豬瘟疫苗的概述及制作過程

1、豬瘟疫苗的概述及制作過程,08動醫(yī)班 401宿舍,豬瘟疫苗生產(chǎn)歷程,1956—1957 豬瘟脾淋組織苗（濕苗）1958—1959 豬瘟脾淋組織苗（濕苗）1959—1963 豬瘟脾淋組織凍干苗1964—1971 豬瘟乳兔組織苗（濕苗） 豬瘟牛體反應(yīng)苗（濕苗）

2、1972—1973 豬瘟乳兔組織苗（濕苗） 豬瘟牛體反應(yīng)苗（濕苗）,1974—1975 豬瘟乳兔組織凍干苗1976—1981 豬瘟乳豬腎細胞凍干苗1981—1983 豬瘟乳兔組織凍干苗1982—1987 豬瘟羊腎細胞凍干苗1987—2002 豬瘟牛睪丸細胞凍干苗2002至今 豬瘟牛睪丸細胞凍干苗

3、 豬瘟脾淋組織凍干苗,豬瘟疫苗系列1.豬瘟細胞苗（1）普通苗（2）零免苗（3）精制苗（4）政府采購專用苗2.豬瘟脾淋苗（1）普通苗（2）政府采購專用苗,我國豬瘟的流行特點,流行范圍廣呈散發(fā)流行趨勢 發(fā)病年齡小，成年豬帶毒現(xiàn)象嚴(yán)重 非典型和繁殖障礙型豬瘟增多 免疫失敗現(xiàn)象嚴(yán)重 與豬藍耳病、豬園環(huán)病毒病、豬偽狂犬病、豬鏈球菌病、豬肺疫等并發(fā)或繼發(fā)感染,我國豬瘟疫

4、苗的特點,我國的豬瘟疫苗是用中國系豬瘟兔化弱毒株（簡稱C株）生產(chǎn)的，它是我國于20世紀(jì)50年代初期，從河北省石家莊地區(qū)的患豬瘟的病豬中分離到的一株豬瘟強毒，稱為石門株（Shimen strain），將該強毒株通過大耳白兔經(jīng)歷4年多時間，傳代至430代，使毒力減弱成為疫苗株，即C株。,,C株的特點： ①免疫原性良好，經(jīng)肌肉注射可產(chǎn)生堅強的免疫力，并可維持1~2年。②免疫力產(chǎn)生快，48小時產(chǎn)生完全免疫力，96小時產(chǎn)生堅強免疫力。 ③安

5、全性高，反應(yīng)小，各種類型的豬均可使用 ，劑量加大至10~20頭份甚至更大無明顯不良反應(yīng)。 ④穩(wěn)定性好，不變異，不散毒，不返祖。C株疫苗早已是被世界公認(rèn)的優(yōu)秀疫苗，并在國內(nèi)及其它國家廣泛應(yīng)用獲得很高的評價。,豬瘟免疫失敗的原因,疫苗質(zhì)量不高疫苗管理不當(dāng)免疫程序不合理豬群中存在其它免疫抑制病感染母豬持續(xù)感染和仔豬胎盤感染——是免疫失敗的重要原因 豬瘟亞臨床感染→胎盤感染→母豬繁殖障礙→仔豬帶毒

6、 →后備母豬→ 亞臨床感染 免疫后過敏反應(yīng)時有發(fā)生,豬瘟疫苗的制作過程,一、細胞培養(yǎng)1、制苗用細胞牛睪丸細胞或羊腎細胞。2、生長培養(yǎng)液目前的細胞培養(yǎng)液為乳漢（歐）液，或MEM＋10%新生牛血清+1%雙抗（青/鏈霉素），pH7.0～7.2左右。3、維持液目前的維持液為乳漢（歐）液，或MEM＋2～5%新生牛血清+1%雙抗（青/鏈霉素），pH7.4～7.6。,細胞生長良好的幾個注意事項,（1）制苗用細

