細(xì)胞內(nèi)微核的檢測(cè)

1、實(shí)驗(yàn)（3）遺傳病的分析2,細(xì)胞內(nèi)微核的檢測(cè)系譜分析,細(xì)胞內(nèi)微核的檢測(cè),,原 理,環(huán)境中有害物質(zhì)可導(dǎo)致細(xì)胞中染色體或紡錘體的損傷，產(chǎn)生的染色單體或無(wú)著絲粒染色體片斷在細(xì)胞分裂末期滯留于子細(xì)胞胞質(zhì)中，形成微核。,原 理,本實(shí)驗(yàn)選用培養(yǎng)細(xì)胞，用環(huán)磷酰胺作誘導(dǎo)劑（射線(xiàn)、順鉑等） ，促使細(xì)胞中染色體斷裂，產(chǎn)生微核。 微核經(jīng)Giemsa染色后呈紫紅色，胞質(zhì)被染成淡灰藍(lán)色。,器材與試劑,顯微鏡、載玻片、染色缸、滴管等培養(yǎng)細(xì)胞（小

2、蓋片） 甲醇固定液PBS（pH7.4）Giemsa應(yīng)用液（臨用現(xiàn)配） Giemsa原液：PBS＝1：9混合而成。,操 作,培養(yǎng)細(xì)胞（小蓋片）——加環(huán)磷酰胺1mg/ml——PBS洗滌3次——甲醇固定5min——Giemsa染色5min——自來(lái)水沖洗——顯微鏡下觀(guān)察——計(jì)數(shù),24h,微核的計(jì)算,先用低倍鏡粗檢，后用高倍鏡，選擇細(xì)胞分布均勻，細(xì)胞無(wú)損，著色適當(dāng)?shù)膮^(qū)域，計(jì)數(shù)。 每張玻片計(jì)數(shù)100-200個(gè)細(xì)胞，按