利用反向線狀印跡及高通量技術(shù)分別檢測蜱體內(nèi)梨形蟲及全溝硬蜱體內(nèi)細(xì)菌研究.pdf

1、梨形蟲病是由頂復(fù)門、梨形蟲目，巴貝斯屬和泰勒屬的宿主特異性血液原蟲引起的原蟲病的總稱，巴貝斯屬和泰勒屬分別引起巴貝斯蟲病和泰勒蟲病。蜱是一類有害的吸血外寄生蟲，是梨形蟲病的主要傳播媒介。蜱可以通過直接的接觸和吸血過程，或者通過傳播細(xì)菌，原生動物或病毒病對宿主造成寄生性損傷。在熱帶和亞熱帶地區(qū)，梨形蟲病可導(dǎo)致家畜和野生動物的臨床障礙。這種疾病造成的經(jīng)濟(jì)影響包括：肉類和奶制品產(chǎn)量降低，流產(chǎn)，生育能力降低，較高的預(yù)防與治療成本，以及對全球動物

2、和動物制品行業(yè)造成數(shù)十億美元的經(jīng)濟(jì)損失。本文的研究結(jié)果包括兩個方面：
　　1.利用建立的反向線狀印跡雜交技術(shù)對采自中國不同省份草地或動物體表的不同蜱種所攜帶的梨形蟲蟲種進(jìn)行調(diào)查，2015年三月至六月對樣品進(jìn)行收集。結(jié)果表明，RLB檢測方法具有高度的特異性，可以區(qū)分不同的梨形蟲蟲種，通過構(gòu)建的重組質(zhì)粒，計算其敏感性可達(dá)到102拷貝/μL。草地上收集的蜱樣品可檢測到單一或混合感染的情況，環(huán)形泰勒蟲(33/408,8.1％)和新疆巴貝斯

3、蟲未定種(30/408,7.4%)的檢出率最高。利用建立的RLB檢測方法，對動物體表收集的蜱樣品評估傳播牛羊巴貝斯蟲和泰勒蟲蟲種的潛在威脅。結(jié)果顯示單一的環(huán)形泰勒蟲(118/652,18.1%)感染和呂氏泰勒蟲+中華泰勒蟲(18/652,2.8%)混合感染的情況最為常見。許多蜱種所攜帶病原范圍比以前報道的更廣。
　　2.利用建立的反向線狀印跡雜交技術(shù)對采自我國黑龍江省的25只全溝硬蜱攜帶梨形蟲種進(jìn)行調(diào)查，同時在16S rRNA基因

4、V4高變區(qū)域的基礎(chǔ)上，利用高通量測序法對25只全溝硬蜱的細(xì)菌種類分布進(jìn)行分析研究。RLB檢測結(jié)果顯示，所檢測的全溝硬蜱沒有發(fā)現(xiàn)感染或攜帶任何泰勒蟲或巴貝斯蟲蟲種。通過全溝硬蜱樣品的高通量測序顯示，檢測到200多個細(xì)菌屬，其中一些對動物或人類具有潛在的致病重要性，一些細(xì)菌屬可對環(huán)境造成污染。根據(jù)測序結(jié)果，我們發(fā)現(xiàn)了立克次氏體和伯氏疏螺旋體這些對人和動物具有致病性的蜱傳細(xì)菌病原。
　　綜上所述，所建立的特異性RLB檢測方法可以同時檢測