ig測(cè)定-長(zhǎng)沙醫(yī)學(xué)院

1、第十八章 體液免疫球蛋白測(cè)定,第一節(jié) 血清IgG、IgA、IgM 測(cè)定 一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定 二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義,第二節(jié) 血清IgD和IgE測(cè)定 一、IgD測(cè)定及臨床意義 二、IgE測(cè)定及臨床意義,第三節(jié) 尿液及腦脊液Ig測(cè)定 一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義

2、 二、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義,第四節(jié) 血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義 第五節(jié) M蛋白測(cè)定及臨床意義 第六節(jié) 輕鏈測(cè)定及臨床意義 第七節(jié) 冷球蛋白的檢測(cè),思考題小結(jié),免疫球蛋白（Ig）：抗體活性、化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似重鏈性質(zhì)，Ig分5類：IgG(γ)、IgA(α)、IgM(μ)、 IgD(δ)、IgE(ε)輕鏈性質(zhì)，Ig分2型：κ、λIg占血漿蛋白總量：20%

3、檢測(cè)意義：反應(yīng)機(jī)體的免疫功能、診斷疾病Ig含量：血清 IgG、IgA、IgM：g/L、 IgD、IgE：mg/L 體液 IgG、IgA、IgM：mg/L,第一節(jié) 血清IgG、IgA、IgM 測(cè)定,IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，是血液和細(xì)胞外液中的主要抗體，也是機(jī)體再次免疫的主要抗體。 IgA分為血清型和分泌型，是參與黏膜局部免疫的主要抗體，主要存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中。 Ig

4、M是分子量最大的免疫球蛋白，是個(gè)體發(fā)育過程中最早合成和分泌的抗體，也是抗原刺激誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答中最早出現(xiàn)的抗體。,一、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定,,測(cè)定方法 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法 免疫濁度法,,原理誤差主要原因評(píng)價(jià) 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法示意圖,,,原理 誤差主要原因 評(píng)價(jià),單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法,免疫濁度法,直接透射比濁法 速率散

5、射比濁法 注意點(diǎn) 評(píng)價(jià),二、血清IgG、IgA、IgM測(cè)定的臨床意義,低Ig血癥:先天性低Ig血癥（免疫缺陷?。?； 獲得性低Ig血癥(蛋白丟失). 高Ig血癥:多克隆Ig增高（感染）； 單克隆Ig增高（免疫增殖?。?,第二節(jié) 血清IgD、IgE測(cè)定,正常人血清中IgD含量很低，膜結(jié)合型IgD(mIgD)構(gòu)成BCR，是B細(xì)胞分化發(fā)育成熟的標(biāo)志。 IgE是正常人血清中含量最少的免疫球蛋白，主

6、要由黏膜下淋巴組織中的漿細(xì)胞分泌，為親細(xì)胞抗體，引起I型超敏反應(yīng)；與機(jī)體抗寄生蟲免疫也可能有關(guān)。,一、 血清IgD測(cè)定及臨床意義,測(cè)定方法： 放射免疫分析法 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法,IgD：生物功能不詳 增高：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、變態(tài)反應(yīng)性疾病、 敗血癥、新生兒溶血病 降低：意義不大,二、 血清IgE測(cè)定及臨床意義,測(cè)定方法總IgE測(cè)定：放射免疫分析法

7、 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 免疫比濁法 酶聯(lián)免疫吸附法特異性IgE測(cè)定：免疫斑點(diǎn)法 酶聯(lián)免疫吸附法,IgE臨床意義： 增高：變態(tài)反應(yīng)性疾病、寄生蟲感染、病毒感染、自身免疫性疾病。 降低：意義不大,第三節(jié) 尿液及腦脊液Ig測(cè)定,正常人尿液中的Ig含量甚微，當(dāng)機(jī)體的免疫功能異常或炎癥反應(yīng)引起腎臟疾病時(shí)，可導(dǎo)致腎小球?yàn)V過膜分子屏障破壞