7、胞應(yīng)選用非豬瘟疫區(qū)，無口蹄疫、粘膜病等傳染病地區(qū)的1～4日齡健康小公?；?0日齡以內(nèi)的健康羔羊。其家H健康生長的（2）培養(yǎng)基和血清的質(zhì)量可靠、穩(wěn)定。應(yīng)確保無外源病毒、支原體、細菌等污染，無牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）及其抗體。用于生產(chǎn)豬瘟細胞苗的牛血清都要事先檢測有無BVDV中和抗體的存在。（3）制備原代牛睪丸細胞時，防止細胞消化過度。（4）合適、營養(yǎng)豐富的細胞培養(yǎng)基。豐富的營養(yǎng)成分對細胞的生長、帶毒狀態(tài)維持和毒價的提高有直接影響

8、。（5）轉(zhuǎn)瓶的洗滌應(yīng)遵循嚴(yán)格的清洗程序。轉(zhuǎn)瓶洗滌不干凈，容易導(dǎo)致細胞不貼壁生長。,二、 病毒感染、維持和收獲1.生產(chǎn)用毒種有脾毒和細胞毒，脾毒是用選擇定型熱反應(yīng)兔脾臟冷凍或凍干保存制備的；細胞毒是將用新鮮脾毒制成0.3%～0.5%的病毒懸液接種生長良好的牛睪丸細胞或羊腎單層細胞，取二收、三收的細胞培養(yǎng)液作為生產(chǎn)用毒種。脾毒應(yīng)選擇兔體反應(yīng)在36小時之前，同時防止脾毒采集過程的污染。,該病毒不產(chǎn)生細胞病變效應(yīng)(CPE)，可連續(xù)多次收液

9、。取已形成良好單層的牛睪丸細胞（或羊腎細胞），棄去培養(yǎng)液，接種含3%～5%細胞毒種或0.2%～0.3%脾毒種的維持液。接毒后4或5日第一次收獲換液，以后每4－6日收獲換液1次，可連續(xù)12～15收左右，有的廠家可收更多。一般來說，12～15收前的毒價合格率高，疫苗質(zhì)量好。接毒時，細胞生長狀態(tài)的好壞影響細胞產(chǎn)毒。也可對細胞帶毒分散，分散比率1：4左右，可增加收次和產(chǎn)量。將檢驗合格的病毒培養(yǎng)液和5%蔗糖脫脂牛奶穩(wěn)定劑按一定比例混合，分裝，進

10、行凍干。,豬瘟病毒的病毒特征,1、豬瘟病毒（HCV）感染細胞超薄切片的電子顯微鏡觀察表明，該病毒顆粒在膜結(jié)合的胞漿內(nèi)空胞中裝配并成熟，然后經(jīng)胞外釋放。2、56℃處理60分鐘或60℃10分鐘可滅活細胞培養(yǎng)液中的HCV。HCV在pH5～10時穩(wěn)定，pH5.2時最適宜生長，但在低于pH4或高于pH11時快速滅活。3、豬瘟病毒的抗原性和血清學(xué)與牛粘膜/病毒性腹瀉病毒(MD/BVDV)密切相關(guān)，兩者同源性很高，能互相誘導(dǎo)一定程度的同源病毒抗體

11、，細胞或培養(yǎng)液中若存在牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)及其抗體，可與豬瘟病毒發(fā)生中和反應(yīng)，造成疫苗生產(chǎn)的失敗。,病毒收獲液毒價不高的可能原因,如果病毒收獲液毒價不高，即病毒家兔感染量（RID）較低，制成的疫苗易造成免疫失敗。豬瘟疫苗生產(chǎn)中毒價不高的可能原因：1）細胞培養(yǎng)液（乳漢液）營養(yǎng)不足，尤其是使用高壓滅菌液，高溫可使一些營養(yǎng)成分損失，造成細胞生長狀態(tài)不良；2）細胞培養(yǎng)液較多存在外源病毒，尤其是牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）會直接造成病

12、毒滴度降低；3）成熟釋放的病毒在維持液中耐受性較差，造成病毒滴度較低；4）病毒毒種毒力較低，并在傳代過程中弱化。,豬瘟疫苗生產(chǎn)工藝改進的幾點考慮,1、使用化學(xué)成分明確的細胞培養(yǎng)基化學(xué)成分明確的細胞培養(yǎng)基一方面能提供足夠的營養(yǎng)，供細胞生長，同時避免動物來源成分（如由水解乳蛋白）帶來外源病毒（如BVDV）及其抗體的污染。2、使用低血清細胞培養(yǎng)基，減少血清使用量，提高細胞維持時間清大天一有適合細胞培養(yǎng)生長的低血清MEM（MD611）

