過濾器

45、 3-保溫管 4-貯氣罐 5-保溫罐 6-列管式冷卻器 7-渦輪壓縮機(jī) 8-預(yù)熱器 9-粗過濾器 10-空氣吸入塔,,利用空氣壓縮時(shí)所產(chǎn)生的熱量進(jìn)行滅菌的原理對(duì)制備大量無菌空氣有特別意義。實(shí)際應(yīng)用中需考慮培養(yǎng)裝置與空氣壓縮機(jī)的相對(duì)位置，連接壓縮機(jī)與培養(yǎng)裝置的管道的滅菌以及管道長度等。熱殺菌流程見p141 。,2．輻射滅菌法,原理：2537Å波長的紫外線具有極強(qiáng)烈的殺菌效力，它的主要作用是使微生物的DNA分子產(chǎn)

46、生的胸腺嘧啶的二聚體，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。應(yīng)用：表面滅菌、無菌室滅菌。無菌室常用的紫外燈功率為30W，安裝在操作臺(tái)上方一米左右高處，每次照射15～30min既可。特點(diǎn)：紫外線有很強(qiáng)的殺菌力，但穿透力很弱，一張薄紙即可完全擋住紫外線，因此待滅菌物品必須置于紫外光直接照射下，而且在一定范圍內(nèi)作用強(qiáng)度與距離平方成反比。,超凈工作臺(tái),注意事項(xiàng)：,,此外，紫外線對(duì)人體組織有一定刺激作用，眼睛、皮膚受照射后會(huì)產(chǎn)生某些癥狀，所以工作人員在無菌室操作時(shí)

47、應(yīng)關(guān)閉紫外燈。 注意,3、靜電除菌,靜電除塵器可除去空氣中的水霧、油霧、塵埃，同時(shí)也除去微生物。原理：利用靜電引力來吸附帶電粒子而達(dá)到除塵滅菌目的。對(duì)于一些直徑小的微粒，所帶電荷小，不能被吸附而沉降。應(yīng)用：潔凈工作臺(tái)。,電 除 塵 電 源,靜電除塵器裝置圖：,4、介質(zhì)過濾除菌,介質(zhì)過濾除菌：是使空氣通過經(jīng)

48、高溫滅菌的介質(zhì)過濾層，將空氣中的微生物等顆粒阻截在介質(zhì)層中，而達(dá)到除菌的目的。特點(diǎn)：從可靠性、經(jīng)濟(jì)適用與便于控制等方面考慮，目前仍以介質(zhì)過濾法較好，也是大多數(shù)發(fā)酵廠廣泛采用的方法。,三、介質(zhì)過濾除菌 （p143-146）,（一）介質(zhì)過濾除菌的材料（二）介質(zhì)過濾除菌的原理（三）影響介質(zhì)過濾效率的因素（四）提高過濾除菌效率的措施,（一）介質(zhì)過濾除菌的材料（p143-145）,１、棉花：纖維細(xì)長，16～20μm，填充150～200k

49、g/m3。２、玻璃纖維：直徑8～19μm，直徑越小越好，但小易斷。缺點(diǎn)：更換時(shí)碎末飛揚(yáng)，過敏。３、活性炭：大表面，物理吸附，空氣阻力小，常夾帶在二層棉花中降低阻力，為整個(gè)過濾器的1/3～1/2。４、超細(xì)玻璃纖維紙:以攔截為主，直徑1～1.5μm，有較高過濾效率。缺點(diǎn)為強(qiáng)度差，受溫后纖維松散。只用于分過濾器?？杉尤肽緷{纖維或其他纖維或采用樹脂并加疏松劑。,,５、石棉濾板：藍(lán)石棉20％加80％紙將混合打漿。溫強(qiáng)度大，過濾效率低，耐蒸氣

50、反復(fù)殺菌。 ６、燒結(jié)材料過濾介質(zhì)：聚乙烯醇過濾板。 ７、新型過濾介質(zhì) ：微孔濾膜。,（二）介質(zhì)過濾除菌的原理（p145）,1、概述 目前發(fā)酵工廠采用的空氣過濾設(shè)備大多數(shù)是傳統(tǒng)的深層過濾設(shè)備，濾層厚度一般為1～2米，所用的過濾介質(zhì)一般是棉花、活性炭，也有采用玻璃纖維、焦炭等。對(duì)不同的材料，材料的不同規(guī)格，材料的填充情況不同，都會(huì)得到不同的過濾效果。為了制取適合要求的無菌空氣，就得深入研究深層過濾的各種關(guān)系。,2、深層過濾原理,深層