8、或電荷屏障受損，從而引起球蛋白及其他大分子蛋白質(zhì)漏出增多。 生理情況下，Ig根據(jù)其分子量大小，通過血腦屏障的難易度不同，IgG、IgA、IgM在腦脊液中的濃度遞減。病理狀態(tài)時(shí)，腦脊液組分發(fā)生改變。,一、尿液Ig測(cè)定及臨床意義,尿液： 腎小球?yàn)V膜受損程度：選擇性蛋白尿指數(shù) 增高有臨床意義：腎病、免疫增殖病 可根據(jù)尿內(nèi)Ig增高的類型幫助鑒別診 斷腎小球疾病的種類,二、

9、腦脊液Ig測(cè)定及臨床意義,腦脊液： 血腦屏障受損程度：白蛋白商值、CSF-IgG指數(shù) 增高有臨床意義：多發(fā)性硬化癥、中樞神經(jīng)系 統(tǒng)感染,第四節(jié) 血清IgG亞類測(cè)定及臨床意義,Ig亞類：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4，其含量依次下降測(cè)定方法： 單向免疫擴(kuò)散法 免疫比濁法（常用） 放射免疫分析法 酶聯(lián)免

10、疫吸附法臨床意義：IgG亞類的含量隨年齡的不同而變化 免疫缺陷病降低明顯,第五節(jié) M蛋白測(cè)定及臨床意義,M蛋白： B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖產(chǎn)生的異常單克隆免疫球蛋白 臨床上多見于多發(fā)性骨髓瘤、高丙種球蛋白血癥、惡性淋巴瘤、重鏈病、輕鏈病等,M蛋白測(cè)定,蛋白區(qū)帶電泳：經(jīng)典方法 計(jì)算蛋白含量和百分比免疫比濁法： 免疫球蛋白定量 準(zhǔn)確性高、快

11、速免疫電泳： M蛋白分型免疫固定電泳： M蛋白分型及鑒定，分辨 率高,,,,G,A,M,κ,λ,,,IgG-κ型M蛋白,Marker,,免疫固定電泳模式圖,第六節(jié) 輕鏈測(cè)定及臨床意義,本周蛋白的檢測(cè) 樣本：尿液 方法：免疫電泳、加熱沉淀（簡(jiǎn)便易行）κ–Ig和λ-Ig定量檢測(cè) 樣本：尿液、血液 方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散法、免疫比濁法（常用，準(zhǔn)確、快速）應(yīng)用：M蛋白血癥的分型及

12、鑒定,第七節(jié) 冷球蛋白的檢測(cè),冷球蛋白： 在低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的免疫球蛋白 在低溫時(shí)產(chǎn)生冷沉淀的機(jī)制尚不十分明確 多數(shù)冷球蛋白為免疫復(fù)合物，其抗原可以是外源 性的，也可以是內(nèi)源性的,冷球蛋白的類型及臨床意義 I型：為單克隆冷球蛋白型，占25%～40%;多見于免疫增生性疾病 Ⅱ型：?jiǎn)慰寺『投嗫寺』旌闲屠淝虻鞍?，?5%～25%;多見于自身免疫性疾病 Ш型：多克隆混合型冷球蛋白，約占50% ;

13、多見于自身免疫性疾病以及感染性疾病,,1.免疫應(yīng)答主要分為哪幾個(gè)階段？2.什么是免疫球蛋白?其分子基本結(jié)構(gòu)?3.免疫球蛋白分類及亞類?4.血清免疫球蛋白測(cè)定方法有哪些?5.比較單向免疫擴(kuò)散法和速率散射比濁法優(yōu)缺點(diǎn)。6.免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測(cè)定有何臨床意義？,思考題,,7.免疫球蛋白IgG亞類測(cè)定有何臨床意義？8.單向免疫擴(kuò)散測(cè)定中有哪些主要影響因素？9.如何保證速率散射比濁法測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確？10.如何評(píng)估腎小球

14、濾過膜破壞程度？11.如何判定血腦屏障受損程度？12.如何正確選擇測(cè)定M蛋白的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目?,,免疫球蛋白是由漿細(xì)胞所產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合的球蛋白分為IgG 、IgA、IgM、IgE和IgD五類，其相應(yīng)重鏈分別稱為γ鏈、α鏈、μ鏈、δ鏈和ε鏈輕鏈分為κ型和λ型，兩型輕鏈無(wú)功能差異免疫球蛋白定量測(cè)定方法： 單向環(huán)狀免疫擴(kuò)散法、火箭免疫電泳法、 ELISA、免疫比濁法、放射免疫分析法,小結(jié),,臨床意義：