13、細胞培養(yǎng)基，可使血清使用量減少50％左右，減少了外源因子污染的幾率；并且由于該細胞培養(yǎng)基營養(yǎng)成分較傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)基豐富，可提高細胞活力水平，增加細胞維持時的營養(yǎng)供給。3、使用改良的轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細胞使用多層轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細胞可使單位體積溶液內(nèi)的細胞數(shù)量增加，一方面提高了細胞密度，病毒增殖數(shù)量較大；另一方面也對病毒液進行了濃縮，提高了病毒原液的病毒量。4、盡量減少水解乳蛋白的批間差，防止疫苗生產(chǎn)過程的不穩(wěn)定情況。5、使用質(zhì)量保證的牛血清血清是

14、牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）的主要來源，使用質(zhì)量可靠、無外源病毒的血清可減少此類污染。6、篩選、克隆較高毒力的毒種使用營養(yǎng)成分豐富的細胞培養(yǎng)基篩選較高毒力的毒種，并用之做克隆毒種，制備具較高毒力的毒種。7、使用病毒保護劑有資料顯示，在細胞維持液中加入病毒耐熱保護劑可減少無效病毒粒子的產(chǎn)生，提高病毒滴度。,豬瘟精制苗,設(shè)計原理,豬瘟野毒持續(xù)性感染普遍存在，免疫水平偏低或不均，導(dǎo)致非典型、慢性豬瘟和隱性感染 ——采用大

15、劑量的高度免疫，壓制豬瘟強毒的繁殖豬藍耳病、豬圓環(huán)病毒病、豬偽狂犬病等免疫抑制病的存在，影響豬瘟疫苗免疫效果 ——加大免疫劑量，提高免疫效果仔豬母源抗體較高且可維持至35日齡以上，如在20日齡進行豬瘟活疫苗首免時，母源抗體可不同程度干擾豬瘟弱毒株在仔豬體內(nèi)復(fù)制，從而影響免疫效果 ——加大免疫劑量，部分疫苗毒被母源抗體中和后仍能達到理想的免疫效果種豬高強度的反復(fù)免疫，抗體水平較高，對豬瘟疫苗產(chǎn)生中和

16、作用影響免疫效果 ——加大免疫劑量，部分疫苗毒被抗體中和后仍能達到理想的免疫效果,歐洲藥典規(guī)定用C株疫苗免疫時，每頭肌注劑量為100PD50 ——我國原規(guī)程約37PD50臺灣豬瘟細胞苗配苗細胞毒液以160000RID/ml為合格 ——我國原規(guī)程50000RID/ml“精制苗”內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)≥12000RID/頭份 ——我國原規(guī)程750RID/頭份,精制苗特點,配苗用2-4收細胞毒液≥ 5

17、00000RID/ml ——我國原規(guī)程50000RID/ml疫苗病毒含量高，每頭份病毒含量≥12000RID ——采用大劑量高度免疫，壓制豬瘟強毒的繁殖，減少亞臨床感染和慢性豬瘟的發(fā)生，適合豬瘟陽性場豬瘟凈化 ——使用對象主要是種豬，種豬經(jīng)反復(fù)免疫抗體水平很高，考慮到疫苗毒被部分中和后仍能起到理想的免疫效果 采用進口原材料和濃縮純化工藝，每頭份疫苗異源蛋白含量少，大大降低因血清引起的過敏反

18、應(yīng),用法與用量,按要求頭份稀釋，每頭豬肌肉注射1頭份,豬瘟零免苗,設(shè)計原理,豬瘟出現(xiàn)持續(xù)感染，除垂直傳播外，更多的是通過帶毒母豬長期散毒，感染初生仔豬 ——先于野毒快速占領(lǐng)免疫靶位，加速抗原遞呈仔豬母源抗體一般可維持至35日齡以上，在20日齡進行豬瘟活疫苗首免時，母源抗體可不同程度干擾豬瘟弱毒株在仔豬體內(nèi)復(fù)制，從而影響免疫效果 ——避開母源抗體干擾,超前免疫,亦稱乳前免疫或零時免疫 在初生仔豬吮吸