51、過濾所用的過濾介質(zhì)——棉花的纖維直徑一般為16～20μm。充填系數(shù)為8%時(shí)，棉花纖維所形成網(wǎng)格的孔隙為20～50μm，微粒大小為(0.5～2μm)。過濾除菌原理:深層過濾所用介質(zhì)的間隙，一般大于固體顆粒（微生物細(xì)胞），但空氣中的菌體還能夠除去的原因是：微粒隨氣流通過濾層時(shí)，濾層纖維所形成的網(wǎng)格阻礙氣流前進(jìn)，使氣流出現(xiàn)無數(shù)次改變運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)方向，繞過纖維前進(jìn)。這些改變引起微粒以對(duì)濾層纖維產(chǎn)生慣性沖擊、阻攔、重力沉降、布朗擴(kuò)散、靜電吸

52、引等作用而把微粒滯留在纖維表面上。,（1）布朗擴(kuò)散截留作用,布朗擴(kuò)散：直徑很小的微粒在很慢的氣流中產(chǎn)生的不規(guī)則的直線運(yùn)轉(zhuǎn)稱為布朗擴(kuò)散。作用的條件：氣流速度很慢、纖維間隙較小。作用的結(jié)果：增加了微粒與纖維的接觸滯留機(jī)會(huì)，被截留在纖維上。,（2）攔截截留作用,在慣性截留作用為零的氣流速度以下（臨界氣流速度），當(dāng)微生物等微粒隨氣流慢慢靠近纖維時(shí)，受纖維所阻改變氣流方向，繞過纖維前進(jìn)，在纖維周邊形成一層邊界滯留區(qū)。滯留區(qū)的速度更慢。

53、進(jìn)入滯留區(qū)的微粒就容易被纖維黏附截留。,（3）慣性撞擊截留作用,微粒隨氣流通過濾層時(shí)，濾層纖維縱橫交錯(cuò)所形成的網(wǎng)格阻礙氣流前進(jìn)，使氣流不斷改變運(yùn)動(dòng)速度和運(yùn)動(dòng)方向。由于微生物顆粒的慣性大于空氣，所以當(dāng)空氣流遇阻而繞道前進(jìn)時(shí)，微生物顆粒由于不能及時(shí)的改變它的運(yùn)動(dòng)方向，結(jié)果就撞擊纖維并被截留在纖維的表面。,（4）重力沉降作用,機(jī)理：重力沉降是一個(gè)穩(wěn)定的分離作用，當(dāng)微粒所受的重力大于氣流對(duì)它的拖帶力時(shí)，微粒就容易沉降。就單一的重力沉降情況下，

54、大顆粒比小顆粒作用顯著，對(duì)于小顆粒只有在氣流速度很慢時(shí)才起作用。一般它是與攔截作用相配合的，即在纖維的邊界滯留區(qū)內(nèi)，微粒的沉降作用提高了攔截滯留的捕集效率。,（5）靜電吸附作用,機(jī)理：干空氣對(duì)非導(dǎo)體的物質(zhì)相對(duì)運(yùn)動(dòng)磨擦?xí)r，會(huì)產(chǎn)生誘導(dǎo)電荷，纖維和樹脂處理過的纖維，尤其是一些合成纖維更為顯著。這些帶電的微粒會(huì)受帶異性電荷的物體所吸引而沉降。懸浮在空氣中的微生物微粒大多帶有不同的電荷。如枯草桿菌孢子20%帶正電荷，20%帶負(fù)電荷，15%中性

55、，這些帶電的微粒會(huì)受帶異性電荷的物體所吸引而沉降。,,此外，表面吸附也歸屬于這個(gè)范疇，如活性炭的大部分過濾效能應(yīng)是表面吸附的作用。,（三）影響介質(zhì)過濾效率的因素,1、介質(zhì)纖維直徑介質(zhì)過濾效率與介質(zhì)纖維直徑關(guān)系很大，在其他條件相同時(shí)，介質(zhì)纖維直徑越小，過濾效率越高。2、對(duì)于相同介質(zhì)，過濾效率與介質(zhì)濾層厚度、介質(zhì)填充密度和空氣流量有關(guān)。,（四）提高過濾除菌效率的措施,鑒于目前所采用的過濾介質(zhì)均需要干燥條件下才能進(jìn)行除菌，因此需要圍繞介質(zhì)

