第八章 實驗一寄生蟲糞便檢查法案例

1、實驗一,寄生蟲糞便檢查法,一、目的要求,掌握糞便中寄生蟲蟲卵檢查的飽和鹽水漂浮法；應(yīng)用顯微鏡觀察糞便中蟲卵的形態(tài)結(jié)構(gòu)。,二、方法概述,用以檢查蠕蟲卵、原蟲的包囊、滋養(yǎng)體和卵囊。方法簡便，連續(xù)作3次涂片，可提高檢出率。 1、蠕蟲卵檢查： 2、原蟲檢查：1）活滋養(yǎng)體檢查　　2）包囊的碘液染色檢查3）隱孢子蟲卵囊染色檢查：改良抗酸染色法,（一）直接涂片法,（二）浮聚法,原理：利用比重較大的液體，使原蟲包囊或蠕蟲卵上浮，

2、集中于液體表面。常用的方法有三種：1、飽和鹽水浮聚法2、硫酸鋅離心浮聚法3、蔗糖離心浮聚法,蟲卵比重與漂浮液比重,飽和鹽水漂浮法操作示意圖,自糞便不同處挑取如蠶豆大小的糞塊，置于盛有少量飽和鹽水的漂浮管中,2. 將糞便搗碎，與鹽水?dāng)噭?，再加飽和鹽水,3. 將滿時，改用滴管，加至略高于管口但不超出為止,4. 取潔凈載玻片一張蓋在管口上，靜止30分鐘左右,5. 如圖垂直向上提起載玻片,6. 敏捷地翻轉(zhuǎn)，覆以蓋片鏡檢,（三）沉淀法 原

3、蟲包囊和蠕蟲卵的比重大可沉集于水底，有助于提高檢出率。但比重較小的鉤蟲卵和某些原蟲包囊則效果較差。 1、自然沉淀法 2、離心沉淀法?。ㄋ模┢?沉淀法 該法的原理是利用糞便中各種蟲卵及糞渣中其它成份比重的差別，將不同比重的蟲卵分別集中進(jìn)行檢查，即先按漂浮法檢查比重較小的蟲卵，然后將管中上層液倒掉，取沉淀物檢查不能上浮而沉在下面的比重較大的卵，所以，該法可用于檢查比重大小各

4、異的寄生蟲卵。,（五）拭子檢查法適用于在肛周、皮膚產(chǎn)卵（蟯蟲），或常在肛門附近發(fā)現(xiàn)蟲卵（帶絳蟲）的蟲卵檢查法。1、棉簽拭子法2、透明膠紙法,漏斗幼蟲分離法(貝爾曼法)。取糞便15-20g，放在漏斗內(nèi)的金屬篩上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一個小試管。加入40℃到淹沒糞球為止，靜置1-3小時。此時大部分幼蟲游走于水中，并沉淀于試管底部。取試管底部沉渣制成涂片鏡檢。平皿法。取被檢糞球3-4個，放于平皿中，加適量40℃溫水，浸泡10-

5、15min后，除去糞球，留下的液體在低倍顯微鏡下檢查。,（六）糞便內(nèi)蠕蟲幼蟲檢查法 1、幼蟲分離法：網(wǎng)尾線蟲、類圓線蟲 2、糞便內(nèi)蟲卵培養(yǎng)法：圓形線蟲目 3、毛蚴孵化法：,結(jié)腸小袋纖毛蟲Balantidium coli,十二指腸賈第蟲Giardia duodenalis,球蟲,隱孢子蟲,,肝片形吸蟲蟲卵,日本血吸蟲蟲卵,蛭形巨吻棘頭蟲,膜殼絳蟲蟲卵,犬復(fù)孔絳蟲卵

6、,豬帶絳蟲蟲卵,細(xì)粒棘球絳蟲蟲卵,莫尼茨絳蟲蟲卵,犬鞭蟲卵,鉤蟲卵,犬弓首蛔蟲卵,鴿毛細(xì)線蟲卵，球蟲卵囊,肉鴿蛔蟲卵,豬蛔蟲卵,測微尺的使用,通常的鏡臺測微尺是中央部分刻有精確等分線的載玻片，一般將lmm等分為100格，每格長l0μm，是專門用來校正目鏡測微尺的。,通常的目鏡測微尺是一塊圓形玻片，在玻片中央把5mm長度刻成50等分、把10 mm長度刻成100等分或?qū)?mm長度刻成100等分。,測微尺的使用,漏斗架2個/組；漏篩6個/組；

7、小燒杯（50ml）12個/組；500ml燒杯2個/組；100mL燒杯1個/組；青霉素瓶6個/組；離心管6個/組；滴管1個/人；飽和鹽水1瓶/組；甘油水1瓶/組；100mL量筒1個/組；小方瓷盤1個/組；擦鏡紙1平皿/組；小棉塊1份/組；載玻片、蓋玻片1份/組；離心機(jī)、小天平各1臺；鑷子2個/組；顯微鏡；試管架1個/組；動物糞便1份/班；50mL燒杯兩個用于配平。,一）、實驗用品,三、試驗內(nèi)容,1. 每2人操作1份飽和鹽水漂浮法─靜置濾液

8、 30分鐘；2. 直接涂片法（每2人操作1份）；3. 離心沉淀法（每2人操作1份）；4. 繼續(xù)“1”未完的操作。,二）實驗安排,六、注意事項1.高倍鏡下觀察必須加蓋玻片2.采用直接涂片法時，不要涂得太多，必須分散 開，均勻3.觀察寄生蟲卵前，需校對目鏡每格的長度；先在低倍鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)后換為高倍鏡4.使用離心機(jī)前，需配平離心管七、作業(yè)：繪制糞便樣品鏡檢看到的蟲卵八、思考題：糞便中蟲卵、卵囊的檢查需要注意那些問題