19、初乳前接種疫苗，使其免受母源抗體干擾，并在可能感染豬瘟強毒前讓疫苗株病毒快速占領(lǐng)免疫靶位，誘導(dǎo)免疫反應(yīng)，使初生仔豬獲得免疫保護的一種免疫接種方法。 ——一般初生仔豬免疫后1-2小時哺乳 ，所以考慮部分疫苗毒被母 源抗體中和后仍能達到理想的免疫效果，必須加大免疫劑量,1979：法國Coitheiev等首先提出超前免疫原理1979：臺灣賴秀穗進行豬瘟超前免疫田間試驗 20世紀(jì)80年代

20、初：我國有不少關(guān)于初生仔豬豬瘟超前免疫的報道 1999：中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所豬瘟參考實驗室丘惠深研究員的指導(dǎo)下，開發(fā)出專用于豬瘟超前免疫的“零免”豬瘟細胞苗，并注冊了“零免”商標(biāo)，在全國推廣使用1.8億多頭份，應(yīng)用效果確實,豬瘟零免苗的特點,先于病毒前快速占領(lǐng)免疫靶位，加速抗原遞呈，避開母源抗體干擾，產(chǎn)生較好的免疫力配苗用2-4收細胞毒液≥ 300000RID/ml ——我國原規(guī)程50000RID/ml疫苗病毒含

21、量高，每頭份病毒含量≥6000RID 采用進口原材料、低血清培養(yǎng)和濃縮純化工藝，每頭份疫苗異源蛋白含量少，大大降低因血清引起的過敏反應(yīng),用法與用量,按要求頭份稀釋，初生仔豬哺乳前每頭肌注1頭份，免疫后1小時才可哺乳 (仔豬零時免疫專用：常規(guī)免疫效果更佳),豬瘟脾淋疫苗,抗原性好——為普通細胞苗的5倍抗原含量高——與國際標(biāo)準(zhǔn)接軌低過敏（組織成份單純）——過敏源含量極低非特異性免疫增強——數(shù)十種淋巴細胞免疫因子協(xié)同作用無牛病毒

22、性腹瀉病毒污染風(fēng)險，接種豬群安全免疫豬群抗體水平高，抗體滴度均勻缺點：生產(chǎn)成本高使用：豬瘟的加強免疫、豬瘟的緊急免疫接種控制慢性豬瘟、非典型豬瘟、溫和型豬瘟有特效,我國各種豬瘟疫苗的比較,母豬： 斷奶時注射豬瘟脾淋疫苗1～2頭份 或集中統(tǒng)一免疫，一年注射3次，每次注射豬瘟脾淋疫苗1～2頭份，集中統(tǒng)一免疫時，注意配種后15天內(nèi)、產(chǎn)前15天內(nèi)的母豬不注射，15天后加以補注公豬： 一年免疫二次，每次注射

23、豬瘟脾淋疫苗1～2頭份后備種豬： 使用前注射豬瘟脾淋疫苗1～2頭份。,規(guī)?；i場豬瘟免疫,仔豬：A. 豬瘟非嚴(yán)重污染地區(qū)（場） 20～30日齡（根據(jù)仔豬母源抗體監(jiān)測結(jié)果確定）注射普通豬瘟細胞疫苗4頭份（或零免豬瘟活疫苗2頭份，精制豬瘟苗1頭份/頭，效果更佳，應(yīng)激反應(yīng)更?。?60 ～70日齡時同劑量再加強免疫一次，如選為種用仔豬，建議用豬瘟脾淋疫苗1～2頭份。,規(guī)?；i場豬瘟免疫,仔豬：B.

24、豬瘟污染較重地區(qū),或疑有母豬豬瘟帶毒豬場 采用0-35-70免疫模式，即： 0時免疫，仔豬吃初乳前1小注射零免豬瘟活疫苗1頭份/頭； 35日齡注射零免豬瘟活疫苗2頭份，或精制豬瘟苗1頭份/頭，或豬瘟脾淋疫苗1～2頭份 70日齡注射豬瘟脾淋疫苗1～2頭份,規(guī)?；i場豬瘟免疫,豬瘟細胞苗和豬瘟組織苗的正確使用,豬瘟細胞苗便于工廠化大量生產(chǎn)，且成本較低。在每次免疫劑量不低于750RID的情況下，已