56、來提高除菌效率。（1）設(shè)計(jì)合理的空氣預(yù)處理設(shè)備，選擇合適的空氣凈化流程，以達(dá)到除油、水和雜質(zhì)的目的。（2）設(shè)計(jì)和安裝合理的空氣過濾器，選用除菌效率高的過濾介質(zhì)。（3）保證進(jìn)口空氣清潔度，如加強(qiáng)生產(chǎn)場(chǎng)地衛(wèi)生管理，正確選擇進(jìn)風(fēng)口，加強(qiáng)空氣壓縮前的預(yù)處理。（4）降低進(jìn)入空氣過濾器的空氣相對(duì)濕度，如使用無油潤滑的空氣壓縮機(jī)，加強(qiáng)空氣冷卻和去油，提高進(jìn)入過濾器的空氣溫度。,（五）過濾器失效,壓縮空氣進(jìn)入過濾器后便引起活性炭顆粒之間相互頂撞

57、與摩擦，久而成為粉末(灰化)，活性炭的體積也逐漸變小，于是過濾器內(nèi)的空間逐漸增大，到達(dá)一定程度時(shí)，便會(huì)發(fā)生棉花成90°翻身現(xiàn)象。這樣空氣便會(huì)未經(jīng)過濾而進(jìn)入罐內(nèi)，引起染菌。,,棉花經(jīng)過多次加熱滅菌后，顏色逐漸變深，靠近過濾器壁的棉花，因經(jīng)受夾層蒸汽的烤干，受熱更為劇烈，更容易變成粉末，而被空氣帶走，造成過濾層有縫隙，使過濾層疏松而漏風(fēng)，甚至還因過高的壓力和過長時(shí)間的烘烤而引起棉花活性炭著火的事故。因此，要注意更換棉花。,四、空

58、氣介質(zhì)過濾除菌設(shè)備,（一）采風(fēng)塔（二）粗過濾器（三）空氣壓縮機(jī)（四）空氣貯罐（五）空氣冷卻器（六）氣液分離器（七）空氣加熱器,高空取氣管：,高空取氣管是遠(yuǎn)離地面幾十米的管子。一般而言，地面附近空氣中所含的微生物和灰塵等均比高空空氣中含的多，據(jù)資料介紹，每升高10m，空氣中雜菌可降低一個(gè)數(shù)量級(jí)，因此從高空取氣要比從低空取氣有利得多。,粗過濾器,油浴洗滌空氣裝置,水霧除塵裝置,纖維介質(zhì)深層過濾器：,,,空氣貯罐,作用：消除壓縮

59、機(jī)排出空氣量的脈沖，維持穩(wěn)定的空氣壓力，同時(shí)也可以利用重力沉降作用分離部分油霧。,空氣冷卻器,常用的類型有：立式列管式熱交換器、沉浸式熱交換器、噴淋式熱交換器和板翹式熱交換器等。,氣液分離器,作用：將空氣中被冷凝成霧狀的水霧和油霧粒子除去的設(shè)備。 一般常用的有旋風(fēng)式和填料式。,氣液分離器,填料式分離器是利用各種填料如焦炭、活性炭、磁環(huán)、金屬絲網(wǎng)、塑料絲網(wǎng)等的慣性攔截作用分離空氣中水霧或油霧。,油水分離器：,原理：其內(nèi)部同時(shí)采用直接攔截

60、，慣性碰撞，布朗擴(kuò)散及凝聚等機(jī)理。功能：能有效地去除空氣中的水、油霧、塵埃。特點(diǎn)：內(nèi)部不銹鋼絲網(wǎng)可清洗，使用壽命長。,平板式過濾器(絲網(wǎng)分離器),出口 過濾介質(zhì)

61、 金屬絲網(wǎng)進(jìn)口 排污口,,,,五、發(fā)酵生產(chǎn)中空氣凈化的工藝流程,空氣→　高空取氣管→除塵器→　空氣壓縮機(jī)→　貯氣罐→ 一級(jí)冷卻器→　油水分離器→　二級(jí)分離器→ 除霧氣→ 加熱器→ 總過濾器 → 分過濾器→ 無菌空氣（p147-148）,（一）對(duì)空氣除菌流程的要求,要