25、可達到既能防止臨床發(fā)病，又能保護不發(fā)生亞臨床感染，所謂達到了“雙保護”的水平，所以使用豬瘟細胞苗免疫在一般情況下即可以滿足需要。但是，細胞苗降解速度較快，如經(jīng)稀釋后在15℃時6小時失效，在20℃~27℃時約3小時失效。豬瘟組織苗毒價高，而且含有非特異性組織，可幫助免疫力的加強。同時降解速度較慢，如組織苗經(jīng)稀釋后在8℃~14℃時72小時、26℃~32℃時48小時仍然有良好的免疫效果，所以在豬瘟發(fā)生較嚴(yán)重的地區(qū)或豬群，可考慮使用組織苗，但是

26、有時某些或某個批次的組織苗引起發(fā)生過敏反應(yīng)的幾率較細胞苗高得多。我國現(xiàn)今生產(chǎn)的豬瘟活疫苗瓶上標(biāo)明為豬瘟活疫苗（Ⅰ）的是組織苗，它包括有牛體反應(yīng)苗、淋脾苗、乳兔苗。在瓶簽上標(biāo)明為豬瘟活疫苗（Ⅱ）的是細胞苗，現(xiàn)在生產(chǎn)的是牛睪細胞苗。,正確使用“豬三聯(lián)苗”,“豬三聯(lián)苗”是指含有豬瘟、豬丹毒、豬多殺性巴氏桿菌三種免疫原聯(lián)合的疫苗，按照“中牧股份”的新近標(biāo)準(zhǔn)，每頭份“豬三聯(lián)苗”中應(yīng)含有豬瘟兔化弱毒≥1050個家兔感染量（RID），豬丹毒G4T10

27、（或GC42）弱毒活菌數(shù)≥5億（或7億），豬多殺性巴氏桿菌（EO630）弱毒菌≥3億?！柏i三聯(lián)苗”的組合基本是合理的，它針對我國常發(fā)生的豬傳染病同時免疫可減少注射次數(shù)，尤其方便于中小養(yǎng)豬場和散養(yǎng)豬戶，但是這三種疫病及所對應(yīng)的疫苗都有其自身的特點，三者難以同時兼顧，所以應(yīng)注意合理使用。從免疫時間上來說，“豬三聯(lián)苗”不要用于斷奶前的仔豬，更不能用于“超前免疫”。對于豬瘟免疫來說，第一次應(yīng)使用單獨的豬瘟疫苗免疫，以后可用“豬三聯(lián)苗”做第二次加

28、強免疫。如對斷奶以后的豬第一次用“豬三聯(lián)苗”免疫，則應(yīng)在3~6周后再用“豬三聯(lián)苗”加強免疫一次。使用“豬三聯(lián)苗”時，不可任意加大劑量，以免引起嚴(yán)重反應(yīng)。豬瘟可發(fā)生于各種日齡的豬，免疫日齡應(yīng)不晚于25~30日齡，而豬丹毒則多發(fā)生于生長育肥豬，免疫時間以60日齡左右為好?！柏i三聯(lián)苗”中所含的豬丹毒桿菌和多殺性巴氏桿菌在遇到抗菌類藥物時會被殺死而致疫苗失效，所以在用“豬三聯(lián)苗”免疫的前7天及注射后的10天之內(nèi)，不能注射或飼喂任何抗菌藥物和含抗

29、菌藥物的飼料?！柏i三聯(lián)苗”經(jīng)稀釋后應(yīng)在2小時內(nèi)用完。,如何正確計算豬瘟疫苗和“豬三聯(lián)苗”的有效期,豬瘟疫苗和“豬三聯(lián)苗”中可使豬產(chǎn)生相應(yīng)免疫力的物質(zhì)是弱的活病毒或活細菌，在不利于它們生存的情況下如在溫度較高等條件時可使免疫原性減弱甚至使疫苗完全失效，所以在制造疫苗時給它創(chuàng)造了真空狀態(tài)并必須低溫保存，以延長它的有效期。但在計算疫苗的保存有效期時，應(yīng)把所使用的疫苗保存溫度累積起來計算，以豬瘟疫苗為例，它的有效期從制成之日起計算，在零下15℃