62、制備較高無菌程度，具有一定壓力的無菌空氣，它的流程設(shè)備有空氣壓縮機(jī)。附屬設(shè)備要求盡量采用新技術(shù)，提高效率，減少設(shè)備，精簡設(shè)備投資、運(yùn)轉(zhuǎn)費(fèi)用和動(dòng)力消耗，簡便操作。流程的制訂就根據(jù)所在的地理、氣候環(huán)境和設(shè)備條件而考慮。,,在環(huán)境污染比較嚴(yán)重的地方：要考慮改變吸風(fēng)的條件，以降低過濾器的負(fù)荷，提高空氣的無菌程度；在溫暖潮濕的南方：要加強(qiáng)除水設(shè)施，以確保和發(fā)揮過濾器的最大除菌效率；在壓縮機(jī)耗油嚴(yán)重的設(shè)備流程中：則要加強(qiáng)消除油霧的污染等。,

63、（二）空氣除菌流程分析,要保持過濾器有比較高的過濾效率，應(yīng)維持一定的氣流速度和不受油、水的干擾。氣流速度可由操作來控制。要保持不受油、水干擾則要有一系列冷卻、分離、加熱的設(shè)備來保證空氣的相對(duì)濕度在50%～60%的條件下過濾。,（三）空氣凈化流程（p147）,一般流程：吸氣口吸入的空氣先經(jīng)過壓縮前的過濾。進(jìn)入空氣壓縮機(jī)（先升溫至120～150℃）。冷卻（20～25 ℃），除去油、水，再加熱至30～35 ℃。最后通過總過濾器和分

64、過濾器除菌，獲得潔凈度、壓力、溫度和流量都符合要求的無菌空氣。,1、空氣壓縮冷卻過濾流程,空氣壓縮冷卻過濾流程1-粗過濾器 2-空氣壓縮機(jī) 3-貯罐 4-冷卻器 5-過濾器,2、高空采風(fēng)、兩次冷卻、兩次分油水、 加熱過濾除菌流程,特點(diǎn) ：兩次冷卻、兩次分油水、適當(dāng)加熱?？諝獾谝淮卫鋮s到30～35℃，第二級(jí)冷卻至20～25℃，經(jīng)分水后加熱到30～35℃，因?yàn)闇囟壬?，相?duì)濕度下降。,,3.高效前置過濾空氣除菌流程,主要

65、是在空氣進(jìn)入壓縮機(jī)之前，先采用高效率的前置過濾設(shè)備，進(jìn)行過濾，使進(jìn)入主過濾器的空氣的無菌程度已經(jīng)相當(dāng)高，再經(jīng)冷卻、分離，進(jìn)入主過濾器過濾，最終可獲得無菌程度很高的空氣。特點(diǎn)：先采用高效率的前置過濾設(shè)備，進(jìn)行過濾。,前置高效過濾除菌流程：,前置高效過濾除菌流程1-高效過濾器 2-空壓機(jī) 3-貯罐 4-冷卻器 5-絲網(wǎng)分離器 6-加熱器 7-過濾器,4、冷熱空氣直接混合式空氣除菌流程,特點(diǎn) ：省去一級(jí)冷卻和分離設(shè)備

66、及空氣再加熱設(shè)備，簡化了流程，使冷卻水用量也降低了。方法：壓縮空氣從貯罐出來分兩路，一部分進(jìn)冷卻器，經(jīng)分離器分離水、油霧后與另一部分未處理過的高溫壓縮空氣混合，使混合后的空氣溫度為30～35℃，相對(duì)濕度為50～60%。,冷熱空氣直接混合式空氣除菌流程：,冷熱空氣直接混合式：,小 結(jié)：,1、消毒與滅菌的意義和方法 （一般）2、培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備的滅菌 （重點(diǎn)） （1）   濕熱滅菌原理（重點(diǎn)）　　

67、識(shí)記：培養(yǎng)基及設(shè)備的主要滅菌方法。 　　領(lǐng)會(huì)：影響培養(yǎng)基滅菌的因素?！。?） 分批滅菌的設(shè)備操作（次重點(diǎn)）　　識(shí)記：分批滅菌的操作要點(diǎn)?！。?） 連續(xù)滅菌（次重點(diǎn)）　　領(lǐng)會(huì)：連續(xù)滅菌的優(yōu)點(diǎn)、連續(xù)滅菌流程及設(shè)備類型　　應(yīng)用：設(shè)計(jì)一種連續(xù)滅菌流程。,,3、空氣除菌 （重點(diǎn)） （1） 空氣除菌的方法（一般）　　領(lǐng)會(huì)：通風(fēng)發(fā)酵對(duì)無菌空氣的要求、空氣除菌的主要方法。 （2） 過濾除菌的機(jī)理（重點(diǎn)）　　識(shí)記：慣性捕集、擴(kuò)散捕集