30、可保存一年；在0℃~8℃可保存6個月；在10℃~25℃保存不超過10天。如有一批豬瘟疫苗在零下15℃保存了半年，又經(jīng)20℃的途中運輸一天，則所剩余的有效時間只有在0℃~8℃兩個月，或者在10℃~25℃已不超過4天的有效時間了。累積計算疫苗在不同溫度的貯藏時間，才能準(zhǔn)確地反映出疫苗的真實有效期，才可避免使用已失效的疫苗而造成免疫失敗。,制定科學(xué)的免疫程序,免疫時間及免疫劑量的安排最好在測定被免疫豬的抗體水平后來決定，在測定抗體水平有困難時

31、可參考以下的免疫程序。豬瘟的免疫：仔豬斷奶時及60日齡左右各一次；在豬瘟發(fā)病較重的地區(qū)，可進行“超前免疫”，以后還應(yīng)在25~30日齡及65~70日齡時再各免疫一次。繁殖母豬于每次仔豬斷奶時免疫一次。后備母豬于配種前21天免疫一次。種公豬每年免疫兩次。免疫劑量在仔豬及青年豬為1頭份（每頭份含量≥1050個RID），其它豬每次2頭份?！柏i三聯(lián)苗”第一次在仔豬斷奶時使用，于50~70日齡時注射第二次，但根據(jù)我國豬瘟發(fā)生流行較為嚴(yán)重的現(xiàn)實，第一

32、次免疫最好用豬瘟單苗，或在第一次用“豬三聯(lián)苗”時用生理鹽水稀釋，以提高對豬瘟的免疫力。,在制定這三種病的免疫程序時還應(yīng)注意： ①盡量避免豬在配種和懷孕期間注射豬瘟疫苗或“豬三聯(lián)苗”。許多研究證明，豬瘟強病毒株或疫苗毒株都可以通過胎盤屏障進入胎兒體內(nèi)，其中有些研究者認(rèn)為疫苗毒株對胎兒無不良影響，強毒株可造成嚴(yán)重的繁殖障礙，但也有研究者認(rèn)為疫苗毒株對胎兒也有不良影響，同時給豬懷孕時注射豬瘟疫苗所分娩的仔豬，在接種豬瘟疫苗時發(fā)生過敏反應(yīng)的幾

33、率增加，再者，根據(jù)免疫的情況，并無理由必須在母豬配種或懷孕時接種豬瘟疫苗，所以不要在配種或豬懷孕期間注射豬瘟疫苗。,②“中牧股份”所屬廠家生產(chǎn)的豬瘟疫苗已將每頭份含毒量提高到1050RID，這已相當(dāng)過去每頭份150個RID的7倍，所以沒有必要將每頭份含1050個RID的疫苗再提高4倍量使用。 ③使用豬瘟超前免疫時應(yīng)有專人守護，嚴(yán)格遵照逐頭在注苗后1.5小時及時吃奶，并注意稀釋后豬瘟苗的保存溫度和有效時間。 ④種公豬及母豬患豬丹毒和豬

34、肺疫的幾率很低，所以一般可不用“豬三聯(lián)苗”免疫。 ⑤各豬場（群）由于豬的母源抗體和殘留抗體等基本情況的不一致，所以應(yīng)根據(jù)本場的實際情況制定適合本場的個性化免疫程序，也即科學(xué)的免疫程序，切忌按其它場的免疫程序死搬硬套。 ⑥注射豬瘟疫苗時應(yīng)避免與藍耳病（PRRS）、偽狂犬?。≒R）、細小病毒（PPV）等病的弱毒苗同時使用；最少應(yīng)間隔一周以上，以防止產(chǎn)生干擾而致免疫失敗。,使用中應(yīng)注意的問題,在養(yǎng)豬生產(chǎn)中使用疫苗時還有些常見的易被忽略或不

35、正確的使用方法，主要應(yīng)該做好： ①每瓶疫苗在使用前，都要做是否真空狀態(tài)的檢查，即將吸有3~5ml稀釋液的注射器，從瓶蓋刺入疫苗瓶中，此時稀釋液應(yīng)自動地被吸入疫苗瓶中，否則是已失去真空的疫苗，不能使用。 ②所使用的注射器和針頭在使用前應(yīng)徹底檢查清洗，然后加水煮沸消毒10~15分鐘，所用的水應(yīng)是軟水或涼開水，或在煮鍋中放一塊紗布以吸取沉淀物質(zhì)。③注射器和針頭不能用任何化學(xué)藥物浸泡、沖洗或擦拭消毒；用酒精棉球包裹針頭也是不允許的。 ④